李研
- 作品数：13 被引量：16H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学理学轻工技术与工程更多>>
- 抗人IgG和抗人IgM单克隆抗体的特性鉴定及应用被引量：3
- 2018年
- 目的:制备特异性高的抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体,并应用于临床血清学检测试剂盒,为其提供优质的二抗。方法:以人Ig G和Ig M为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤融合和筛选技术制备抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体;经体内诱生法制备腹水并纯化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western印迹进行交叉筛选和特异性鉴定,并对筛选出的单抗进行辣根过氧化物酶(HRP)标记,再与市售的检测病原微生物抗体试剂盒中对应的HRP标记的二抗(抗人Ig G和抗人Ig M)做对比分析。结果:筛选到2株可稳定分泌抗人Ig G单抗和2株抗人Ig M单抗,经交叉反应、Western印迹及对比实验分析,证明这4株单抗效价高、特异性好,比临床试剂盒中的酶标二抗特异性强、敏感度高。结论:获得4株特异性强、敏感度高的抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体,可为各种病原微生物血清学的检测提供二抗试剂,具有良好的应用价值。
- 封青郭春艳郭春艳王珍梁导艳李研
- 关键词：人IGG单克隆抗体
- 运用单克隆抗体分析流感病毒H1亚型HA蛋白的抗原表位被引量：5
- 2012年
- 目的对甲型流感病毒H1亚型血凝素蛋白的抗原表位进行分析。方法以前期获得的97株抗H1亚型HA抗原的单克隆抗体为研究工具,用间接ELISA方法对不同亚型的血凝素抗原进行反应,将H1亚型HA蛋白的抗原表位进行粗分类,用ELISA阻断试验对抗原表位进行细分类。选取两类抗原表位的抗体,通过计算机模拟分析抗体与抗原结合的结构域,推测抗体结合的具体氨基酸位点。结果根据抗体的交叉反应性不同,将流感病毒H1亚型的HA的抗原表位分为8类;根据ELISA阻断试验的初步结果,H1亚型HA抗原的抗原表位又被细分为15类,通过计算机模拟分析预测的抗体与流感病毒HA抗原结合的氨基酸位点结果与ELISA阻断试验结果相吻合。结论证明流感病毒H1N1亚型HA抗原上至少含有15个抗原表位,且通过ELISA阻断试验和计算机模拟分析得到了相互印证,为流感病毒血凝素HA抗原表位预测方法的完善及通用疫苗的研制提供了实验数据。
- 李慧瑾郭春艳赵彭花赵彭花李研李研李元高锦伟
- 关键词：流感病毒抗原表位
- 优化硫酸铵法纯化单克隆抗体被引量：1
- 2022年
- 改进硫酸铵法纯化单克隆抗体,优化硫酸铵的饱和度,让最终饱和度达45%,通过两次沉淀,使单克隆抗体的纯度进一步提升,再利用醋酸缓冲液去除杂蛋白,最终得到便于保存的单克隆抗体。优化后的硫酸铵法提取出蛋白质的纯度大大提高,且浓度和效价都高于传统方法,能纯化出与亲和层析纯度相媲美的单克隆抗体。优化后的硫酸铵沉淀法简单便捷,易于操作且纯化抗体纯度高,也便于抗体保存。
- 李研徐翠香黄晓燕孙晶莹常乐杨晓丽靳占奎王建华
- 关键词：单克隆抗体沉淀法盐析法
- 甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体轻链和重链可变区基因的巢式PCR扩增及序列分析
- 2013年
