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DHA藻油脂质体对小鼠免疫功能调节作用研究被引量：4: 2021年; 目的研究脂质体对二十二碳六稀酸(docose hexaenoie acid,DHA)在肠上皮细胞中转运、吸收的特性并观察其对小鼠免疫功能的作用。方法采用Caco-2细胞模型测定脂质体对DHA在肠细胞摄取、表观渗透系数(apparent permeability coefficients,Papp)的影响,高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定DHA含量。KM小鼠体内实验中,将KM小鼠按照体重随机分为4组,即空白对照组、DHA藻油组(200 mg/kg)和DHA藻油脂质体组(50,200 mg/kg),观察其对免疫功能的作用。结果制备的DHA藻油脂质体包埋率为98.16%,DHA藻油和DHA藻油脂质体质量浓度在25-200 μg/mL对Caco-2细胞无明显毒性作用。DHA藻油和DHA藻油脂质体的表观渗透系数[顶侧(apical,AP)→基底侧(basolateral,BL)]值均大于1×10^(-6) cm/s,且药物外排率(efflux ratio,ER)小于2。DHA 藻油(200 mg/kg)、DHA 藻油脂质体(50 mg/kg)和DHA藻油脂质体(200 mg/kg)对小鼠的体重无明显的影响(P>0.05);与空白对照组比较,DHA藻油和DHA藻油脂质体能够显著增加溶血空斑数、溶血素水平、吞噬指数、免疫器官系数(P<0.05或P<0.01),且对小鼠单核巨噬细胞的吞噬能力有显著的增强作用(P<0.05或P<0.01);此外,与空白对照组比较,DHA藻油(200 mg/kg)、DHA藻油脂质体(50,200 mg/kg)还能显著增强KM小鼠自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)活性(P<0.05或P<0.01)。结论 DHA藻油和DHA藻油脂质体在肠细胞中的跨膜吸收以被动扩散为主,脂质化后能够显著增强DHA的生物利用度,DHA藻油脂质体具备与DHA藻油相似的免疫调节作用,且DHA藻油脂质体对小鼠免疫功能的作用最为显著。; 姚壮民陈琼王万里梁健崔绍华; 关键词：脂质体免疫功能

不同药性中药对肝郁脾虚动物模型代谢的影响被引量：4: 2021年; 目的探究以干姜、白术、茯苓、薏苡仁、黄连为代表的五种不同药性的归脾经中药对肝郁脾虚证动物模型代谢影响有何不同。方法采用随机分组方法,将KM小鼠平均分为正常组、模型组、给药组(五组)。通过夹尾刺激法建立肝郁脾虚证模型,给药组分别给予上述五种药物灌胃。三周后给药结束,测量小鼠体重体温后解剖小鼠,之后测定血清生化指标并考察肝脏病理损伤情况。结果与正常组比较,模型组小鼠出现代谢异常的情况,体重体温降低,体内血糖、甘油三酯和胆汁酸的水平升高,白蛋白的水平下降,肝脏出现炎症。五种不同药性的归脾经中药均能一定程度上改善这些情况,其中增加体重和升高体温的效果以干姜、薏苡仁最好(P<0.01或P<0.05);调节糖脂代谢和保护肝损伤以茯苓、白术最好(P<0.01或P<0.05)。以黄连效果最差。结论五种不同药性的归脾经中药对肝郁脾虚证动物模型代谢情况的影响程度不同,非寒凉药的效果更好。; 闻一凡黄海阳梁健肖红钰许仕杰; 关键词：五性肝郁脾虚证代谢肝损伤

铁皮石斛对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用被引量：16: 2016年; 目的:考察铁皮石斛对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用.方法:昆明小鼠随机分为正常组,模型组,铁皮石斛榨汁低、中、高剂量组[质量分数分别为0.5,1,2(g/kg)],当飞利肝宁组[DFLGN质量分数0.5(g/kg)].除正常组外,各组每天采用酒精灌胃造模,同时分别给予相应治疗药物.2周后测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,并观察肝组织形态学改变,应用Western Blot法检测肝组织凋亡通路p53和Bcl-2蛋白的表达情况.结果:与模型组比较,铁皮石斛干预后,血清ALT、AST水平显著下降(P<0.05);肝组织病理HE染色显示胞浆水样变性及气球样变有所改善;肝组织中抗凋亡蛋白Bcl-2显著上升(P<0.05).结论:铁皮石斛对急性酒精性肝损伤具有保护作用.; 袁慧琦梁楚燕梁健侯少贞黄松赖小平; 关键词：铁皮石斛急性酒精性肝损伤凋亡

