张伟彬
- 作品数：8 被引量：21H指数：3
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- T_(1083)替换融合质粒载体pGBKT7-T_S转入酵母的自激活实验被引量：1
- 2010年
- [目的]研究T1083替换融合质粒载体pGBKT7-TS转入酵母的自激活实验,探讨其表达产物是否可作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[方法]将T1083替换突变BD融合质粒载体pGBKT7-TS转入酵母后,进行自激活和蛋白表达毒性检测试验。[结果]该片段表达产物无自激活特性且对酵母细胞无毒性,可以作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[结论]为进一步研究NtKRP尾部T1083替换对NtKRP与靶物质结合的影响奠定了实验基础。
- 袁亮纪耀坤张伟彬
- 关键词：酵母双杂交诱饵载体自激活作用
- T_(1083)替换NtKRP尾部BD融合载体pGBKT7-Ts的构建
- 2010年
- [目的]构建T1083替换NtKRP尾部BD融合载体pGBKT7-Ts。[方法]以pBI121KE质粒为模板,通过重叠PCR扩增烟草NtKRP基因尾部含T1083替换的片段,将其克隆入pGBKT7载体。[结果]成功构建了T1083替换突变BD融合质粒载体pGBKT7-Ts。[结论]为进一步研究NtKRP尾部T1083替换对NtKRP与靶物质结合的影响奠定了实验基础。
- 纪耀坤张伟彬袁亮
- 植物抗病基因作用机理及克隆研究进展被引量：11
- 2009年
- 综述了植物抗病基因作用机理及抗病蛋白的类别,介绍了克隆植物抗病基因的不同方法,同时对植物抗病基因克隆提出了展望。
- 袁亮张伟彬
- 关键词：植物抗病基因同源结构域克隆
- T_(1083)替换NtKRP尾部BD融合载体pGBKT7-TS的构建(摘要)(英文)被引量：2
- 2010年
- [目的]扩增烟草NtKRP基因尾部含T1083替换的片段,将其克隆入pGBKT7载体中。[方法]以pBI121KE质粒为模板进行PCR反应,将得到的PCR产物凝胶回收后等摩尔混合,取适量作为模板,得到含定点突变的尾部片段。将该PCR产物克隆入SmaI线性化的pUC19载体,构建含T1083替换的重组子pUC19Ts。通过蓝白斑筛选得到的重组子进行BamHI -SmaI双酶切鉴定,将筛选出的正确重组子送交联合基因测序。将pGBKT7和测序正确的pUC19Ts质粒均用BamHI -SmaI双酶切,分别回收1 320 bp的融合片段和7.3 kb的载体片段进行连接,转化并筛选得到重组子,任意挑取2个单菌培养后提取质粒进行BamHI -SmaI双酶切鉴定。[结果]成功构建了NtKRP尾部含T1083替换的BD融合质粒载体pGBKT7-TS。[结论]为进一步研究NtKRP尾部T替换对NtKRP与靶物质结合的影响奠定了实验基础。
- 纪耀坤张伟彬袁亮
- T_(1083)替换融合质粒载体pGBKT7-T_S转入酵母的自激活试验(摘要)(英文)被引量：3
- 2010年
- [目的]研究T1083替换融合质粒载体pGBKT7-Ts转入酵母的自激活实验,探讨其表达产物是否可作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[方法]将T1083替换突变BD融合质粒载体pGBKT7-TS转入酵母后,进行自激活和蛋白表达毒性检测试验。pGBKT7-TS对报告基因自主激活的检测。将pGBKT7-TS质粒转染S.cerevisiae strainAH109和S.cerevisiaeY187菌株,同时分别转入pGBKT7作为对照,在SD-Trp平板上挑取转化菌落,悬于适量无菌水中,再分别接种于SD-Trp +X-α-gal、SD-Trp-His +X-α-gal、SD-Trp-Ade +X-α-gal和SD-Trp-Ade-His +X-α-gal平板。30℃培养2 ～3 d,观察各平板菌落颜色。确定含有pGBKT7-TS质粒的AH109和Y187酵母细胞内HIS、ADE、Mel1、LacZ报告基因的表达情况。pGBKT7-TS对酵母AH109和Y187的毒性检测、挑取大于2 mm的pGBKT7-TS转化的AH109克隆和pGBKT7-TS转化的Y187克隆各1个,分别接种于50 ml SD/-Trp+Kan(20μg/ml)培养基中,30℃、250 r/min培养16 h,检测OD600,若OD600<0.8,则DNA-BD可能有毒性;若OD600≥0.8,说明DNA-BD无毒性。[结果]转化pGBKT7-TS的酵母菌AH109在SD-Trp +X-α-gal平板和SD-Trp-His +X-α-gal平板上均可长出菌落,但在SD-Trp-Ade +X-α-gal平板和SD-Trp-Ade-His+X-α-gal平板上均无菌落生长,表明转入pGBKT7-TS后His报告基因有泄漏表达,但不能激活ADE和MELI报告基因。毒性检测试验中,重复2次,其OD600均大于0.8,说明DNA-BD融合蛋白对酵母AH109和Y187的生长无毒性,可以作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[结论]为进一步研究NtKRP尾部T1083替换对NtKRP与靶物质结合的影响奠定了试验基础。
- 袁亮纪耀坤张伟彬
- 关键词：酵母双杂交诱饵载体自激活作用
- 平菇秋季保护地发酵料袋栽技术被引量：1
- 2011年
- 食用菌的栽培方法中平菇培养料的发酵处理具有典型借鉴意义,具有推广价值。
- 张伟彬王爱武王莉
- 关键词：平菇培养料发酵
- 豆卷叶野螟的发生与综合防治被引量：1
- 2012年
- 总结了豆卷叶野螟的形态特征、发生规律、生活习性、为害症状及综合防治方法。
- 郭秀英张伟彬
- 分子蒸馏技术及其在植物药用有效成分研究中的应用被引量：3
- 2010年
- 介绍了分子蒸馏技术的概念、工作原理与特点,就该技术在植物药用有效成分研究中的应用进行了探讨。
- 袁亮张伟彬
- 关键词：分子蒸馏技术