- 目的:采用巢式PCR对甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体的轻链和重链基因进行扩增,对获得的基因进行序列分析,并找出克隆鼠Igκ轻链和重链可变区基因的通用方法。方法:设计22对扩增鼠Igκ轻链可变区和重链可变区基因的引物,对6株鼠抗人甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体的轻链和重链可变区基因进行克隆并测序,与NCBI公布的鼠免疫球蛋白序列比对分析。结果:巢式PCR方法可以有效避免单克隆抗体克隆过程的假基因,并且得到的单克隆抗体的氨基酸序列均符合鼠免疫球蛋白可变区特征。结论:建立了克隆鼠免疫球蛋白轻链和重链可变区基因的通用方法,为后期克隆鼠源性单克隆抗体的可变区基因提供了基础,并为研究甲型H1N1流感病毒血凝素与抗体的结合位点提供了实验数据。
- 李慧瑾李研孙晶莹高锦伟赵向绒封青谭天天胡巧侠李元胡军
- 关键词：甲型H1N1流感病毒可变区巢式PCR
- 三聚氰胺单克隆抗体制备与鉴定被引量：3
- 2020年
- 目的制备高度特异的三聚氰胺单克隆抗体,经酶联免疫吸附试验鉴定并制备胶体金试剂盒。方法以牛血清白蛋白交联的三聚氰胺为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤融合和筛选技术制备抗三聚氰胺单克隆抗体,经纯化制备腹水,采用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immune sorbent assay, ELISA)对抗体进行效价测定、亚类测定、交叉鉴定和蛋白质免疫印迹试验(westernblot)特异性鉴定后制备胶体金试剂盒。结果筛选出1株抗三聚氰胺单抗,制备的三聚氰胺胶体金试剂盒敏感值能达到30μg/L。结论获得了高度特异的且能稳定分泌三聚氰胺抗体的细胞株。
- 封青李研李研李研孙晶莹
- 关键词：单克隆抗体酶联免疫吸附
- 三聚氰胺单克隆抗体不同纯化方法的比较被引量：3
- 2022年
- 为了建立更适用于三聚氰胺单克隆抗体的纯化方法,分别采用了硫酸铵两次沉淀法、正辛酸-硫酸铵沉淀法、凝胶过滤层析法、亲和层析法、阴离子交换层析法对三聚氰胺单克隆抗体进行纯化。对纯化后的三聚氰胺单克隆抗体的纯度、浓度、效价进行鉴定,对比不同纯化方法之间的差异。结果证明亲和层析法对于三聚氰胺单克隆抗体纯化最为适宜。由于亲和层析法纯化纯度高,快速便捷,对三聚氰胺单克隆抗体损伤小,最为推荐。研究者也可结合自身条件,参考文中数据结果,根据实验需要自行选择适合自身的纯化方法。
- 李研李研封青冯杨萌孙晶莹
- 关键词：亲和层析法
- 抗菌钛合金Ti24Nb4Zr8Sn-8Cu抗菌性能及生物相容性初步评价
- 2023年
- 研究含铜抗菌钛合金Ti2448(Ti24Nb4Zr8Sn)的生物相容性。电弧炉熔炼的Ti24Nb4Zr8Sn和Ti24Nb4Zr8Sn-8Cu合金材料,分别与金黄色葡萄球菌、MC3T3-E1细胞共培养,通过荧光染色、显微观察、电镜观察、流式检测,来研究合金材料抗菌性能和生物相容性。Ti24Nb4Zr8Sn合金材料对金黄色葡萄球菌无抗菌作用,而Ti24Nb4Zr8Sn-8Cu合金材料对细菌有较强的抑制作用;Ti24Nb4Zr8Sn和Ti24Nb4Zr8Sn-8Cu合金材料均对MC3T3-E1细胞没有影响。Ti24Nb4Zr8Sn-8Cu合金材料拥有良好的抗菌性,具有良好的生物相容性,适合用于骨科内植入材料。
- 李研徐翠香黄晓燕封青赵向绒靳占奎
- 关键词：合金材料生物相容性MC3T3-E1金黄色葡萄球菌
- NB-UVB对黑素细胞黑素合成相关基因表达的影响被引量：2
- 2021年
