- 一种抗肿瘤的生物标志物及其扩增引物对和应用
- 本发明提供了一种抗肿瘤的生物标志物及其扩增引物对和应用，特别涉及生物医药领域。本发明提供了一种抗肿瘤标志物，所述生物标志物包括基因AC090116.1；所述生物标记物能够作为抗肿瘤的标志物。本发明证实通过抑制所述生物标记...
- 徐广贤蒋丹谢小亮张艳婷周海金
- 一种微小分子RNA‑758‑3p及其作为抗肿瘤标志物的用途
- 本发明提供了一种微小分子RNA‑758‑3p(miR‑758‑3p)及其在预防和治疗肝癌疾病以及抗肿瘤药物中的应用，所述miR‑758‑3p的核苷酸序列如下所示：5`‑UUUGUGACCUGGUCCACUAACC‑3`。...
- 徐广贤蒋丹张爱君丁淑琴李振昊楚元奎
- 一种艰难梭菌谷氨酸脱氢酶的纳米抗体、编码序列及其筛选方法和应用
- 本发明提供了一种艰难梭菌谷氨酸脱氢酶的纳米抗体、编码序列及其筛选方法和应用，属于免疫学技术领域。本发明提供了艰难梭菌谷氨酸脱氢酶的纳米抗体的氨基酸序列。采用噬菌体展示技术，将带有恒定区特定基因序列插入到噬菌体编码外壳蛋白...
- 徐广贤方媛郭乐潘俊斐蒋丹屈昱良
- 一种抗肿瘤的生物标志物及其扩增引物对和应用
- 本发明提供了一种抗肿瘤的生物标志物及其扩增引物对和应用，特别涉及生物医药领域。本发明提供了一种抗肿瘤标志物，所述生物标志物包括基因AC090116.1；所述生物标记物能够作为抗肿瘤的标志物。本发明证实通过抑制所述生物标记...
- 徐广贤蒋丹谢小亮张艳婷周海金
- 文献传递
- 雷帕霉素和3-甲基腺嘌呤对RAW264.7细胞中8种miRNAs表达的影响
- 2017年
- 目的探究雷帕霉素(Rapamycin,Rapa)和3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)处理对RAW264.7细胞中miR-181c,miR-101b和miR-1192等8种自噬相关miRNAs的表达水平,为研究miRNAs在细胞自噬中的功能提供理论基础。方法生物信息学预测分析与细胞自噬相关的miRNAs并构建miRNAs调控细胞自噬的网络图;分别用Rapa和3-MA对RAW264.7细胞做不同条件处理,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)检测不同条件处理后RAW264.7细胞中miR-181b、miR-181c、miR-101b、miR-1192、miR-362-3p、miR-590-3p、miR-875-5p和miR-335-5p的相对表达量。结果生物信息学预测结果显示8种miRNAs可能分别靶向作用于细胞自噬通路中多个关键蛋白,对细胞自噬起到促进或抑制作用;与正常对照组相比,miR-181c、miR-101b、miR-1192、miR-362-3p、miR-335-5p、miR-875-5p在Rapa处理RAW264.7细胞组中表达显著下调(P<0.05),而在3-MA处理组则都显著上调(P<0.05);miR-181b在Rapa组表达显著上调,在3-MA组表达下调(P<0.05);miR-590-3p在Rapa组和3-MA组都无显著性变化(P>0.05)。结论 miR-181c、miR-101b等7种miRNAs可能在RAW264.7巨噬细胞自噬过程中发挥重要调控作用。
- 徐向荣马占兵蒋丹屈昱良王羡方媛郭乐徐广贤
- 关键词：自噬MIRNASREAL-TIME
- miR-758-3p抑制原发性肝细胞肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制研究
- 目的原发性肝细胞肝癌（HCC）是高发病高致死的肿瘤之一，很多miRNAs(非编码小RNA)在HCC中表达异常，但miRNAs影响HCC发展进程的机制仍然不清楚。本论文旨在研究miR-758-3p靶向调控MDM2、mTOR...
