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逆转录病毒载体介导的RNA干扰稳定抑制肌肉生长抑制素GDF-8的表达被引量：5: 2008年; 为将肌肉生长抑制素的干扰序列表达盒hU6-siGDF-8有效导入肌成纤维细胞C2C12中,以pAV-hU6+27载体为基础构建逆转录病毒载体pXSN-hU6-siGDF-8,并使之与pVSV-G质粒共转染GP-293细胞,用包装出的病毒粒子感染宿主细胞C2C12,G418筛选稳定整合逆转录病毒的抗性细胞库。2周后,Western Blotting和Real-Time PCR分析结果显示,细胞内源性的GDF-8基因的表达得到了有效的抑制;MTT法和细胞流式仪分析表明,G418抗性细胞得到了更有效的增殖,并且G_0/G_1期细胞数量减少了13.7%,S期细胞数量增加了14.9%。因此,逆转录病毒载体的RNA干扰系统可以稳定抑制GDF-8基因表达,它将成为治疗肌肉萎缩疾病的一个强有力的工具。; 刘超武杨倬赵斌刘长梅; 关键词：逆转录病毒 SHRNA

干扰肌肉特异E3泛素蛋白连接酶基因的干扰RNA,包含其的载体及其应用: 本发明提供了干扰肌肉特异E3泛素蛋白连接酶基因表达的方法，具体地Atrogin-1基因和MuRF 1基因的干扰RNA及其DNA序列，包含其的载体和由所述载体转录的干扰RNA，以及将所述干扰RNA序列，包含其的载体和由所述...; 刘长梅田波丛浩龙; 文献传递

pSUPER介导的RNAi抗乙肝病毒S基因的研究: 2008年; 目的研究RNAi抗乙肝病毒的作用。方法设计并合成一段针对HBV S基因的干扰序列及一段无关的序列,克隆进pSUPER载体中,分别构建pSUPER-HBS、pSUPER-nonsense载体,然后将pSUPER、pSUPER-HBS、pSUPER-nonsense转染进HepG2.2.15细胞中,用ELISA方法对细胞上清中HBsAg、HBeAg进行检测。尾静脉注射HBV转基因小鼠,取血清检测。结果pSUPER-HBS所表达的siRNA成功的抑制了HepG 2.2.15上清及HBV转基因鼠血清中的HBsAg、HBeAg,抑制率分别达到70%、51%以及60%、42%。结论针对HBV S区的siRNA能明显抑制HBV的复制。; 张敬武栾慎顺杨倬刘长梅张景海; 关键词：乙肝乙肝病毒 S抗原

一种抗免疫耐受性和免疫缺陷性病毒的鸡尾酒疫苗及其应用: 本发明提供一种抗免疫耐受性和免疫缺陷性病毒的鸡尾酒疫苗及其应用。所述鸡尾酒疫苗至少包括两种或两种以上元件以及任选的病毒抗原重组蛋白和可药用赋形剂，所述元件以重组DNA和/或重组病毒的形式存在，所述元件选自(A)中和抗体、...; 田波张玉霞刘长梅高福; 文献传递

人肝脏特异性miR-122表达载体的构建及鉴定被引量：7: 2009年; 人肝脏特异性miRNA-122是肝脏中表达丰度最高的miRNA。为研究该miR-122的生物学功能,从HepG2细胞基因组中用PCR的方法扩增了miR-122的前体,构建了miR-122的表达载体pLMP-miR-122。pLMP-miR-122质粒转染人正常肝细胞系L-O2和肝癌细胞系HepG2后,细胞内成熟miRNA-122的表达量显著增加。该质粒与HBV1.3共转染HepG2细胞72h后,HBV的HBs和HBe蛋白水平的表达量均下降,说明miRNA-122参与了HBV基因的复制和表达的调控,为进一步研究miRNA-122的功能和其他一些肝病如HCC的调控机制打下基础。; 黄增红刘长梅; 关键词：MIRNA MIR-122 HBV

RNA干扰技术及其在医学研究中的应用被引量：2: 2005年; RNA干扰(RNAi)是指生物体内利用双链RNA(dsRNA)诱导同源靶基因的mRNA特异性降解，从而导致转录后基因沉默的现象，RNAi主要通过核酸酶Dicer切割dsRNA生成21—23nt的小干扰RNA(siRNA)，继而由siRNA识别并靶向降解同源靶基因mRNA，从而抑制靶基因的蛋白表达。近年来，RNAi技术在医学研究中的广泛应用均取得了显著的基因沉默效果，RNAi以其高特异性、高效性等显著优势将成为研究基因功能的全新手段，文中综述了该技术在医学研究中的应用。; 贾放刘长梅张义正; 关键词：RNA干扰小干扰RNA 基因沉默 RNA干扰技术转录后基因沉默 RNAI技术

pH值对FOXO1、GDF-8基因反义RNA寡核苷酸吸收的影响: 2009年; 研究不同pH值下,口服靶向FOXO1与GDF-8基因反义RNA寡核苷酸药物对药效的影响。化学合成靶向FOXO1与GDF-8基因的有效反义RNA寡核苷酸片段,调节药物PH值,通过灌胃方式给药,给药20 d后处死小鼠,进行体重,腿部肌肉增长情况分析。提取腿部肌肉组织总RNA,用real time PCR检测FOXO1与GDF-8基因的表达。结果表明,服用RNA oligos的试验组小鼠腿部肌肉重量均比对照组肌肉重量增长快。其中pH为7.0的RNA oligos的效果比pH为5.0的效果好,pH9.0的RNAoligos的作用效果最弱。与小鼠体重变化结果一致,real time PCR检测实验组FOXO1与GDF-8基因转录水平较对照组均有明显下降,其中服用pH为7.0的RNA oligos的下降最多。因此,口服靶向FOXO1与GDF-8基因的反义RNA寡核苷酸药物的最适pH值应为中性偏酸。; 丛浩龙刘建玲杨倬孙仑泉刘长梅; 关键词：肌肉萎缩 RNA干扰 PH值 FOXO1

干扰肌肉特异E3泛素蛋白连接酶基因的干扰RNA,包含其的载体及其应用: 本发明提供了干扰肌肉特异E3泛素蛋白连接酶基因表达的方法，具体地Atrogin-1基因和MuRF1基因的干扰RNA及其DNA序列，包含其的载体和由所述载体转录的干扰RNA，以及将所述干扰RNA序列，包含其的载体和由所述载...; 刘长梅田波丛浩龙

治疗病毒感染的方法及其药物: 本发明涉及治疗病毒感染的方法及其中所用的药物。更特别地，本发明涉及治疗肝炎病毒或免疫缺陷病毒感染的方法以及其中所用的核酸、疫苗、融合蛋白、载体或细胞。; 田波张玉霞刘长梅高福; 文献传递

一种抗免疫耐受性和免疫缺陷性病毒的鸡尾酒疫苗及其应用: 本发明提供一种抗免疫耐受性和免疫缺陷性病毒的鸡尾酒疫苗及其应用。所述鸡尾酒疫苗至少包括两种或两种以上元件以及任选的病毒抗原重组蛋白和可药用赋形剂，所述元件以重组DNA和/或重组病毒的形式存在，所述元件选自(A)中和抗体、...; 田波张玉霞刘长梅高福; 文献传递

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刘长梅