肖成建
- 作品数：4 被引量：34H指数：3
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金江苏省自然科学基金江苏省高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 黑曲霉葡萄糖氧化酶基因在毕赤酵母SMD1168中的表达被引量：5
- 2017年
- 在毕赤酵母SMD1168中利用乙醇氧化酶AOX1强启动子表达黑曲霉葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,GOD)。提取黑曲霉Aspergillus niger PCTC的基因组DNA,以此为模板进行PCR扩增获得葡萄糖氧化酶基因,将目的基因插入到具有AOX1强启动子的表达载体p PICZαA上,经电转化导入毕赤酵母SMD1168中。经zeocin抗性平板初筛、摇床复筛以及SDS-PAGE蛋白质电泳的检测,获得了一株产葡萄糖氧化酶活力的菌株,该株菌在30℃、200 r/min的培养条件下,经体积分数1.0%的甲醇诱导发酵1 d可获得1.12 U/mL的酶活。对该菌株进行了摇瓶产酶条件优化,其最佳发酵条件为:在pH 5、30℃下经体积分数1.5%甲醇诱导7 d,酶活为32 U/mL。
- 陈楠肖成建范新蕾李汉广余晓斌
- 关键词：葡萄糖氧化酶黑曲霉毕赤酵母异源表达启动子
- ARTP诱变选育葡萄糖氧化酶高产菌株及发酵条件优化被引量：23
- 2015年
- 利用常压室温等离子体诱变技术对产葡萄糖氧化酶的黑曲霉菌株进行诱变处理,通过平板筛选以及摇瓶复筛选出8株酶活较高的菌株,其中产酶活力最高的突变株为PCTC-8,酶活达到14.36 U/m L,较初始菌株的酶活提高了117.25%。然后在优化培养基的基础之上通过单因素实验对诱变菌株的发酵条件进行优化,最终确定最优的发酵条件为:接种量10%,装液量30 m L,种龄24 h,发酵时间48 h,转速225 r/min,在此条件下最高酶活可达到93.26 U/m L。
- 范新蕾肖成建顾秋亚罗玮余晓斌
- 关键词：黑曲霉葡萄糖氧化酶
- ARTP诱变及高效筛选高产葡萄糖氧化酶菌株被引量：8
- 2016年
- 以黑曲霉为出发菌株,采用常压室温等离子体(ARTP)注入技术对前培养后的出发菌株进行诱变,并结合改进后的邻联茴香胺高效平板显色圈进行初筛及摇瓶复筛。获得一株产葡萄糖氧化酶高产菌株,其产量由出发菌的45.6 U/m L提高到85.3 U/m L。通过对发酵关键条件碳酸钙和吐温-80添加量进行优化,结果显示酶活提高到125.6 U/m L,较原始菌株提高了175.4%。经6代传代培养,产葡萄糖氧化酶性能稳定。
- 肖成建陈楠江慰罗玮王强李汉广余晓斌
- 关键词：葡萄糖氧化酶诱变黑曲霉
- 响应面法优化黑曲霉产葡萄糖氧化酶发酵条件被引量：2
- 2014年
- 为了提高葡萄糖氧化酶的产量,通过响应面法对诱变后的黑曲霉菌株的发酵条件进行优化,首先利用Plackett-Burman设计筛选出对酶活影响最显著的因素:牛肉膏蛋白胨、吐温-60和磷酸氢二铵;继而用最陡爬坡实验逼近最大影响区域;最后利用Box-Behnken设计及其响应面分析确定最优的发酵培养基(g/L):蔗糖87.5,牛肉膏蛋白胨3.15,NH4NO31.88,(NH4)2HPO40.34,KH2PO40.25,Tw-60 30.47,玉米粉12.5,培养基优化后的发酵酶活为87.5 U/m L,与优化前(45.27 U/m L)相比提高了93.28%。在7 L发酵罐中对显著影响因素吐温-60的不同添加时间进行对比,确定对数期流加吐温-60可以显著提高发酵的酶活,发酵后酶活为92.88 U/m L。
- 范新蕾肖成建顾秋亚罗玮余晓斌
- 关键词：葡萄糖氧化酶响应面法黑曲霉