- 蒋丹
- 关键词：原发性肝细胞肝癌细胞增殖分子机制
- 文献传递
- miR-142-3p靶向ATG4c调控RAW264.7巨噬细胞自噬被引量：4
- 2016年
- 目的:研究miR-142-3p对自噬相关基因ATG4c的靶向调控作用,探究miR-142-3p影响RAW264.7细胞自噬途径的作用机制。方法:生物信息学软件分析miR-142-3p的靶基因为ATG4c,构建pMIR-Report-ATG4c和pMIR-Report-ATG4c mut重组质粒,双荧光素酶报告系统、qRT-PCR、Western blot验证miR-142-3p与ATG4c的靶向作用;将做不同处理的RAW264.7细胞分为4组:正常细胞作为对照、50ng/ml雷帕霉素作用2h、EBSS饥饿作用12 h、10 nmol/L的3-甲基腺嘌呤(3-MA)作用12h后,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-142-3p不同干预组中的相对表达情况;将miR-142-3p mimics、miR-142-3p inhibitor及miR-142-3p control分别转染到RAW264.7细胞中,检测miR-142-3p和LC3Ⅱ的相对表达。结果:双荧光素酶报告系统、qRT-PCR、Western blot验证miR-142-3p通过靶向作用于ATG4c的3'-UTR抑制其表达;与对照组相比,雷帕霉素和饥饿处理的RAW264.7细胞miR-142-3p明显上调,而3-MA处理组miR-142-3p明显下调;与miR-142-3p control组相比,转染miR-142-3p mimics组中LC3Ⅱ蛋白表达显著下调,而miR-142-3p inhibitor组中表达显著上调。结论:miR-142-3p通过靶向调控自噬相关基因ATG4c,参与RAW264.7小鼠巨噬细胞自噬的调控。
- 高倩段相国李振昊徐向荣蒋丹徐广贤
- 关键词：细胞自噬
- RAW264.7细胞自噬相关circRNA检测及分析被引量：1
- 2022年
- 目的探讨环状RNA(circRNA)表达谱在RAW264.7细胞自噬模型中的差异表达及其在细胞自噬过程中的调控作用。方法利用雷帕霉素(rapamycin,RAPA)和3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)分别作用于小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞,建立自噬诱导模型和自噬抑制模型;提取各组细胞总RNA,基于高通量测序技术获得差异表达的circRNA;运用生物信息学分析对circRNA可能结合的微小RNA(miRNA)及其可能参与自噬的分子通路进行预测。结果在RAPA组和3-MA组中呈现相反表达趋势的circRNA共有42个,差异显著的前5个circRNA分别是circRNAmmu_circ_0000353、mmu_circ_0001704、mmu_circ_0013108、mmu_circ_0001528和mmu_circ_0015842,分别对其结合匹配值较高的3个miRNA位点进行预测,GO分析表明这些miRNA与转录调控、炎症反应及免疫应答相关;KEGG分析表明与多条自噬相关通路有关。结论本研究筛选到的circRNA以及与之结合的miRNA与细胞自噬的发生发展相关,可以此为靶点进行自噬相关的研究,并为自噬调控机制提供基础。
- 张爱君李艳宁高倩屈昱良蒋丹王丽燕徐广贤
- 关键词：细胞自噬高通量测序生物信息学
- 抗人CD20纳米抗体的筛选、表达及特性分析
- 2021年
- 目的筛选出抗人CD20纳米抗体序列,并获得具有高亲和力与特异性的抗CD20-人IgG Fc纳米抗体。方法利用天然噬菌体纳米抗体库,以生物素化的CD20抗原为靶标进行4轮液相亲和筛选,采用ELISA鉴定阳性克隆;将筛选到的阳性克隆基因序列与人IgG Fc片段偶联,构建到原核表达载体pCZN1中,并转化至大肠杆菌Arctic Express,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)低温诱导重组蛋白的表达,利用Ni柱进行亲和纯化;ELISA和Western blot法鉴定纯化产物。结果筛选得到了一条重复性高且亲水性好的CD20纳米抗体序列,纯化获得了纯度高达85%以上的抗CD20-人IgG Fc纳米抗体。ELISA结果显示其与CD20抗原具有较高亲和力, Western blot结果表明该抗体能特异性识别CD20抗原。结论利用天然噬菌体纳米抗体库成功获得了抗CD20纳米抗体序列,经纯化的抗CD20-人IgG Fc纳米抗体具有高亲和力与特异性。
- 李艳宁李光琪王红霞蒋丹楚元奎张爱君徐广贤
- 关键词：CD20噬菌体表面展示技术原核表达
- 一种微小分子RNA-758-3p及其作为抗肿瘤标志物的用途
- 本发明提供了一种微小分子RNA‑758‑3p(miR‑758‑3p)及其在预防和治疗肝癌疾病以及抗肿瘤药物中的应用，所述miR‑758‑3p的核苷酸序列如下所示：5`‑UUUGUGACCUGGUCCACUAACC‑3`。...
- 徐广贤蒋丹张爱君丁淑琴李振昊楚元奎
- 文献传递
