杨静
- 作品数：17 被引量：60H指数：5
- 供职机构：武警后勤学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 基于BOPPPS模式的“传染病学”雨课堂教学探索与实践被引量：6
- 2022年
- 随着新发传染病的出现及传统传染病的复燃,传染病学的学科地位受到更多关注和重视。针对卫生士官学员基础知识相对薄弱,以及“传染病学”课程教学尚不能满足基层部队对卫生防疫人才紧前需求的现状,将融合“雨课堂”教学的BOPPPS模式引入“传染病学”课堂教学,充分利用BOPPPS模型六个教学环节和“雨课堂”智慧教学平台的优势,使学员扎实掌握基础知识并培养其解决实际问题的综合能力。基于BOPPPS模式的“传染病学”雨课堂教学强调参与式学习与智慧教学的有机融合,是具有更高质效的新型教学模式。
- 李覃叶路毛立群杨静李灵芝
- 关键词：传染病学教育改革
- ERα/β表达对人乳腺癌细胞增殖能力及他莫西芬敏感性的影响被引量：1
- 2016年
- 【目的】研究ERα/β表达对人乳腺癌细胞增殖能力及他莫西芬(tamoxifen,TAM)敏感性的影响并探讨其机制。【方法】选择ERα^(high)/ERβ^(high)的人乳腺癌细胞MCF-7细胞,采用RNA干扰技术构建ERα/ERβ表达水平不同的乳腺癌细胞株;采用MTT法和RT-PCR技术对构建后乳腺癌细胞株的增殖能力、凋亡抑制基因表达以及TAM敏感性进行检测。【结果】与MCF-7细胞相比,构建后ERα^(low)/ERβ^(high)MCF-7/ERαsh RNA细胞的增殖能力降低(P<0.05),其凋亡抑制基因Bcl-2的表达亦降低(P<0.01);而ERα^(high)/ERβ^(low)MCF-7/ERβsh RNA细胞的增殖能力增强(P<0.05),其凋亡抑制基因XIAP、Bcl-xl和Bcl-2的表达均显著升高(P<0.01)。乳腺癌细胞TAM敏感性的检测结果显示,ERα^(high)/ERβ^(high)的MCF-7、MCF-7/scrambled sh RNA细胞和ERα^(high)/ERβ^(low)MCF-7/ERβsh RNA细胞均对TAM敏感(P<0.05),其中以ERα^(high)/ERβ^(low)MCF-7/ERβsh RNA细胞最为敏感(P<0.01);而ERα^(low)/ERβ^(high)MCF-7/ERαsh RNA细胞对TAM不敏感(P>0.05)。【结论】ERα可促进乳腺癌细胞的增殖及其对TAM的敏感性;而ERβ则抑制乳腺癌细胞的增殖及其对TAM的敏感性。
- 毛立群黄素辉牛秀珑杨静屈野郭小芹葛新王越
- 关键词：乳腺癌雌激素受体他莫西芬
- 自分泌IL-6经Ras/MEK/ERK、PI3K/Akt通路促进卵巢癌细胞黏附和侵袭功能的研究被引量：16
- 2016年
- 目的探讨内源性IL-6表达改变对卵巢癌细胞黏附和侵袭功能的影响及相关信号转导通路。方法利用以往构建的内源性过表达IL-6的人卵巢癌A2780细胞系和内源性抑制IL-6表达的人卵巢癌SKOV-3细胞,分别采用细胞体外黏附实验、Transwell小室体外侵袭实验、免疫印迹技术等观察IL-6对卵巢癌细胞黏附、侵袭能力的影响,并对其可能的信号通路进行研究。结果与对照组相比,内源性过表达IL-6可促进卵巢癌细胞的体外黏附和侵袭功能;抑制IL-6表达则可抑制卵巢癌细胞的上述功能。过表达或抑制表达IL-6可增加或减少卵巢癌细胞磷酸化ERK、Akt的表达水平,应用ERK或Akt特异性信号阻断剂可显著抑制高表达IL-6的卵巢癌细胞黏附和侵袭作用,提示可能与其活化Ras/MEK/ERK、PI3K/Akt通路有关。结论卵巢癌细胞产生的IL-6可经Ras/MEK/ERK和PI3K/Akt通路增强自身的黏附和侵袭能力,调节IL-6表达及相关信号转导通路可能是未来临床控制卵巢癌进展的一种良好策略。
- 王丹陈晓徐葳杨静郭小芹葛振华王越
- 关键词：IL-6卵巢癌细胞
- IL-6经PI3K/Akt通路诱导卵巢癌细胞对他莫西芬耐药被引量：10
- 2017年
