邱礽
- 作品数：16 被引量：18H指数：2
- 供职机构：南阳师范学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家自然科学基金河南省高校科技创新团队支持计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- 黄芩苷对嗜水气单胞菌生物膜形成的影响及体内外的抑菌作用被引量：12
- 2021年
- 【目的】探讨中药单体黄芩苷对嗜水气单胞菌在体内外生长及生物膜形成的影响。【方法】体外实验中,利用牛津杯法检测抑菌圈直径,结晶紫法检测生物膜的形成,通过泳动实验检测黄芩苷对嗜水气单胞菌运动性的影响,紫外吸收法检测细胞膜完整性,用透射电镜技术观察黄芩苷对细菌形态的影响。体内实验利用草鱼为对象检测黄芩苷对嗜水气单胞菌增殖的影响。【结果】黄芩苷在体外对嗜水气单胞菌有明显的抑菌效果,通过对生物膜的研究发现黄芩苷对生物膜形成具有抑制作用,并同时抑制其运动性。同时黄芩苷可以破坏细胞结构,并增加了细胞膜通透性。体内实验结果显示黄芩苷对嗜水气单胞菌具有清除作用,且具有一定的浓度依赖性。【结论】黄芩苷在体内外均具有抑制嗜水气单胞菌增殖的作用,有望在水产养殖病害防治工作中得到应用。
- 蒋长军管翠翠胡小敏姚伦广姚伦广邱礽
- 关键词：黄芩苷嗜水气单胞菌生物膜抑菌作用
- 稳定表达T7 RNA聚合酶BHK-21细胞株的构建被引量：2
- 2022年
- 【目的】通过建立过表达T7 RNA聚合酶(T7 RNA polymerase,T7 RNAP)的慢病毒系统,构建可稳定表达T7 RNAP的BHK-21细胞株。【方法】根据GenBank中公布的大肠杆菌BL21(DE3)基因组中T7 RNAP基因序列(登录号:NZ_CP081489.1)设计引物,并采用PCR扩增T7 RNAP基因片段,将其克隆至慢病毒载体中,构建pCDH-CMV-T7 RNAP重组质粒。筛选阳性克隆及测序鉴定后,利用脂质体将包含重组质粒pCDH-CMV-T7 RNAP的包装系统和辅助包装质粒共转染至HEK-293T细胞,进行慢病毒的包装及纯化,获得高病毒滴度的重组慢病毒。将收集的病毒液分别以感染复数(multiplicity of infection,MOI)为1、5、10和20感染BHK-21细胞,72 h后观察荧光情况,筛选最佳MOI。将重组慢病毒在最佳MOI条件下感染BHK-21细胞,通过绿色荧光蛋白copGFP的表达观察感染细胞的阳性率。使用4μg/mL嘌呤霉素作为抗性筛选物进行多轮筛选,最终筛选得到BHK-21-T7 RNAP细胞株。进一步对所筛选的细胞株设计3对检测引物进行RT-PCR检测,并通过检测试验组与空白对照组细胞中海肾荧光素酶(hRluc)报告基因的活性差异来反映T7 RNAP驱动T7启动子下游基因的能力。【结果】本研究成功扩增了大肠杆菌BL21(DE3)细胞基因组中T7 RNAP基因,成功构建重组慢病毒载体,并获得了滴度为1.0×10^(8)TU/mL的重组慢病毒。成功筛选到BHK-21-T7 RNAP细胞株,此重组细胞株经RT-PCR扩增能够检测到T7 RNAP的特异性DNA序列。将含有T7启动子驱动的hRluc的质粒(pT7-hRluc)转染此细胞株后发现,BHK-21-T7 RNAP细胞株中hRluc的活力与空白对照组BHK-21细胞相比极显著升高(P<0.01)。【结论】本研究获得了稳定表达T7 RNAP的BHK-21细胞株,且所筛选的BHK-21-T7 RNAP细胞株中的T7 RNAP能够驱动pT7启动子下游基因hRluc的转录,研究结果为RNA病毒的反向遗传学平台建立奠定了细胞基础。
- 陈宇婧张艺艺黄正阳石建州刘阳坤邱礽邱礽李娜
- 关键词：慢病毒载体细胞株
- 大口黑鲈β-防御素在杆状病毒系统中的表达及抑菌活性
- 2022年
