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姜丽丽
作品数:
1
被引量:9
H指数:1
供职机构:
内蒙古医科大学
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发文基金:
国家粮食丰产科技工程
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相关领域:
农业科学
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合作作者
赵瑞霞
内蒙古农牧业科学院
白海
内蒙古农牧业科学院
石海波
内蒙古农牧业科学院
王云生
内蒙古农牧业科学院
高聚林
内蒙古农业大学农学院
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内蒙古医科大...
作者
1篇
刘志雄
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冯勇
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张来厚
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苏二虎
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高聚林
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王云生
1篇
石海波
1篇
白海
1篇
赵瑞霞
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姜丽丽
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华北农学报
年份
1篇
2015
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玉米籽粒蛋白质双向电泳技术体系的优化
被引量:9
2015年
为了获得玉米籽粒双向电泳中蛋白质提取的最佳方法,建立最佳的玉米籽粒蛋白双向电泳技术体系,对酚抽提法、三氯乙酸/丙酮沉淀法( TCA/丙酮沉淀法)和可溶性蛋白提取法3种不同提取方法得到的蛋白质进行了分析,并在相同条件下进行双向电泳比对分析,结果表明:可溶性蛋白提取法获得的蛋白纯度高、浓度适中、双向电泳蛋白质点最丰富,最适合双向电泳研究;利用可溶性蛋白提取法获得的蛋白,对第一向等电聚焦参数等条件,以及不同pH值范围的IPG预制凝胶条进行了比较分析,结果表明:采用pH值3~10的IPG预制凝胶条时,采取电压梯度上升的方式,总聚焦70000 Vhs、上样量800μg效果最佳,采用pH值4~7的IPG预制凝胶条时,总聚焦80000 Vhs、上样量900μg效果最佳,并且采用pH值4~7的IPG预制凝胶条相比pH值3~10的凝胶条能分离到更多的点,最后结合蛋白质点MALDI-TOF-TOF质谱鉴定分析,建立了一套适用于玉米籽粒的蛋白质双向电泳技术方法,即采用可溶性蛋白提取法提取蛋白,采用24 cm、pH值4~7的IPG干胶条,上样900μg电泳效果最佳,等点聚焦程序:500 V、1 h,1000V、1 h,2000 V、1 h,4000 V、2 h,8000 V、4 h,8000 V、80000 Vhs,500 V保持。试验研究为后续玉米籽粒发育差异蛋白研究奠定了技术基础。
石海波
王云生
冯勇
高聚林
白海
苏二虎
张来厚
赵瑞霞
刘志雄
黄灵忠
姜丽丽
关键词:
玉米
籽粒
蛋白组学
双向电泳
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