赵振国
- 作品数：3 被引量：16H指数：1
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
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- AC133和EpCAM在人肺腺癌中的表达及双阳性细胞的分选
- 2009年
- 目的:通过双重免疫荧光染色法检测人肺腺癌组织标本中AC133以及上皮细胞黏附分子(EpCAM)的表达,并以流式细胞术分选AC133+EpCAM+细胞,为后续人肺腺癌干细胞研究提供实验基础。方法:取人肺腺癌组织标本,冰冻切片,进行双重免疫荧光染色,通过激光共聚焦显微镜检测腺癌组织内AC133和EpCAM的表达。以胶原酶和分散酶将新鲜肺腺癌组织标本制为单细胞悬液,滤除其中的胶原并去除红细胞后,以AC133和EpCAM共同标记单细胞,上流式细胞仪进行分选。结果:在人肺腺癌标本中具有AC133和EpCAM的表达;通过流式细胞术可分选到AC133和EpCAM共表达细胞。结论:验证了人肺腺癌组织中AC133和EpCAM的表达情况;通过流式细胞术分选获得AC133和EpCAM双标记阳性细胞,可为人肺腺癌干细胞的后续研究提供实验基础。
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- 关键词：AC133上皮细胞黏附分子流式细胞术
- 小鼠肺腺癌动物模型的建立被引量：1
- 2009年
- 目的通过建立小鼠肺腺癌动物模型,为下一步筛选肺腺癌形成过程中重要miRNAs提供实验平台。方法采用Lox-stop-lox K-ras G12D小鼠鼻腔吸入AdCre重组腺病毒的方法建立小鼠肺腺癌模型,以分散酶和Ⅳ型胶原酶酶解消化模型小鼠肺组织为单细胞悬液并以免疫荧光染色的方法检测其CD34、Sca-1的表达情况。结果通过Lox-stop-lox K-ras G12D小鼠鼻腔滴入AdCre成功建立了小鼠肺腺癌模型,模型小鼠中有CD34、Sca-1的表达。结论成功建立小鼠肺腺癌动物模型,为后续筛选小鼠肺腺癌发展过程中重要miRNA提供了实验基础。
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- 关键词：肺腺癌动物模型
- 基因表达谱芯片分析人肺腺癌干细胞与肺正常干细胞的差异基因表达被引量：15
- 2009年
- 目的比较肺腺癌干细胞与正常肺干细胞基因表达水平的差异。方法应用cDNA微阵列技术对肺腺癌和正常肺来源的干细胞的基因表达情况进行检测和比较,采用流式细胞分离技术分离2种干细胞,抽提细胞总RNA、扩增、Cy3染色后,与Agilent 4×44K人全基因组芯片杂交,扫描荧光信号,以Agilent feature extraction数据分析软件分析荧光信号,挑选差异表达基因,进一步对差异表达基因进行GO分析和pathway分析;以qRT-PCR验证芯片结果。结果在肺干细胞全基因组约41 000个基因中,肺腺癌和正常肺来源干细胞的差异表达基因多达5798个(Cut off=2.0);Agilent feature extraction数据分析软件显示2种细胞有明显不同的表达谱;GO分析表明在生物过程中,生物调节相关的差异表达基因占41%,其它比例较高的有细胞组分形成和发生、包内信号级联放大、细胞分化、细胞周期等;在分子功能中,72%的差异表达基因与结合有关,其它比例较高的包括转移酶活性、激酶活性和酶调节活性;在细胞组分方面,分布比较平均,包膜占13%,其它为非膜结合细胞器、胞外区、细胞组分、大分子复合物组分等;pathway分析显示wnt通路有明显差异,共有14个基因表达差异明显。原癌基因中共有11个原癌基因的表达发生了差异性改变,有3个基因上调倍数超过了10,分别是RAB25、MERTK、EGFR,而AKT3下调达到10倍。qRT-PCR结果与芯片结果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺腺癌干细胞与正常肺干细胞在基因表达水平有明显差异。
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- 关键词：肺腺癌干细胞基因表达CDNA芯片基因本体论信号通路
