朱旭国
- 作品数:2 被引量:5H指数:1
- 供职机构:上海师范大学生命与环境科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程更多>>
- 聚乙二醇共沉复溶双水相法提纯氯过氧化物酶的条件研究被引量:4
- 2010年
- 来源于海洋真菌Caldariomyces fumago的氯过氧化物酶是一种用途广泛的氧化酶,由于它在生物合成过程中浓度积累低、活力稳定性差,高纯度酶提纯过程回收率低,价格昂贵等原因限制了氯过氧化物酶的应用.利用亲水聚合物PEG6000在高离子强度下失水沉淀夹带酶蛋白特点,结合PEG/(NH4)2SO4双水相萃取得到高浓度酶蛋白,再经Sephadex G-75柱层析纯化可得到高纯度酶样品.结果显示:60%饱和度的(NH4)2SO4溶液可使PEG6000夹带沉淀出总酶活力95%的氯过氧化物酶,酶在PEG/(NH4)2SO4双水相系统中上下相分配率k可以达到0.228以下,回收率达到65.2%,纯度提高了7.4倍,柱层析后酶纯度只略有提高,总回收率稍有下降.研究结果为低浓度生物活性物质的高效率提取提供了新的途径.
- 朱旭国许甜甜杜宁李焱卢轶陈军
- 关键词:氯过氧化物酶共沉淀双水相系统提取纯化
- 海洋真菌Caldariomyces fumago产氯过氧化物酶的双水相提纯条件被引量:1
- 2010年
- 采用聚乙二醇(PEG6000)在(NH4)2SO4高饱和度下沉淀夹带蛋白质富集氯过氧化物酶,再利用磷酸盐溶液复溶解共沉淀物形成的双水相萃取体系高浓度回收酶蛋白,最后再经Sephadex G100柱层析纯化获得高纯度酶试样。结果显示:氯过氧化物酶与PEG共沉淀总活力回收率达85.5%,酶在优化的PEG/磷酸盐双水相系统中上下相分配系数k在0.341以下,酶活力回收率达到69.1%,纯度提高了21.57倍,柱层析可使酶纯度进一步提高到24.79倍,总回收率为37.75%。
- 陈军杜宁许甜甜夏志华张书翠朱旭国
- 关键词:氯过氧化物酶双水相萃取