刘湛军
- 作品数:5 被引量:16H指数:3
- 供职机构:中国海洋大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- TRBP分子克隆及其功能初步研究
- 2012年
- 目的:构建TRBP原核表达载体,评价表达的重组TRBP蛋白对双链RNA的结合能力。方法:利用RT-PCR扩增小鼠TRBP基因双链RNA结合区,构建其与His标签融合的表达载体,转化E.coli BL21(DE3)菌株,利用Ni-NTA磁珠对重组蛋白进行分离纯化;体外转录合成小鼠肝脏miR-122前体RNA Pre-miR-122,分别利用PAGE电泳和等温量热滴定仪检测TRBP与Pre-miR-122的结合能力。结果:分离纯化得到的重组TRBP蛋白为可溶蛋白,Mr为32 400,结合在NI-NTA磁珠上的TRBP能有效的结合Pre-miR-122。结论:成功建立了TRBP原核表达系统,初步研究了TRBP重组蛋白与双链RNA的结合能力。
- 刘湛军朱颖于文功路新枝
- 关键词:原核表达分子间相互作用
- 亚抑菌浓度抗生素对紫色杆菌群体感应系统的调控研究
- 上世纪20年代末青霉素的发现,开辟了抗生素治疗的新时代,许多感染性疾病从此得到了有效控制。但是,随着抗生素的广泛使用、错用和滥用,细菌耐药性越来越严重,涌现出了大量的耐药菌、多重耐药菌甚至超级耐药菌株,这些问题已成为制约...
- 刘湛军
- 关键词:细菌耐药
- 环二鸟苷酸——新型的细菌第二信使被引量:9
- 2009年
- 环二鸟苷酸(cyclic diguanylate,c-di-GMP)是新近发现的在细菌中普遍存在的第二信使分子,参与调节多种生理功能,包括细胞分化、从运动状态到生物被膜状态的转变、致病因子产生等.基于其对细菌抗生素耐药的物理屏障—生物被膜形成的影响,c-di-GMP的研究越来越受到人们的关注.细胞内c-di-GMP的产生受二鸟苷酸环化酶(diguanylate cyclase,DGC)合成和磷酸二酯酶(phosphodiesterase,PDE)降解两条途径调控.在结构上,通常DGC含有GGDEF结构域,PDE含有EAL结构域.c-di-GMP的作用靶点包括PilZ结构域和GEMM核开关两种类型.本文综述了c-di-GMP的代谢途径、调控机理、生物学功能等方面的最新研究进展,并对c-di-GMP在今后研究中的应用和发展趋势进行展望.
- 路新枝刘湛军于文功
- 关键词:第二信使细菌生物被膜
- 核糖开关——药物开发的新靶点被引量:1
- 2010年
- 核糖开关是mRNA上能够与自由代谢产物或其他小分子配体结合或由于环境条件变化而引起构象变化从而调控基因表达的RNA结构元件.核糖开关广泛存在于G+及G-细菌代谢相关基因中,在真菌、植物和高等动物人的血管内皮生长因子基因中也有发现.核糖开关控制生物体内许多重要基因的表达,调节体内基础代谢,信号传递以及氨基酸、核苷酸、辅酶、金属离子的摄取.核糖开关在生物代谢调控、信号传导中的重要作用使其成为一类新型的药物作用靶点,为新型抗生素研发开辟了新的领域.本文综述了核糖开关的研究进展、作用机制、结构功能以及其在开发新型药物方面的研究策略.
- 刘湛军路新枝姜鹏于文功
- 关键词:核糖开关基因表达调控药物靶点
- 金黄色葡萄球菌hmp基因缺失突变株的构建及抗一氧化氮能力分析被引量:3
- 2011年
- 【目的】构建金黄色葡萄球菌RN6390黄素血红蛋白(flavohaemoglobin,HMP)基因缺失突变株,研究其抗一氧化氮(Nitric Oxide,NO)能力及其在细菌生物被膜形成中的作用。【方法】根据同源重组技术的原理,利用PCR扩增RN6390的hmp基因上下游同源臂,经过抗生素和温度交替培养筛选hmp基因缺失突变株,利用基因组PCR、定量PCR对突变菌株进行鉴定。以硝普钠(SNP)为NO供体,检测了hmp基因缺失菌株的抗NO能力,并初步研究了hmp基因在生物被膜形成中的作用。【结果】成功构建了RN6390的hmp基因缺失突变株,外源NO能够诱导菌株hmp基因的表达,hmp基因缺失菌株抗NO能力明显下降,但其生物被膜形成能力有明显提高。【结论】获得了RN6390的hmp基因缺失突变株,该突变株的获得为进一步研究hmp基因的生物功能,以及细菌内源性NO的作用奠定了良好的技术平台。
- 姜鹏路新枝侯方杰刘湛军于文功
- 关键词:金黄色葡萄球菌缺失突变株一氧化氮生物被膜