李潇
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 成纤维细胞生长因子受体抑制剂BGJ398对胶质瘤生物学特性的影响被引量：3
- 2017年
- 目的探究成纤维细胞生长因子受体（FGVR）抑制剂BGJ398对胶质瘤细胞生长、迁移和侵袭的抑制作用。方法（1）将体外常规培养的U87和U251细胞分为BGJ398组和对照组．分别加入含10μmol／LBGJ398的完全培养基和单纯的完全培养基处理，用CCK-8和克隆形成实验检测2组细胞的增殖能力；处理2d后用划痕实验、Transwell迁移实验分别检测2组13251细胞、U87细胞的迁移能力；Transwell侵袭实验检测2组细胞的侵袭能力，Westernblotting检测2组细胞磷酸化（p）FGFR和Vimentin蛋白的表达；（2）将200μLU87细胞（1×10^7个）注入8只BALB／c裸鼠腹部两侧皮下并将裸鼠按随机数字表法分为BGJ398组（n=4）和对照组（n=4）。BGJ398组裸鼠每天口服BGJ398生理盐水溶液（20mg／kg），对照组裸鼠口服等量生理盐水。连续服用15d后比较2组小鼠移植瘤的质量；免疫组化染色检测移植瘤组织Vimentin的表达。结果（1）培养3、4、5d时BGJ398组U87细胞的吸光度值低于对照组：培养2、3、4、5d时BGJ398组U251细胞的吸光度值低于对照组；培养10d后BGJ398组U87细胞和U251细胞形成克隆的数量明显少于对照组；划痕后48hBGJ398组U251细胞的迁移距离比对照组明显减少；培养24h后BGJ398组迁移的U87细胞数较对照组明显减少；培养48h后BGJ398组穿过孔膜的U87细胞和U251细胞较对照组明显减少：BGJ398组U87细胞和U251细胞中pFGFR和Vimentin蛋白的含量明显少于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（2）BGJ398组裸鼠皮下肿瘤的质量[（0，186±0．064）鲥较对照组[（0．450±0．106）g]明显减轻；BGJ398组裸鼠皮下移植瘤Vimentin的表达（2．503±0．359）较对照组（4．125±1．155）明显下降，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论体内外实验均证实BGJ398可以抑制胶质瘤细胞的生长、迁移和侵袭，提示FGFR是治疗胶质瘤的有效靶点之一。
- 李潇王昀陈韬亮陈建生黄敏池雅杰杨远韬柯以铨
- 关键词：神经胶质瘤成纤维细胞生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂
- 橡胶树炭疽菌(Colletotrichum siamense)疏水蛋白Hydr基因的克隆与原核表达被引量：1
- 2021年
- 为了研究Hydr在橡胶树炭疽菌(Colletotrichum siamense)中的功能,本研究利用同源克隆法克隆获得橡胶树炭疽菌疏水蛋白Hydr基因,并利用原核表达系统对其进行表达。结果显示:Hydr基因DNA为520bp,cDNA为417 bp,编码139个氨基酸,包含2个内含子,在蛋白的N端含有由19个氨基酸组成的一段信号肽;分别构建了含信号肽的Hydr-PET-32a和缺失信号肽的Hydr (-18aa)-PET-32a的融合表达载体。利用SDS-PAGE和Western Blot检测蛋白表达情况,结果表明该蛋白在去除信号肽的情况下,供试条件下(IPTG0.4 mmol/L, 0.6 mmol/L, 0.8 mmol/L, 1.0 mmol/L;温度16℃)均可表达,但保留信号肽时,在菌体上清和包涵体以及细胞培养液中均未获得融合蛋白,表明信号肽的存在会影响疏水蛋白Hydr原核表达。本研究结果为进一步验证疏水蛋白与脂滴包被蛋白的互作,以及疏水蛋白在橡胶树炭疽菌的功能分析提供理论依据。
- 王记圆方思齐廖小淼何其光李潇李潇李潇刘文波缪卫国
- 关键词：原核表达信号肽
- 靶向成纤维细胞生长因子受体抑制胶质瘤中血管生成拟态的生成被引量：4
- 2017年
- 目的:探索成纤维细胞生长因子受体(FGFR)抑制剂BGJ398对胶质瘤细胞形成血管生成拟态(VM)的影响。方法:运用Western blot检测BGJ398处理后人胶质瘤细胞株U87MG和U251MG中磷酸化成纤维细胞生长因子受体(p FGFR)的数量,以及基质金属蛋白酶2和14(MMP2和MMP14)的表达量;在体外应用小管形成实验观察U87MG细胞形成小管的能力;用CD34/PAS免疫组化双染法计数皮下胶质瘤模型中VM的数量;用免疫组织化学染色检测皮下移植瘤中MMP2和MMP14的表达量。结果:Western blot显示BGJ398实验组中p FGFR的数量较对照组显著减少,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot与免疫组化染色结果显示实验组MMP2和MMP14的表达明显下调;小管形成实验中实验组中胶质瘤细胞小管周长和交点数较对照组明显减少;皮下瘤模型中实验组中VM的数量(13.85±3.96)较对照组(26.40±5.06)明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:体内外实验证实BGJ398通过抑制FGFR的激活可以抑制胶质瘤细胞形成VM,提示FGFR信号通路具有调节VM形成的作用。
- 李潇王昀王昀黄敏柯以铨
- 关键词：胶质瘤成纤维细胞生长因子受体血管生成拟态
