钟悦
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：赣南医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省教育厅青年科学基金江西省卫生厅基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 针对PKM2多位点RNAi质粒载体的构建和筛选被引量：1
- 2014年
- 目的:构建针对M2型丙酮酸激酶(PKM2)基因3个可干扰序列设计小发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)载体,为下一步探索Ad-PKM2介导PKM2 RNAi对乳腺癌细胞作用及机制建立基础。方法:根据RNAi设计软件设计并合成3对shRNA模板序列,依次将它们克隆至pGenesil载体中构建重组质粒,通过MTT检测筛选出对乳腺癌细胞株MCF-7增殖效应影响最强的RNAi序列。结果:酶切鉴定和测序结果证实RNAi载体构建成功,均能高效感染MCF-7并抑制MCF-7细胞的增殖,pGenesil-PKM2-(1+2+3)的抑制能力最强。结论:针对PKM2多靶点RNAi载体成功构建,为下一步研究PKM2被沉默后细胞生物学行为的变化打下基础。
- 王润秀钟悦刘金英吴小云谢富华
- 关键词：M2型丙酮酸激酶RNA干扰小发夹RNA乳腺癌
- 重组腺病毒Ad-PTEN对肾癌786-O细胞增殖和凋亡的影响
- 2015年
- 目的:观察携带野生型PTEN基因的重组腺病毒Ad-PTEN介导786-O细胞中PTEN的表达,以探讨其对癌细胞增殖和迁移的抑制以及诱导细胞凋亡的作用。方法:将构建的重组腺病毒Ad-PTEN体外感染786-O细胞,荧光显微镜下观察感染效率;免疫印迹检测细胞中PTEN的表达;MTT实验观察其对细胞增殖的影响作用;细胞划痕实验观察其对细胞迁移的抑制;PI染色观察其对细胞凋亡的诱导作用。结果:以MOI为100的病毒量感染细胞后48 h,感染效率达到100%;感染病毒后,细胞可检测到PTEN蛋白的表达,细胞的增殖和迁移均受到抑制,细胞被诱导出现凋亡。结论:重组腺病毒Ad-PTEN可高效介导786-O细胞表达PTEN,并产生抑制细胞增殖和迁移以及诱导细胞凋亡作用,为肾癌的基因治疗提供理论基础。
- 王润秀刘金英钟悦林金秤汤显湖熊亮谢富华
- 关键词：重组腺病毒PTEN
