李倩
- 作品数:8 被引量:19H指数:2
- 供职机构:华中师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 柑橘致病青霉菌的分离与分子鉴定
- 青霉病和绿霉病是柑橘类水果采后贮存转运过程中的主要病害,对果农造成重大损失。引起柑橘青霉病和绿霉病的病菌分别为意大利青霉和指状青霉。此外,还有多种其它青霉菌能够引起柑橘病害。本实验主要开展了柑橘采后致病青霉菌分离鉴定的研...
- 齐婷李倩王金龙李逸莫小研耿辉袁永泽熊丽刘德立
- 文献传递
- 真菌靶标酶CYP51结构分析与耐药性机理研究
- 李娜李倩王金龙何木青刘德立
- 稻瘟菌MgCYP51B基因稀有密码子和mRNA二级结构分析与表达优化被引量:5
- 2014年
- 在大肠杆菌中异源表达稻瘟菌CYP51(P450-14DM,MgCYP51B)基因,通过对MgCYP51B进行跨膜区预测和同源模建分析,并截短稻瘟菌CYP51B基因,构建了9种不同的重组表达质粒以实现蛋白表达.结果表明:只有pET28-MgB-83在3种宿主菌中实现了表达,且在BL21(DE3)pLysS中表达量最大.通过对稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构进行分析,发现稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构稳定性对MgCYP51B蛋白的表达都有影响,适用于稀有密码子表达的Rossetta(DE3)并不适用于MgCYP51B基因的最优表达.同时只有翻译起始区二级结构自由能最低的pET28-MgB-83才能实现表达.本研究实现了稻瘟菌MgCYP51B基因在大肠杆菌中的异源表达,证实密码子的偏爱性和翻译起始区二级结构稳定性影响MgCYP51B蛋白表达.
- 齐婷刘婧李倩余金辉袁永泽刘德立
- 关键词:翻译起始区稀有密码子
- 基于柑橘绿霉菌CYP51同源模建的定点突变与抗性机制分析被引量:2
- 2012年
- 为阐明杀菌剂与PdCYP51的相互作用及其抗性机制,基于最新解析的真核生物人类的CYP51晶体结构,同源模建了PdCYP51的三维结构,并选取商品化的杀菌剂烯唑醇进行分子对接,预测影响PdCYP51与烯唑醇相互作用的关键氨基酸。采用定点突变技术获得了PdCYP51-Y112H、F120L、F120D和S309A 4种突变体(PdCYP51m)。结果表明,突变体蛋白PdCYP51-Y112H、F120L、F120D和S309A表达量均有不同程度的变化,PdCYP51-Y112H和F120L与未突变蛋白表达量相当,而PdCYP51-F120D和S309A表达量增加。4种突变体与杀菌剂的结合能力降低,其结合常数分别为1.28、0.18、1.03和1.31μmol/L,均大于未突变PdCYP51的0.12μmol/L。表明这些氨基酸是杀真菌剂烯唑醇与PdCYP51结合的关键氨基酸,PdCYP51与烯唑醇形成的疏水性空腔和稳定配体杀菌剂分子的作用力是酶蛋白与杀菌剂结合的重要因素。
- 张建华熊丽夏诗慧王金龙李倩刘德立
- 关键词:同源模建分子对接定点突变光谱分析
- 柑橘青霉菌的分离鉴定与特性分析被引量:12
- 2014年
- 从发病柑橘表面分离得到了42株青霉致病菌,并分别扩增得到其rDNA转录间隔区序列(ITS).通过对rDNA ITS的生物信息学和系统发育分析,并结合菌落形态特征,这些菌株分别被鉴定为指状青霉(P.digitatum)、意大利青霉(P.italicum)、皮落青霉(P.crustosum)、小刺青霉(P.spinulosum)和草酸青霉(P.oxalicum).分析发现:这些致病菌呈现出明显的区域特异性.该方法可以快速、可靠的鉴定柑橘采后真菌病害,为有效防治提供一定理论依据和指导.
- 张翠香李娜李倩刘婧齐婷袁永泽刘德立
- 关键词:柑橘采后病害RDNA-ITS生物信息学进化分析
- 稻瘟菌CYP51克隆和可溶性表达研究
- 稻瘟病由子囊菌Magnaporthe grisea引起的,是广泛发生在世界各稻区的最重要水稻病害,也是限制水稻高产稳产的主要因素。细胞色素P450甾醇14α-去甲基化酶(CYP51)是真菌细胞膜麦角甾醇生物合成过程中的一...
- 李倩王金龙齐婷何木青耿辉熊丽刘德立
- 文献传递
- 基于代谢路径比对分析的稻瘟菌潜在药物靶点研究
- 本研究对稻瘟菌及其宿主水稻的全代谢路径进行了比对分析,可以在糖、脂、氨基酸代谢,能量代谢、维生素和辅因子生物合成途径以及核昔酸代谢等重要代谢途径中定位了86个有意义的潜在药物靶标。通过代谢路径比对分析,发现与宿主相比,稻...
- 何木青李倩余金辉李书祥耿辉袁永泽熊丽刘德立
- 关键词:稻瘟病水稻药物靶点
- 文献传递
- 柑橘绿霉菌CYP51B基因突变导致抗药性的机制研究
- 本研究利用咪酰胺对所得到的柑橘绿霉菌株进行耐药性检测,最终获得11株抗药性柑橘绿霉菌。提取DNA并分别克隆其CYP51A和CYP51B基因,进行序列比对分析。结果表明:CYP51A基因敏感性菌株和抗性菌株之间未出现明显的...
- 王金龙李倩齐婷何木青李娜袁永泽熊丽耿辉刘德立
- 关键词:基因突变抗药机制
- 文献传递