巴戟天对人源结肠癌细胞HCT-116移植瘤的抑制作用及机制初步探讨被引量：5: 2022年; 目的:检测巴戟天对人源结肠癌细胞HCT-116移植瘤的抑制作用及初步探讨其作用机制。方法:于雄性裸鼠腋下注射人源结肠癌HCT-116细胞,建立移植瘤模型,随后采用巴戟天乙醇提取物(Ethanol extract of Morinda officinalis,EEMO)(12 mg/kg/d)和巴戟天生药(Crude drug of Morinda officinalis,CDMO)(200 mg/kg/d)为实验组进行灌胃给药,以5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)为阳性药(30 mg/kg,每3 d给药一次,腹腔注射),以水(一次/d)为对照组,共四组(EEMO组、CDMO组、5-FU组和对照组),持续给药23 d。通过检测各干预组动物的肿瘤重量、肿瘤体积、肿瘤组织病理变化判断巴戟天的抑癌作用;通过检测肿瘤组织血管生成因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和环氧化酶-2(COX-2)的表达水平以及巨噬细胞的极化趋势初步探讨其抑癌途径。结果:EEMO和CDMO能不同程度抑制小鼠移植瘤体积的增长(P<0.05)、降低移植瘤的重量(P<0.01)和降低血清前列腺素E2(PGE2)的水平(P<0.05)。蛋白免疫印迹和免疫组化的检测结果显示EEMO和CDMO可显著下调肿瘤组织VEGF、HIF-1α和COX-2的表达水平(P<0.01和P<0.05)。免疫荧光检测结果显示,EEMO和CDMO极显著增加iNOS的表达水平(P<0.01),并且极显著提高i NOS/CD206的比例(P<0.01)。结论:EEMO和CDMO对小鼠体内的移植瘤发生有抑制作用,可能与其下调VEGF、HIF-1α和COX-2/PGE2信号通路的表达、增强巨噬细胞向M1型极化有关。; 李灿涛卢颖裕陈勇儿梁健梁健陈鑑强; 关键词：巴戟天移植瘤结肠癌

迷迭香酸抑制自噬诱导HepG2细胞凋亡的作用研究被引量：6: 2019年; 目的:观察迷迭香酸(RA)对HepG2细胞凋亡和自噬的作用,探讨自噬与凋亡之间的相互作用。方法:用不同浓度迷迭香酸作用于HepG2细胞24h、48h、72h。MTT法检测细胞存活率,观察迷迭香酸对HepG2细胞核形态的影响,流式细胞术检测细胞凋亡变化,台盼蓝染色法观察细胞自噬泡情况,透射电镜观察HepG2细胞的自噬变化,蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3、Bcl-2和自噬相关蛋白(LC3)、p62的表达水平。采用迷迭香酸+3-甲基腺嘌呤(3-MA,自噬抑制剂)或迷迭香酸+雷帕霉素(RAP,自噬诱导剂)分别培养处理HepG2细胞,观察细胞增殖、细胞凋亡情况及相关蛋白表达变化。结果:与对照组相比,迷迭香酸(6.25、12.5、25、50、100、200μmol/L)均能降低HepG2细胞的存活率,诱导HepG2细胞发生凋亡,具有量效和时效关系,减少细胞内自噬泡和自噬小体,降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值,减少Bcl-2的表达,增加Cleaved Caspase-3、p62蛋白的表达。与迷迭香酸25μmol/L处理组相比,迷迭香酸25μmol/L+3-MA 1.0μM/mL应用可诱导HepG2细胞凋亡增加,可进一步减少细胞内自噬泡和自噬小体数目,降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值,进一步抑制HepG2细胞的自噬水平,减少Bcl-2的表达,增加Cleaved Caspase-3和p62表达;迷迭香酸25μmol/L+RAP 1.0μM/mL处理HepG2细胞,增加细胞内自噬泡和自噬小体数目,升高LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值,可以抑制和逆转迷迭香酸诱导的细胞自噬水平下降,增加Bcl-2的表达,减少Cleaved Caspase-3和p62表达,细胞凋亡水平下降,这说明抑制或增强自噬时,迷迭香酸能改变对HepG2细胞的凋亡影响作用。结论:迷迭香酸可通过抑制自噬促进HepG2细胞的凋亡。; 冯传平丁海霞梁健刘颖新姚淑琼; 关键词：迷迭香酸 HEPG2细胞自噬凋亡

狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对人肝癌裸鼠移植瘤抑制作用及机制研究被引量：1: 2020年; 目的:观察狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对人肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨其机制。方法:建立荷瘤裸鼠动物模型,给药后观察并测量裸鼠瘤体,计算体积大小,并绘制生长曲线。分离瘤体后,计算抑制率,病理组织学检查,TUNEL染色检测移植瘤细胞凋亡。透射电镜观察瘤组织细胞的自噬小体和细胞超微结构,Western blot法检测Beclin1、Atg5、CyclinD1、Caspase-3、Bax、Bcl-2、nm23-Hl和MMP-9蛋白表达。结果:与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮50、100、200 mg/kg具有显著抑制移植瘤生长的作用(P<0.01)。与5-氟尿嘧啶20 mg/kg相比,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮100 mg/kg+5-氟尿嘧啶20 mg/kg联合应用能显著地降低肿瘤/体重比(P<0.01)。病理组织检查发现,与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮50、100、200 mg/kg能促使癌细胞核分裂相对减少,肿瘤细胞发生凋亡,可见比较明显的重度坏死。TUNEL染色实验发现,与模型对照组比较,5-氟尿嘧啶20 mg/kg、华蟾素624 mg/kg、联合组、狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮100、200 mg/kg能诱导细胞凋亡,移植瘤细胞凋亡率均有显著提高(P<0.01)。电镜观察移植瘤细胞超微结构发现,与模型对照组比较,联合用药组、狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮各剂量组可抑制细胞自噬体的形成。与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮100、200 mg/kg能促使细胞核固缩,碎裂、溶解,出现凋亡小体。Western blot法分析表明,与模型对照组比较,狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮三个剂量组、联合组及两个阳性药组能显著上调Bax和Caspase-3蛋白和下调Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平,诱导移植瘤HepG2细胞发生凋亡(P<0.01),能抑制Beclin1、Atg5、CyclinD1、MMP-9等蛋白的表达,能促进nm23-Hl蛋白的表达(P<0.01),抑制HepG2细胞转移,进而抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长。结论:狭基线纹香茶菜水溶性; 冯传平刘艳李福元梁健刘颖新姚淑琼丁海霞; 关键词：相关蛋白

基于网络药理学及体外细胞实验分析生姜泻心汤治疗溃疡性结肠炎的潜在作用: 2024年; 目的:基于网络药理学及体外细胞实验分析生姜泻心汤治疗溃疡性结肠炎(UC)的潜在作用。方法:运用中医系统药理学数据库及分析平台(TCMSP)筛选生姜泻心汤的活性成分及相关靶点,利用GeneGards、在线人类孟德尔遗传(OMIM)、药物遗传学和药物基因组学知识库(PharmGkb)、治疗靶点数据库(TTD)和开放数据药物和药物靶标数据库(DrugBank)筛选UC疾病靶点,将药物靶点与疾病靶点匹配所得交集靶点导入互作基因/蛋白质检索工具(STRING)数据库构建蛋白相互作用(PPI)网络,并构建药物-成分-靶点-疾病网络。采用分子对接分析核心靶点和活性成分结合力,并通过脂多糖(LPS)诱导人结直肠腺癌细胞(Caco2细胞)损伤模型,给予生姜泻心汤干预24 h后,采用qPCR和免疫荧光探索生姜泻心汤对核心靶点的作用。结果:生姜泻心汤治疗UC的有效成分共215个,靶点171个,其中潜在核心有效成分为姜烯酮A、槲皮素、山柰酚、汉黄芩素和柚皮素;核心靶点包括HIF1A、STAT3、CTNNB1、CASP3、AKT1、IL-1β、TP53、EGFR和JUN。分子对接结果显示,AKT1、TP53和IL-1β与姜烯酮A、槲皮素、山柰酚、汉黄芩素和柚皮素均有较强的结合能力。细胞实验发现,生姜泻心汤干预LPS刺激Caco2细胞模型,能显著地抑制AKT1、TP53和IL-1β基因和蛋白的表达。结论:生姜泻心汤能够调控AKT1、TP53和IL-1β等靶点,发挥治疗UC的作用。; 熊诗琳林小荷黄松侯少贞刘昌辉姜小艳梁健; 关键词：溃疡性结肠炎生姜泻心汤网络药理学

益气扶正复方提取物对小鼠免疫功能及荷瘤生存时间的影响被引量：2: 2015年; 目的研究益气扶正复方提取物对小鼠免疫功能及荷瘤生存时间的影响。方法采用小鼠碳廓清法和鸡红细胞所致的血清溶血素抗体生成实验来观察益气扶正复方提取物对免疫的调节作用,通过检测S180腹水瘤小鼠生命延长率实验来测定药物对荷瘤小鼠的影响。结果益气扶正复方提取物低、中、高剂量组的脾脏系数,廓清指数K的值均大于醋酸泼尼松模型组(P<0.05);益气扶正复方提取物低、中、高剂量组及青春宝组的血清溶血素水平的值均大于空白组(P<0.01);益气扶正复方提取物低、中、高剂量组及氟尿嘧啶组的生命延长率均大于空白组(P<0.01)。结论益气扶正复方提取物具有提高机体免疫力和抗肿瘤作用。; 梁健梁楚燕吴亚运刘华桢朱冬梅侯少贞; 关键词：益气扶正免疫功能荷瘤小鼠

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梁健

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