朱德燕
- 作品数:3 被引量:6H指数:1
- 供职机构:四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 酿酒酵母钙调蛋白依赖性激酶-2的过量表达及其在氧化胁迫应答中的作用初探被引量:1
- 2009年
- 利用PCR方法扩增钙调蛋白依赖性激酶(CaM-dependent kinase 2)基因的蛋白质编码序列,经限制性内切酶KpnI和BamH I酶切后连接入空载体pYES2/NTA构建真核表达载体,构建的pYES2/NTA-cmk2转化酿酒酵母菌株BY4741进行真核表达.经诱导和收集细胞后,对酵母细胞用玻璃珠震荡破壁,收集上清液进行镍离子亲和层析,并纯化CMK2,纯化的蛋白通过免疫杂交检测.并且初步研究了CMK2在酵母细胞氧化胁迫应答中的作用.
- 薛薇孙毅钟彦朱德燕刘科
- 关键词:酿酒酵母
- 酵母(Saccharomyces cerevisiae)蛋白激酶SCH9激活环磷酸化调控胁迫应答被引量:6
- 2010年
- 通过比较野生型、△sch9和△sch9(SCH9-3HA)三种酵母菌种在葡萄糖、半乳糖、蔗糖和麦芽糖作碳源培养基上的生长表型研究SCH9是否参与酵母不同碳源代谢利用调控.结果显示,△sch9细胞菌落大小较野生型细胞小且有明显的生长缺陷,但这种生长缺陷在重新获得sch-3HA基因后得到恢复.通过比较野生型、△sch9和△sch9(SCH9-3HA)三种酵母菌种在渗透压胁迫和热胁迫条件下的生长表型发现sch9可能参与了酵母胁迫应答.利用抗SCH9570位磷酸化苏氨酸特异性抗体(anti-T570-P),通过变性免疫沉淀和免疫印迹方法,研究了生理条件下的△sch9(SCH9-3HA)细胞裂解液中SCH9激活环的磷酸化状态.结果显示,在生理条件下SCH9激活环T570位点发生了明显磷酸化.进一步研究了渗透压胁迫条件下SCH9激活环T570位点的磷酸化水平.结果表明,渗透压胁迫条件下SCH9激活环T570位点磷酸化水平较生理条件下显著增强.结果显示SCH9可能通过增强激活环磷酸化水平来参与调控酵母不同碳源代谢和胁迫应答.
- 刘军闾磊朱德燕苗敏曹红平钟彦刘科
- 关键词:酵母胁迫蛋白激酶信号传导
- 酵母(Saccharomyces cerevisiae)Sch9蛋白激酶PDK1位点体内磷酸化的研究被引量:1
- 2009年
- 根据 Sch9氨基酸序列中激活区570位苏氨酸(T570)位点,也被称为 PDK1位点附近的氨基酸序列设计了一段磷酸化多肽,并获得了570位磷酸化苏氨酸特异性抗体.实验表明该抗体可有效区别 Sch9 PDK1位点的磷酸化和非磷酸化.使用该抗体检测生理条件下表达的 Sch9蛋白,发现 Sch9的 PDK1位点在生理条件下发生了明显的磷酸化.
- 朱德燕刘军黄新河薛薇刘科
- 关键词:酵母蛋白激酶位点信号传导