- 目的:探讨IL-6诱导卵巢癌细胞对他莫西芬(tamoxifen,TAM)耐药的分子机制。方法:构建内源性过表达IL-6的人卵巢癌A2780细胞系和内源性抑制IL-6表达的人卵巢癌CAOV-3细胞,50 ng/ml外源性IL-6预处理A2780细胞(A2780/pre IL-6细胞),Western blotting检测内/外源IL-6对卵巢癌细胞ERαSer167位磷酸化水平的影响;IL-6与PI3K抑制剂Wortmannin单独或联合作用于A2780细胞,Western blotting检测其对A2780细胞Akt磷酸化和ERα磷酸化的影响;MTT法检测Wortmannin和内/外源IL-6对A2780细胞TAM敏感性的影响;荧光素酶报告基因检测卵巢癌细胞ERα的转录活性,并分析其可能涉及的信号通路。结果:外源性及内源性过表达IL-6可明显促进A2780细胞ERαSer167位点磷酸化水平(均P<0.01),而内源性抑制IL-6表达则可降低CAOV-3细胞ERαSer167位点的磷酸化水平(P<0.01);Wortmannin可阻断IL-6诱导的A2780细胞对TAM的耐药及ERα的磷酸化(P<0.05);IL-6可促进细胞ERα的转录活性(P<0.01),而Wortmannin并不能阻断IL-6对ERα的转录活性的影响(P>0.05)。结论:IL-6可经PI3K/Akt通路引起ERα磷酸化从而活化ER信号通路,进而诱导卵巢癌细胞对TAM耐药。
- 赵雅瑮孙旸黄素辉杨静王越李玲郭小芹李艳秋
- 关键词：卵巢癌白细胞介素-6他莫西芬雌激素受体PI3K/AKT通路
- 白细胞介素-6对人卵巢癌细胞中雌激素受体亚型的调控作用被引量：1
- 2018年
- 目的研究白细胞介素-6(IL-6)对雌激素受体(ER)亚型表达水平的影响,探讨二者在卵巢癌内分泌治疗耐药机制中的关系。方法从癌症基因图谱(TCGA)数据库获取535例卵巢癌样本,分别按IL-6和ER亚型相关基因表达的高低比较卵巢癌的无进展生存率,并分析总体IL-6基因与ER亚型基因的相关性。脂质体转染质粒法获得内源性过表达IL-6的A2780细胞株和内源性抑制IL-6表达的CAOV-3细胞株。采用RT-PCR检测外源性和内源性IL-6作用于卵巢癌细胞后ERα和ERβ基因水平的变化,Western blot法检测上述ER亚型的蛋白水平。结果 TCGA数据库中高表达IL-6和ERα/ERβ卵巢癌的无进展生存率均低于各自的低表达者(P <0. 05)。IL-6基因与ERα基因呈显著正相关、与ERβ基因呈显著负相关(P <0. 01)。外源性及内源性过表达IL-6在A2780细胞中能上调ERα及下调ERβ的表达量,内源性抑制IL-6表达在CAOV-3细胞中则能下调ERα及上调ERβ的表达量,基因和蛋白表达相一致,ER亚型的变化程度对IL-6呈剂量依赖性。结论在卵巢癌细胞中IL-6能促进ERα并抑制ERβ的表达,提示IL-6可能通过调节ER亚型来参与卵巢癌的病程进展以及内分泌治疗耐药的形成。
- 张桐硕马晓霞宋姜楠李艳秋杨静王越
- 关键词：卵巢癌雌激素受体白细胞介素-6耐药性
- 低氧反应元件荧光素酶报告载体的构建及鉴定
- 2015年
- 【目的】构建低氧反应元件(hypoxic response element,HRE)荧光素酶报告载体,以检测和分析细胞内低氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF-1)表达。【方法】化学合成HRE的核心启动子序列(6×HRE),将其定向克隆入p GL3-BASIC,经PCR、酶切和测序鉴定,获得p GL3-HRE荧光素酶报告载体;然后以p GL3-HRE和β-gal DNA共转染MG63细胞,通过物理和化学低氧来检测其活性,并western blotting分析转染细胞HIF-1表达水平。【结果】获得了p GL3-HRE荧光素酶报告载体,PCR、酶切和测序鉴定均与预期一致;物理低氧(1%O2)和化学低氧(不同浓度Co Cl2)均可诱导转染MG63细胞荧光素酶表达水平的升高(P<0.05),其中以Co Cl(3002μmol/L)组最为显著,western blotting结果也显示Co Cl2(300μmol/L)组HIF-1表达水平更为显著(P<0.05),与荧光素酶表达趋势一致。【结论】成功构建了HRE荧光素酶报告载体,为进一步研究HIF-1的表达调控作用及筛选抗低氧药物提供了工具。
- 屈野陈晓杨静郭小芹李玲王越
- 关键词：低氧诱导因子低氧反应元件荧光素酶报告基因
