孟凤珍
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：武汉大学基础医学院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种快速定量检测猴组织中SIV/SHIV的方法
- 2020年
- 目的以猴-人免疫缺陷病毒(simian-human immunodeficiency virus,SHIV)gag基因为特异性扩增靶标,建立一种快速、灵敏、特异的TaqMan实时荧光定量PCR法检测猴血浆、外周血单核细胞和淋巴结中的猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)和SHIV。方法以SHIVSF162p3n gag基因为模板,用普通PCR方法扩增出109 bp DNA片段用于克隆构建标准品质粒pGEM^®-T-SHIV gag。通过对SHIV标准品质粒定量分析,优化反应体系,检测TaqMan实时荧光定量PCR方法的灵敏度、特异度和重复性。结果TaqMan实时荧光定量PCR法能有效地检测出10^2~10^7 copies/μL SIV/SHIV gag基因mRNA,线性系数为R^2=0.998,slop=-3.304。方法重复性检测显示CV%在0.6%~1.1%之间。结论该TaqMan实时荧光定量PCR法具有快速、灵敏和特异性高的优点,适用于SIV/SHIV感染猴动物模型的研究工作。
- 高歌孟凤珍姚艳丰
- 关键词：猴免疫缺陷病毒灵敏度
- TaqMan实时荧光定量PCR检测动物组织中结核分枝杆菌的研究被引量：2
- 2016年
- 目的以结核分枝杆菌的IS6110基因为特异性分子扩增靶标,利用TaqMan实时荧光定量PCR检测动物组织中结核分枝杆菌,以期作为科研或临床组织标本中结核分枝杆菌的检测方法。方法从155份小鼠、豚鼠和恒河猴的肺和脾组织中提取DNA,用TaqMan实时荧光定量PCR检测结核分枝杆菌IS6110基因,计算方法的灵敏度和特异度。结果实时荧光定量PCR对组织中结核分枝杆菌的最低检出限为1CFU/ml组织研磨液,其灵敏度和特异度分别为95.6%(95%CI:89.5%-98.4%)和100%(95%CI:89.6%-100%);相比而言,培养法的灵敏度和特异度分别为82.3%(95%CI:73.7%-88.6%)和100%(95%CI:89.6%-100%)。两种方法的kappa系数为0.762(95%CI:0.79-0.965)。结论 TaqMan实时荧光定量PCR能快速检测感染组织中的结核分枝杆菌,具有高灵敏度和特异度,适用于科研和临床实验室对组织标本中结核分枝杆菌的检测。
- 孟凤珍郭铭周立高建峰霍文哲
- 关键词：结核分枝杆菌
- 结核病实验室诊断方法研究进展被引量：4
- 2017年
- 2016年WHO统计数据显示，全世界新增结核病患者1004万例，死亡140万例。我国2012年新增结核病患者占全球新增例数的12％。结核分枝杆菌对外界环境有很强的抵抗力，且能通过空气传播。早期快速诊断对于预防和控制结核病至关重要，但传统的检测方法存在灵敏度和特异度低，操作繁琐等缺点。近年来，随着对结核病研究和认识的不断深入，结核分枝杆菌的检测技术有了长足的进步。
- 孟凤珍周立霍文哲
- 关键词：结核病患者实验室诊断方法结核分枝杆菌早期快速诊断数据显示