- β-防御素是鱼类天然免疫的重要组成部分,通过杆状表达系统表达大口黑鲈β-防御素,研究其具有高效、广谱的不同于抗生素的独特抗菌的能力。研究通过序列分析,发现大口黑鲈β-防御素(MSBdefe)与其他物种β-防御素具有相似的特征,都包含6个保守的半胱氨酸。将MSBdefe基因进行昆虫密码子优化合成后,克隆至穿梭载体pYBDM-IM质粒中,构建成为重组质粒MSBdefe-pYBDM-IM,重组质粒转化感受态细胞MultiBac/rSW106/asd-/inv+,阳性重组菌株MSBdefe-pYBDM-IM-Am直接用于Sf9细胞的感染,获得重组杆状病毒AV-MSBdefe。通过SDS-PAGE和Western Blot检测AV-MSBdefe感染Sf9细胞后蛋白表达,结果表明成功获得MSBdefe重组蛋白。通过对淡水鱼类最常见的病原菌嗜水气单胞菌的抑菌活性分析,结果显示当MSBdefe重组蛋白的终浓度为30μg/mL时,抑菌效率为83.00%,并随着蛋白稀释2倍、4倍后,即终浓度为15和7.5μg/mL时,抑菌效果逐渐减弱,抑菌效率分别为54.33%和33.67%,进而验证了大口黑鲈β-防御素能够抑制嗜水气单胞菌的生长,且随着蛋白浓度的降低抑制能力下降。这些结果为利用昆虫生物反应器规模化生产鱼类β-防御素奠定了基础,以期为开发能够替代或部分替代抗生素的天然抗菌剂提供良好的候选者和技术途径。
- 管翠翠邱礽李洁琼蒋长军姚伦广
- 关键词：Β-防御素杆状病毒表达系统抑菌活性大口黑鲈
- 鸡Mx蛋白抗病毒作用研究进展被引量：2
- 2014年
- Mx蛋白是在脊椎动物机体细胞受病毒感染或诱生剂处理时由Ⅰ型干扰素诱导表达的一种抗病毒蛋白。Mx蛋白具有良好的抗病毒能力,靶向许多RNA病毒,诸如流感病毒、水疱性口炎病毒、狂犬病毒等,对某些DNA病毒,例如乙型肝炎病毒也有一定的作用。近年来,基于鸡的Mx蛋白抗病毒作用及机制的相关研究逐渐增多,取得了一些进展。论文就近年来鸡Mx蛋白的抗病毒机制与分子生物学特点进行综述,针对鸡Mx蛋白在抗病毒与品种鸡抗病育种筛选等应用前景进行分析与探讨。
- 冀君许鑫唐青海邱礽唐存多阚云超姚伦广
- 关键词：MX蛋白抗病毒作用抗病育种
- 一种水中病原微生物分离提取装置
- 本实用新型公开了一种水中病原微生物分离提取装置，包括传动箱、分离罐和提取罐，所述分离罐和提取罐的外表面均固定连接有底座，所述分离罐的内部设置有分离机构，所述提取罐的底部设置有提取机构，提取机构中包括提取箱、真空箱和吸气箱...
- 邱礽姚伦广阚云超蒋长军管翠翠
- 文献传递
- 一株大口黑鲈虹彩病毒及其应用
- 本发明首次从南阳地区分离得到大口黑鲈虹彩病毒，为该病毒毒株本身的研究和流行病学的研究提供了丰富的资源，另外，该病毒毒株具有良好的免疫原性，采用其制备得到的疫苗能够刺激产生高滴度的中和抗体，具有很好的预防作用。
- 姚伦广栗丹邱礽秦英惠刘阳坤管翠翠
- 一种浸浴用大口黑鲈虹彩病毒灭活疫苗及其制备方法
- 本发明对于分离得到的大口黑鲈虹彩病毒病毒液进行培养和灭活，而后与功能化单壁碳纳米管、壳聚糖佐剂混合制备得到浸浴用灭活疫苗，经试验表明，所述浸浴用疫苗能够刺激大口黑鲈产生较高滴度的中和抗体，在浸浴后第14天达到最高的抗体滴...
- 姚伦广王阿辉何健邱礽秦英惠胡小敏刘阳坤
- 一种重组鳗弧菌TolC蛋白及其制备方法和应用
- 本发明属于疫苗技术领域，具体涉及一种重组鳗弧菌TolC蛋白及其制备方法和应用。该重组鳗弧菌TolC蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，该重组鳗弧菌TolC蛋白可用于增强水产动物对鳗弧菌的免疫，免疫效果好。
- 邱礽阚云超姚伦广管翠翠蒋长军冷超粮史鸿飞李娜刘飞冀君
- 文献传递
- 一种连续细胞培养摇床用培养袋托架
- 本实用新型公开了一种连续细胞培养摇床用培养袋托架，包括弧形托板，所述弧形托板的顶端外侧安装有侧滚动调节架，所述侧滚动调节架的内侧安装有固定扣合装置。该连续细胞培养摇床用培养袋托架，通过侧滚动调节架和固定扣合装置的配合，手...
- 崔庚彦邱礽王哲宋艳芳赵岩
- 文献传递
- 一种II型草鱼呼肠孤病毒样颗粒及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种II型草鱼呼肠孤病毒样颗粒及其制备方法和应用，属于病毒样颗粒技术领域。本发明经昆虫密码子优化的VP3、VP4、VP6、VP7基因，通过多基因杆状病毒表达系统成功组装了GCRV‑VLPs。本发明提供的GCR...
- 邱礽姚伦广管翠翠李娜刘阳坤冷超粮史鸿飞冀君刘飞
