杨凯
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：武警后勤学院附属医院更多>>
- 发文基金：天津市卫生局科技基金国家自然科学基金天津市科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学机械工程化学工程更多>>
- 弹性模量影响神经干细胞的生长及分化
- 培养载体的硬度、弹性模量及接触面积等细胞生长的物理环境都对神经干细胞的生长分化具有一定的影响。。实验首先经拉伸试验得出天塑硅胶膜和SMI硅胶膜的弹性模量低于普通培养皿,且SMI硅胶膜低于天塑硅胶膜。然后提取孕16d SD...
- 杨凯陈旭义涂悦张赛
- 关键词：神经再生神经干细胞力学性质弹性模量免疫荧光星形胶质细胞
- 大鼠皮质少突胶质细胞培养条件的优化被引量：2
- 2016年
- 背景:由于少突胶质细胞主要来自少突前体细胞,实验通过提取少突胶质前体细胞获取少突胶质细胞的过程中,选择合适的培养基和细胞接种密度对生长及形态学观察具有重要影响。目的:对比优化少突胶质细胞的培养条件。方法:取48 h内的SD新生鼠大脑皮质前体少突胶质细胞。分别用DMEM/高糖、DMEM/F12培养基培养少突胶质前体细胞,每组接种密度分别2×104/cm2,4×104/cm2,8×104/cm2,16×104/cm2,32×104/cm2,64×104/cm2;分别于少突胶质前体细胞贴壁72 h后,进行诱导分化,分化7 d后的少突胶质前体细胞在光镜下观察细胞形态变化并通过免疫荧光技术对细胞进行鉴定。结果与结论:DMEM/高糖、DMEM/F12培养基以2×104/cm2,4×104/cm2,8×104/cm2接种密度时,可辨识完整少突胶质前体细胞形态。诱导分化7 d后,免疫荧光鉴定提示3组少突胶质前体细胞均可呈现髓鞘碱性蛋白阳性,F12组中2×104/cm2,4×104/cm2,8×104/cm2接种密度条件下细胞均数分别为16.40±3.30,49.95±2.33,76.95±4.86,高于相应条件下的高糖组12.65±2.53,32.10±1.17,54.05±1.56(P<0.05)。结果表明,DMEM/F12较DMEM/高糖培养基适于少突胶质细胞培养,在一定范围内,少突胶质前体细胞分化为少突胶质细胞随接种密度成梯度增多,接种密度在4×104/cm2-8×104/cm2范围对观察细胞形态观察较为适合。
- 杨凯李一鹏刘英富程远驰汤锋武梁冰徐忠伟陈旭义
- 关键词：少突胶质前体细胞少突胶质细胞细胞密度分化国家自然科学基金
- Slit 2N与丝素蛋白混合物诱导大鼠海马神经元迁移的体外模型建立
- 2017年
- 目的:利用Slit排斥导向迁移和丝素蛋白,探索建立简便可行、经济实惠、作用持久的神经元导向迁移模型新方法。方法:提取SD新生鼠海马组织,以专用细胞培养片体外培养神经元,分为空白对照组、单纯丝素蛋白、单纯Slit 2N和Slit 2N与丝素蛋白混合物组(以下简称混合物组),分别随机选择不同视野下50个神经元,用显微镜拍照记录胞体坐标及突起状态,除空白对照组外,其他3组均距每个神经元100μm处添加相应诱导物,共观察30 min,再次记录后,用免疫荧光染色法鉴定细胞性质及其阳性率。结果:单纯Slit 2N组和混合物组均可见突起向浓度低处迁移或弯曲,且长度有所缩短,空白对照组和单纯丝素蛋白组未见明显变化。突起变化的平均持续时间及平均长度差从大到小依次为混合物组、单纯Slit 2N组、单纯丝素蛋白组(P<0.05),单纯丝素蛋白组和空白对照组间无明显变化(P>0.05)。四组神经元MAP-2阳性率均达到90%以上。结论:丝素蛋白对Slit 2N诱导大鼠海马神经元迁移作用无明显影响,可有效减缓Slit 2N扩散速度,使作用时间延长,为治疗中枢神经系统疾病建立三维神经定向修复提供有利的体外实验构建基础。
- 刚琳李一鹏卢磊卢磊孙中磊杨凯涂悦
- 关键词：丝素蛋白海马神经元神经修复
- 一种非振荡法提取少突胶质细胞及布洛芬对细胞发育影响研究
- 杨凯刘英富任敏欢程远驰陈旭义
