梁健
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：清华大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 合浦珠母贝丝氨酸蛋白酶抑制因子基因pfser1克隆与表达
- 2020年
- 【目的】克隆合浦珠母贝(Pinctada fucata)丝氨酸蛋白酶抑制因子pfser1基因,探讨该基因的组织表达及其在天然免疫过程中的作用,以及与生物矿化过程的关系。【方法】通过RACE技术获得pfser1基因的全长,通过生物信息学分析其序列结构特征,利用实时荧光定量PCR方法检测pfser1基因在不同组织中的表达,检测健康合浦珠母贝在被大肠杆菌(Escherichia coli)MG1655刺激后和在贝壳损伤修复实验中pfser1基因表达量的变化。【结果】合浦珠母贝pfser1基因cDNA全长为1240 bp,包含1035 bp的开放阅读框(ORF),编码344个氨基酸,氨基酸序列的功能结构域含有丝氨酸蛋白酶抑制因子Serpin家族保守结构域。pfser1基因在合浦珠母贝各个组织中均有表达,在外套膜边缘膜中表达量最高;大肠杆菌MG1655刺激后,该基因表达量显著升高;在贝壳损伤修复过程中,pfser1基因表达先升高后受到抑制。【结论】pfser1基因所表达的蛋白参与了合浦珠母贝的天然免疫应答过程,并与生物矿化过程有一定关系。
- 陈爽梁健张荣庆
- 关键词：合浦珠母贝基因克隆基因表达天然免疫
- 合浦珠母贝Pf-Cnot2基因的克隆与表达分布
- 2014年
- 采用RACE技术从合浦珠母贝外套膜组织中克隆得到了CCR4-NOT复合体第二亚基(Cnot2)基因,命名为PfCnot2。该基因全长2 616 bp,开放阅读框为1 725 bp,编码574个氨基酸,理论分子量为61 ku,理论等电点为6.25。蛋白序列分析表明它富含丝氨酸、甘氨酸和苏氨酸,具有保守的NOT2_3_5结构域。系统进化分析显示Pf-Cnot2蛋白与脊椎动物的Cnot2蛋白进化关系较远。Pf-Cnot2在合浦珠母贝的外套膜边缘、外套膜缘膜、足、生殖腺、内脏团、闭壳肌和鳃等组织中均有表达,在生殖腺中表达量最高。该基因从担轮幼虫期至幼贝期均有表达,担轮幼虫期表达量最少,D型期比担轮幼虫期有显著增高。上述研究结果为进一步了解Pf-Cnot2在合浦珠母贝中发挥的作用提供了基础数据。
- 王雨亭徐广锐梁健谢军谢莉萍张荣庆
- 关键词：合浦珠母贝基因克隆
- 合浦珠母贝基质蛋白KRMP-3对二价金属离子选择性的研究被引量：1
- 2013年
- 用大肠杆菌表达含有GST标签的基质蛋白KRMP-3。利用圆二色谱(Circular Dichroism,CD)研究不同浓度钙离子和镁离子对基质蛋白KRMP-3二级结构的影响。结果表明,钙离子对其二级结构的变化远大于镁离子;同时,采用荧光淬灭法研究KRMP-3对钙,镁,锶,钡等二价金属离子的选择性,结果表明,KRMP-3对钙离子有特异性选择性,钙离子与KRMP-3的结合常数K约为103L/mol,结合位点数n近似为1,表明KRMP-3与钙离子的结合能力适中,推测基质蛋白KRMP-3对合浦珠母贝(Pinctada fucata)棱柱层形成起到促进作用。
- 吴晨苏境坦梁健梁晓谢莉萍张荣庆
- 关键词：生物矿化离子选择性