- 骨桥蛋白影响破骨细胞、成骨细胞参与骨重塑过程的研究进展被引量：9
- 2014年
- 骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种多功能、分泌型糖蛋白,介导骨组织细胞与骨基质间的桥接,广泛参与骨相关疾病及骨质重塑过程,显示出多效的生物学活性。由于成骨细胞和破骨细胞之间的动态平衡是骨重塑最关键的环节,因此,本文就OPN对破骨细胞、成骨细胞的影响,以及在骨重塑中所起作用进行综述,希望能为骨相关疾病的检测与防治提供研究思路。
- 王增田王心杨静肖颖张秋燕李覃邢杰
- 关键词：骨桥蛋白破骨细胞成骨细胞骨重塑
- IL-6对人卵巢癌细胞体外增殖及锚定非依赖生长能力的影响被引量：3
- 2015年
- 目的研究内源性IL-6对卵巢癌(ovarian cancer,OVCA)细胞体外增殖及锚定非依赖生长能力的影响并探讨其作用机制。方法应用前期建立的内源性过表达IL-6的人卵巢癌A2780细胞株和内源性抑制IL-6表达的人卵巢癌SKOV-3细胞株,分别采用MTT法、双层软琼脂集落形成实验、流式细胞术、RT-PCR和Western blot技术检测IL-6对OVCA增殖及锚定非依赖生长能力的影响,并对其作用机制进行研究。结果与对照组细胞相比,过表达IL-6的A2780细胞的增殖及锚定非依赖性生长能力增强(P<0.01),而IL-6抑制表达的SKOV-3细胞则降低(P<0.01)。进一步研究表明IL-6促OVCA细胞增殖作用是通过改变细胞周期分布而非抑制细胞凋亡来实现的;过表达IL-6可显著提高A2780细胞的Cyclin D1、Cyclin B1的表达水平,而抑制IL-6表达则明显降低SKOV-3细胞的Cyclin D1、Cyclin B1的表达水平;应用ERK或Akt特异性信号阻断剂可显著抑制高表达IL-6的A2780细胞增殖及Cyclin D1、Cyclin B1的表达水平。结论 IL-6能促进OVCA细胞的增殖和锚定非依赖性生长,IL-6促OVCA细胞增殖作用是通过增加Cyclin D1、Cyclin B1表达水平从而改变细胞周期分布来实现的,并与活化的PI3K/Akt、Ras/MEK/ERK信号通路有关。
- 毛立群王丹郭小芹杨静屈野李玲王越
- 关键词：IL-6细胞增殖卵巢癌
- HIF-1α在肿瘤上皮-间质转化过程中作用的研究进展被引量：2
- 2016年
- 低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)通过调节不同靶基因的转录活性及其表达,参与肿瘤增殖、凋亡、侵袭转移和血管发生等诸多环节,其过度表达与恶性肿瘤的不良预后密切相关。上皮-间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)已被证实在人肿瘤细胞的侵袭转移过程中起关键作用。研究发现,在低氧微环境中EMT相关转录因子过表达,而HIF-1α可介导这些转录因子的表达进而促进EMT过程。本文就HIF-1α在肿瘤EMT过程中的作用及研究进展做一综述。
- 王丹葛振华王佩婷杨静郭小芹王越
- 关键词：低氧诱导因子-1Α上皮-间质转化肿瘤
- 葛根素抑制人成骨样MG-63细胞凋亡的分子机制研究被引量：3
- 2019年
- 目的研究葛根素抑制人成骨样MG-63细胞凋亡的分子机制。方法建立顺铂诱导的成骨细胞凋亡模型,DAPI染色法检测葛根素对MG-63细胞凋亡的影响,RT-PCR和蛋白免疫印迹法分别检测凋亡相关因子Bcl-xL mRNA和蛋白的表达水平,应用ER阻断剂ICI 182,780和小RNA干扰技术探讨葛根素调节成骨细胞凋亡的作用机制。结果顺铂10μmol/L组MG-63细胞凋亡率高于对照组,葛根素+顺铂组低于顺铂10μmol/L组(P <0. 05)。不同浓度葛根素组MG-63细胞Bcl-xL mRNA和蛋白表达水平均高于对照组(P <0. 05)。葛根素+ICI+顺铂组成骨细胞凋亡率高于葛根素+顺铂组(P <0. 05)。葛根素+顺铂组MG-63/scrambled、MG-63/ERα和MG-63/ERβshRNA细胞凋亡低于顺铂组(P <0. 05)。结论葛根素抑制顺铂诱导的人成骨样MG-63细胞凋亡作用是经ER途径,由ERα和ERβ共同介导的。
- 董瓅瑾高丹丹杨静郭小芹王越金鑫
- 关键词：葛根素成骨细胞细胞凋亡
