冯俊丽
- 作品数：13 被引量：27H指数：3
- 供职机构：浙江理工大学更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程理学更多>>
- 一种快速扩增双链RNA靶序列的方法
- 本发明公开了一种快速扩增双链RNA靶序列的方法，步骤包括：(1)dsRNA的制备；(2)通过琼脂糖电泳进行割胶回收、分离纯化dsRNA；(3)根据GenBank中的病毒基因组相应序列及其一二级结构特点，运用Primer ...
- 陈集双唐香山竺锡武陈绍宁刘伟侠廖乾生冯俊丽
- 文献传递
- Taqman-MGB实时荧光PCR定量检测转基因玉米MON863被引量：2
- 2012年
- 运用实时荧光聚合酶链式反应技术(polymerase chain reaction,PCR)对转基因玉米MON863进行品种特异性检测和定量分析。通过设计玉米内源基因和外源基因边界序列特异性引物和Taqman-MGB探针,验证了内源基因的物种特异性和外源基因边界序列的品种特异性。利用已知转基因百分含量的MON863玉米作为标准品,进行荧光定量反应,建立定量标准曲线,通过标准曲线对玉米样品MON863玉米成份进行含量分析。结果表明,该方法重复性好,检测特异性强,最低检测限浓度达到0.001 ng/μL,即14个拷贝。由于使用实时荧光PCR技术,检测周期短,操作简便,可广泛运用于转基因玉米MON863的进出口检测和转基因产品的含量分析。
- 王凤军冯俊丽张祥林王菁王鹏举
- 关键词：实时荧光PCRTAQMAN-MGB探针
- 18srDNA为内参照的Real-Time-PCR方法检测半夏病毒被引量：3
- 2006年
- 利用实时荧光PCR方法,以18srRNA为内参照,对半夏植株及相应组培苗携带的黄瓜花叶病毒(Cu-cumber Mosaic Virus,CMV)含量进行了相对定量检测.并以DAS-ELISA和RT-PCR方法检测结果相比较.结果表明,相比原始植株,组培苗的病毒含量大大降低.以带病毒半夏母株为外植体培养的组培苗,其病毒含量以叶片中的相对较高,在块茎和愈伤组织中病毒相对较低.而ELISA方法在检测病毒含量低的样品时有假阴性结果;RT-PCR方法灵敏度可靠但不适宜精确量化.
- 何煜波陈集双陈海敏冯俊丽高必达
- 关键词：实时荧光PCR黄瓜花叶病毒半夏
- 利用原位合成微流体芯片检测转基因番茄的方法
- 本发明公开了一种利用原位合成微流体芯片检测转基因番茄的方法，包括以下步骤：1）转基因番茄外源基因检测的芯片探针的设计；2）制备寡聚核苷酸芯片；3）待测番茄样品中基因组DNA的提取；4）基因组特定片段或整个基因组荧光标记；...
