赵一
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 羊口疮病毒B2L基因密码子优化及截短表达被引量：2
- 2018年
- B2L蛋白是羊口疮病毒(ORFV)的结构蛋白,也是病毒的保护性抗原,可以刺激机体产生强烈的抗病毒反应。为表达出高可溶性的B2L蛋白并检测其免疫原性,将羊口疮病毒B2L基因进行密码子偏爱性优化设计,并截取抗原性高、疏水性好的区域,构建了His-tag融合可溶性标签的表达重组载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,经IPTG诱导,利用SDS-PAGE电泳对融合蛋白的可溶性表达进行检测,筛选出高可溶性表达的His融合蛋白。重组蛋白通过Ni-NTA agarose亲和纯化后,进行Western-blot验证。结果显示,经过SDS-PAGE和Western-blot鉴定的目的条带分子质量与预期大小相符。本试验成功在上清中表达和纯化出B2L基因编码蛋白。
- 张静范峻豪刘春羽赵一温永俊张七斤
- 关键词：羊口疮病毒B2L基因截短表达密码子优化
- 不同免疫途径对金黄色葡萄球菌Fc-FnBPB-ClfA重组蛋白的免疫学特性分析被引量：1
- 2015年
- 为比较不同免疫途径对金黄色葡萄球菌(S.aureus)重组蛋白rFc-FnBPB-ClfA免疫效果,本研究将表达的rFc-FnBPB-Clf A分别经乳头管(200μg/只)和肌肉(200μg/只)两种途径免疫哺乳期Wistar大鼠,并于加强免疫2周后,均以1×109 cfu S.aureus经乳头管攻毒。结果表明,在加强免疫7 d后,rFc-FnBPB-ClfA乳头管免疫组与肌肉免疫组的血清特异性抗体水平均可达1∶51 200,乳头管免疫组乳清中特异性ELISA抗体水平明显高于肌肉组,而且乳头管组的全血杀菌能力优于肌肉组;同时,两组均能够提高大鼠体内IL-4和IFN-γ的表达,同时乳头管免疫组IL-4和IFN-γ的浓度较对照组升高的程度高于肌肉免疫组与对照组的变化;攻毒保护试验证明,乳头管免疫组对S.aureus清除率高于肌肉免疫组(p<0.05)。综上所述,rFc-FnBPB-Clf A通过乳头管途径免疫动物,效果最佳。本研究为奶牛S.aureus乳房炎疫苗最佳免疫途径的选择提供了实验依据。
- 潘海婷高宇赵一汤傲星王鹏龙杨岚郝永清
- 关键词：金黄色葡萄球菌
