贺甜甜
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国科学院水生生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一种预防黄颡鱼“裂头病”浸泡疫苗株的构建和应用
- 本发明公开了一种预防黄颡鱼“裂头病”浸泡疫苗株的构建和应用，涉及微生物病原学与水产养殖病害防治交叉领域。通过敲除介导粘附/侵袭的I型菌毛fimA基因的负调控区获得高侵袭力菌株，同时敲除介导在宿主细胞内繁殖的鮰爱德华氏菌Ⅲ...
- 谢海侠刘莹莉贺甜甜聂品韩冬
- 嗜水气单胞菌asd-1基因功能研究被引量：1
- 2016年
- asd-1基因编码天冬氨酸半醛脱氢酶,该酶可影响革兰氏阴性菌的细胞壁正常合成。为了研究嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)asd-1基因的功能,采用Overlap PCR方法敲除该基因,结果显示asd-1基因的敲除明显降低了嗜水气单胞菌的生长速度,但是不会导致突变株对二氨基庚二酸(DAP)的强制需求,进一步对氨基酸序列分析表明asd-1蛋白质较迟缓爱德华氏菌、鲶爱德华氏菌的asd A蛋白质多出3个氨基酸,其中Asn-257导致asd A蛋白质中的关键活性位点Arg-267在asd-1蛋白质中改变为Val-267,该研究表明嗜水气单胞菌的asd-1基因突变显著降低其生长速度。
- 张立强贺甜甜艾桃山谢海侠魏朝辉丁桂珍
- 一种预防黄颡鱼“裂头病”浸泡疫苗株的构建和应用
- 本发明公开了一种预防黄颡鱼“裂头病”浸泡疫苗株的构建和应用，涉及微生物病原学与水产养殖病害防治交叉领域。通过敲除介导粘附/侵袭的I型菌毛fimA基因的负调控区获得高侵袭力菌株，同时敲除介导在宿主细胞内繁殖的鮰爱德华氏菌Ⅲ...
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- 文献传递
- 一种利用λRed重组技术在杀鱼爱德华氏菌基因组添加标签的方法
- 2023年
- 在杀鱼爱德华氏菌病原学研究中,在动物中制备杀鱼爱德华氏菌蛋白抗体耗时长,且获得的多克隆或多肽抗体在宿主细胞中特异性差,背景信号强。为解决这一问题,对在大肠杆菌(Escherichia coli)和沙门氏菌(Salmonella)中建立起来的λRed基因编辑方法进行调整和优化,建立了在杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)基因组基因上添加HA标签序列的方法,为使用标签抗体研究杀鱼爱德华氏菌基因功能提供便利。λRed重组系统利用同源线性DNA片段与基因组DNA进行重组。即以质粒pSU315为模板,在引物上引入目的基因的特异性序列,扩增FRT序列和抗生素抗性基因;以获得的PCR产物转化携带pKD46的杀鱼爱德华氏菌,在pKD46表达的λ噬菌体的3个重组蛋白(Exo、Beta和Gam)作用下,PCR产物与杀鱼爱德华氏菌基因组发生同源重组,获得引入了抗生素抗性的靶基因缺失或靶基因携带标签序列的菌株;接着利用pKD46的温敏型特性,消除引入的pKD46;最后向杀鱼爱德华氏菌引入文章构建的表达Flp重组酶的质粒pKD46-flp,在FLP作用下,两个FRT位点之间发生重组,消除抗生素抗性基因和一个FRT位点,获得携带一个FRT位点序列、靶基因缺失或靶基因添加标签序列的杀鱼爱德华氏菌菌株。该遗传操作平台的建立为杀鱼爱德华氏菌基因功能研究提供便利条件,亦为其他水产病原细菌遗传操作方法的建立提供借鉴。
- 张淑雅李端友刘莹莉贺甜甜聂品谢海侠