- 冯俊丽王凤军梁彦君
- 文献传递
- PCR结合核酸斑点杂交技术检测转基因番茄研究被引量：1
- 2013年
- 基于转基因番茄的安全性评价,建立健全番茄转基因检测体系尤为迫切。文章采用转基因作物检测常用的传统定性PCR技术和核酸斑点杂交技术,针对转基因番茄中常用的35S(花椰菜花叶病毒启动子)、NOS(胭脂碱合成酶终止子),NPTII(新霉素转移酶基因),35S-EFE(35S和番茄EFE基因的交联结构)、以及Lat52(番茄内参基因),检测了阳性对照质粒PBI121、华蕃一号样品和阴性对照合作903番茄。从华蕃一号中成功检出35S、NOS、NPTII、35S-EFE和内参基因Lat52,阴性对照番茄合作903中只有内参基因Lat52检出。试验重复性良好,检测灵敏度高,两种方法相互补充,排除假阳性。核酸斑点杂交一次可检出多个外源基因,增加了检测通量,为我国番茄转基因检测提供参考。
- 梁彦君陈文虎王梦娜许爱霞冯俊丽
- 关键词：转基因番茄核酸斑点杂交
- 实时荧光PCR检测香梨黑斑病菌被引量：5
- 2013年
- 根据梨黑斑病原菌链格孢子基因组保守序列,设计合成特异性引物和双荧光标记探针,通过对12个梨花样本、30个梨果样本和94个玻片样本检测分析,建立对香梨黑斑病菌的TaqMan实时荧光聚合酶链式反应(PCR)检测方法。此外,对其他4种香梨植物病害病原菌进行了荧光PCR检测比对。结果表明:只有香梨黑斑病菌产生荧光信号,与其他4种病害病原菌无交叉反应。与常规PCR相比,TaqMan实时荧光PCR检测特异性强、灵敏度高,能检测到质量浓度为1.9pg/μL的DNA样本,且不必通过病原菌的分离与纯化培养,可直接用于病变样品的检测以及植物病害的筛查与动态监测,适合植物病害的快速诊断和预防控制。
- 王凤军张祥林马海波冯新忠冯俊丽华鹏
- 关键词：香梨链格孢菌实时荧光PCRTAQMAN探针
- 一株产油微藻——小球藻的纯化鉴定与培养基的筛选被引量：12
- 2013年
- 从南京工业大学生物与制药工程学院获得一株小球藻藻种,经划线培养数代后,得到分离纯化的小球藻,18SrDNA鉴定确定其种属为普通小球藻。小球藻的常见几种培养基筛选结果表明,BG11培养基最适合该小球藻的生长。用牛粪浸出液代替传统培养基培养小球藻的梯度对照实验中,发现牛粪浸出液培养小球藻的效果很好,且浓度越高,生长状况越好。同时还对小球藻的粗脂含量做了测定,每克小球藻干粉中粗脂的含量约为0.206 g,占小球藻干重的20%左右。本研究为新能源的开发和利用积累了信息。
- 梁颖冯俊丽徐方娇陈集双
- 关键词：小球藻
- 转基因棉花中棉41多重PCR体系的建立被引量：1
- 2013年
- 利用多重PCR建立转基因棉花中棉41外源基因的检测体系。多重PCR技术的关键在于多重PCR反应条件的优化,本文从多重引物组合、PCR反应体系、PCR反应条件这三个方面对转基因棉花多重PCR反应进行优化,建立了扩增效率较高的中棉41的六重PCR反应体系,优化后的体系为HotstarTaq DNA聚合酶用量为1.25 U/50μL,镁离子的终浓度为3.5 mM,dNTP的终浓度为400μM,BSA(10mg/mL)的加入量为2μL,选取58℃为反应扩增的退火温度。利用优化的多重PCR体系特异性地检测到转基因棉花中棉41中的外源基因启动子CaMV 35S、终止子TNOS、报告基因NPTII和抗虫基因Cry1Ac。
- 徐方娇冯俊丽梁颖陈集双
- 关键词：多重PCR
- 便携式紫外割胶刀
- 本实用新型公开了一种便携式紫外割胶刀，包括刀片(2)、刀头组件(3)和中空的刀柄(4)，刀头组件(3)包括固定件(30)，在固定件(30)上设有至少2盏的紫外灯(31)，固定件(30)的两端分别与刀柄(4)和刀片(2)固...
- 王煜炜冯俊丽陈香丁伟劳立辉
- 文献传递
- 利用原位合成微流体芯片检测转基因番茄的方法
- 本发明公开了一种利用原位合成微流体芯片检测转基因番茄的方法，包括以下步骤：1）、转基因番茄外源基因检测的芯片探针的设计；2）、制备寡聚核苷酸芯片；3）、待测番茄样品中基因组DNA的提取；4）、基因组特定片段或整个基因组荧...
- 冯俊丽王凤军梁彦君
- 文献传递
