- 下调FMNL3基因表达对SW620细胞体外增殖及侵袭能力的影响
- 2013年
- 目的探讨下调FMNL3基因表达对SW620细胞体外增殖和侵袭能力的影响。方法用脂质体转染法将FMNL3干扰质粒pcDNA3.1-EGFP-FMNL3-shRNA1(shRNA1组)和pcDNA3.1-EGFP-FMNL3-shRNA2(shRNA2组)转染结直肠癌SW620细胞,以无关序列(pcDNA3.1-EGFP-FMNL3-scramble)转染为阴性对照(scramble组),以未转染质粒的SW620为正常对照(NC组)。荧光显微镜下评估转染效率,实时荧光定量PCR法检测FMNL3基因的干扰效率,MTT实验检测FMNL3基因沉默前后SW620细胞生长和增殖情况,Transwell小室法检测干扰前后细胞的体外侵袭能力变化。结果各组转染效率分别为scramble组(74.35±5.93)%,shRNA1组(72.33±7.65)%,shRNA2组(73.17±4.32)%,差异无统计学意义(P>0.05);与NC组相比,转染48 h各组细胞中FMNL3 mRNA表达水平分别为scramble组(93.35±6.33)%,shRNA1组(16.44±4.37)%,shRNA2组(18.51±5.16)%,两个shRNA组细胞FMNL3 mRNA表达水平显著下调,其中shRNA1组下调最多,干扰效率最高;与NC组和scramble组细胞相比,shRNA1和shRNA2组细胞48 h和72 h体外增殖活力明显下降(均P<0.05),其48 h穿出Transwell小室人工基底膜的细胞数明显减少(P<0.01)。结论下调FMNL3基因表达后,结直肠癌SW620细胞的体外增殖和体外侵袭能力均明显下降,FMNL3可能正向调控结直肠癌细胞的增殖和侵袭。
- 曾元凤肖移生路名芝吴晓牧辛洪波
- 关键词：下调结直肠癌增殖
- FMNL3基因转染对结直肠癌SW480细胞EMT和体外侵袭能力的影响被引量：3
- 2014年
- 目的探讨成蛋白样3型蛋白(FMNL3)基因转染对结直肠癌SW480细胞上皮-间质转化(EMT)和体外侵袭能力的影响。方法将带绿色荧光蛋白的重组FMNL3表达质粒pEGFP-N1/FMNL3转染至SW480细胞中(以未转染质粒的SW480细胞作正常对照,转染空载质粒的SW480细胞为阴性对照),荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot法检测重组质粒转染前、后细胞FMNL3mRNA和蛋白的表达变化;在荧光显微镜下观察FMNL3转染前、后SW480细胞的形态变化;采用RT-qPCR和Western blot检测转染前、后SW480细胞EMT上皮标志物E-cadherin和间质标志物Vimentin的表达变化;用Transwell小室实验检测FMNL3基因转染对SW480细胞的体外侵袭能力的影响。结果 FMNL3转染48h后SW480细胞中FMNL3mRNA和蛋白表达水平明显提高(P<0.01);FMNL3蛋白表达于细胞质中,转染FMNL3基因后SW480细胞的形态发生了明显的改变,由典型的圆形、多边形变成梭形并伸出多个细长突起的间充质样,呈现典型的EMT形态学改变;转染FMNL3基因后,SW480细胞中EMT上皮标志物E-cadherin表达下调,间质标志物Vimentin表达上调;转染FMNL3基因后SW480细胞的体外侵袭能力显著增强。结论 FMNL3基因可能通过促进结直肠癌细胞EMT而促进其侵袭。
- 曾元凤肖移生罗小江胡国柱路名芝吴晓牧辛洪波
- 关键词：上皮-间质转化