- 目的:研究NB-UVB照射对黑素细胞的细胞活性、黑素合成、黑素合成相关基因表达的影响。方法:培养黑素细胞系PIG1,利用MTT法检测不同剂量NB-UVB(400、800、1200、1600、2000 mJ/cm 2)照射后细胞的增殖率,采用NaOH裂解法测定细胞中的黑素含量,RT-PCR和Western blot方法检测UVB照射后12个黑素合成相关基因Tyr、Tyrp1、Tyrp2、OA1、MART-1、Pmel17、VAT-1、OCSP、syntenin、CHCHD3、flotillin-1、GPNMB的mRNA和蛋白的表达。结果:NB-UVB照射剂量在400、800、1200 mJ/cm 2时,细胞活力无明显变化,照射剂量为1600、2000 mJ/cm^(2)时细胞活力明显下降。NB-UVB照射剂量为400、800、1200 mJ/cm^(2)时,随着照射剂量的增加,黑素的合成增加;NB-UVB照射后,12种黑素体蛋白中,Tyr、Tyrp2、GPNMB、Syntenin、MART-1的基因mRNA及蛋白表达显著升高。结论:UVB照射显著增加了黑素合成和相关基因的表达。
- 孙晶莹封青李研霍雪萍孙丽君
- 关键词：窄谱中波紫外线黑素细胞
- 微量淋巴细胞毒试剂盒中阳性血清的研制与鉴定
- 2022年
- 目的研制微量淋巴细胞毒(CDC)试剂盒中阳性血清,为临床检测节约成本。方法收集近年来临床检测人类白细胞抗原(HLA)配型的供者和受者外周血,用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞,通过多次免疫新西兰大白兔得到抗人淋巴细胞的抗体,即为试剂盒中的阳性血清,提取兔血清进行效价测定和微量淋巴细胞毒实验,与试剂盒中自带的阳性血清作对比分析;并对兔血清进行加速稳定性实验,采用过度升高和降低温度的条件来增加抗体降解的速度,来验证血清的稳定性。结果免疫的两只兔子中,在做微量淋巴细胞毒实验中,1号兔子在免疫第十一次后实验组中死亡细胞比例已接近阳性对照组,在免疫第十二次后实验组中死亡细胞比例高于阳性对照组,2号兔子的实验组中死亡细胞比例最高只达50%,经验证对比1号兔子的血清比试剂盒中的阳性血清效果更佳,且效价达10^(7),获取总量达60mL,并对其做加速稳定性实验,具有很好的稳定性。结论此研究方法适宜于研发部门参考文中成熟的研究方法,开发微量淋巴细胞毒试剂盒为其提供优质的实验材料,并可大批量制备后投放于市场,由于其制备成本低,也较易得到,其大大降低了试剂盒的制作成本,具有很好的实际应用价值。
- 封青胡巧侠李研孙丽君孙晶莹梁导艳郭春艳
- 关键词：群体反应性抗体阳性血清稳定性器官移植
- H1N1流感病毒HA蛋白抗原表位预测方法研究
- 2018年
- 目的对H1N1流感病毒血凝素（hemagglutinin，HA）蛋白抗原表位预测方法进行研究。方法用H1N1流感病毒裂解疫苗常规法免疫BALB／c小鼠，取脾细胞与骨髓瘤细胞（SP2／O）融合、克隆化筛选，获得特异性单克隆抗体（monoclonal antibody，mAb），辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）标记各株mAb，ELISA阻断试验检测各mAb相互阻断结果；克隆各mAb的轻链和重链可变区基因，并用计算机模拟预测各mAb结合HA抗原表位的氨基酸位点。结果获得稳定分泌抗H1N1流感病毒HA蛋白的杂交瘤细胞3株；ELISA阻断试验将3株mAbs分为2类；计算机模拟预测将3株mAbs也分为2类。结论ELISA阻断试验和计算机模拟预测在解析H1N1流感病毒HA蛋白抗原表位时可以相互佐证。
- 郭春艳刘杨封青梁导艳梁导艳李慧瑾孙晶莹李研赵彭花赵向绒
- 关键词：H1血凝素抗原表位
