李曼君
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:内蒙古自治区卫生厅资助项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 小鼠诱导性共刺激分子-Ig在小鼠树突状细胞中的表达及其效应研究
- 2003年
- 目的 获得mICoS-Ig基因修饰的小鼠DC,分析表达产物mICOS-Ig对T细胞活化的影响。方法 采用电转染方法将mICOS-Ig表达载体转入小鼠DC,通过ELISA法检测转染小鼠DC 60和96 h以及稳定表达的培养上清;观察mICOS-Ig对同种混合细胞培养反应的影响。结果 ELISA法检测证明将mICOS-Ig表达载体转入小鼠DC,获得瞬时表达及稳定表达,mICOS-Ig可抑制单向混合淋巴细胞反应,抑制率达40%,其效应呈剂量依赖性。结论 获得了稳定表达mICOS-Ig融合蛋白的小鼠DC,mICOS-Ig表达产物对同种细胞刺激的增殖反应有抑制作用。
- 王国华李曼君廖雯君朱慧芬张悦邵静芳沈关心
- 关键词:树突状细胞转染
- 抗SARS抗体独特型单链抗体的筛选及鉴定被引量:5
- 2006年
- 目的从人源噬菌体抗体库中筛选抗SARS独特型抗体为SARS的诊断及疫苗的研究奠定基础。方法以混合SARS病人恢复期血清免疫球蛋白(Ig)作为筛选分子,从噬菌体抗体库中筛选出能与病人血清IgG(IgM)结合的抗体,并通过与混合正常人血清Ig作负性筛选,从而获得抗SARS病毒的独特型抗体(AId)。通过4轮“吸附-洗涤-扩增”,从最后一轮所得单克隆菌株中分别通过ELISA筛选出能和SARS病人恢复期血清Ig结合的菌株,提取质粒DNA,并对PCR扩增产物进行DNA序列测定,最后用所筛选的克隆通过与不同人群血清反应,证实其特异性。结果随机挑选经第4轮筛选后的200个单克隆菌落,其中有10个与SARS病人恢复期血清Ig结合的OD值明显高于其与正常人Ig结合的OD值;以上10个克隆经PCR扩增,其中有6个克隆于1 000 bp处有电泳条带;其DNA序列经与BLAST数据库和IMGT/QUEST软件比对有5个均与人的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)高度同源,且与其同源性最高的人Ig的VH属VHI亚群,VL属k链,属VKⅡ亚群;最后确认有3个克隆其噬菌体抗体和SARS病人血清Ig结合的OD值均明显高于与正常人血清Ig结合的OD值。结论利用抗体库技术可不经免疫制备特异性抗SARS抗体独特型抗体,为SARS诊断及疫苗的研制奠定基础。
- 何峰容王晓娟周小欧李曼君朱慧芬吴万敏沈关心
- 关键词:噬菌体抗体库技术
- 衰老下调小鼠对日本血吸虫感染的免疫应答
- 2011年
- 目的研究衰老对小鼠感染日本血吸虫后免疫应答的影响。方法幼龄(2月龄)和老龄(18月龄)雌性BALB/c小鼠各8只,每鼠感染日本血吸虫尾蚴(40±1)条。感染后6周剖杀小鼠,经门静脉灌注收集成虫,计数虫荷;KOH消化法收集肝脏中的虫卵,并计数。制作肝脏连续病理切片,测量两组小鼠肝脏增生期平均单卵肉芽肿的大小,计算单卵肉芽肿体积。常规法制备脾淋巴细胞悬液进行T淋巴细胞增殖实验,计算刺激指数(SI)。ELISA法检测脾淋巴细胞中γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)的表达水平。结果幼龄组小鼠体内的虫荷和每克肝组织虫卵数分别为26.00±2.42和(2.08±0.87)×104,老龄组虫荷和每克肝脏虫卵数分别为19.75±1.95和(1.59±1.05)×104,两组间的差异有统计学意义(P<0.05)。幼龄组肝脏单卵肉芽肿平均体积[(47.02±24.13)×10-3 mm3]明显大于老龄组[(30.13±10.97)×10-3 mm3](P<0.05)。T淋巴细胞增殖实验结果显示,老龄组脾淋巴细胞对ConA的增殖反应(SI:1.08±0.12)低于幼龄组(SI:1.31±0.14),其脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-4的含量[(24.05±6.24)、(4.15±0.68)pg/ml]也明显低于幼龄组[(34.25±8.69)、(7.25±0.83)pg/ml](P<0.05)。结论衰老引起小鼠对日本血吸虫感染的免疫应答下降,从而减轻了日本血吸虫感染引起的免疫病理损害。
- 杨云帆孙谦苏斌涛林琳李曼君陈琳徐宏雷家慧刘文琪李雍龙
- 关键词:衰老小鼠日本血吸虫免疫反应