张伟杰
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中国科学院研究生院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中国科学院知识创新工程重要方向项目中国科学院知识创新工程更多>>
- 相关领域：化学工程生物学轻工技术与工程更多>>
- 产重组别藻蓝蛋白类荧光蛋白的重组大肠杆菌发酵条件的优化被引量：4
- 2009年
- 对重组别藻蓝蛋白类荧光蛋白基因工程菌在装有150 mL液体培养基的250 mL摇瓶中的发酵条件进行优化。对起始pH值、接种量、诱导起始时间、诱导温度和时长以及IPTG浓度对重组荧光蛋白表达量进行了分析。结果表明,在装有150 mL液体培养基的250 mL摇瓶中,在起始pH值为7.5,6%接种量,培养温度为37℃,培养时长为3～5 h,诱导温度为22℃,IPTG浓度为0.2 mmol/L,诱导时长为7～8 h的条件下发酵重组别藻蓝蛋白类荧光蛋白,其表达量最高。
- 张伟杰杨雨关翔宇葛宝胜陈华新李富超秦松
- 关键词：发酵
- 光学活性藻蓝蛋白β亚基的体内重组被引量：4
- 2008年
- 在Synechococcussp.PCC 7002中,首先发现了特异性催化脱辅基藻蓝蛋白β亚基(153位)与藻蓝胆素(phyco-cyanobiling,PCB)连接的裂合酶基因cpcT。本实验在Synechocystissp.PCC 6803中找到与cpcT具有高度同源性的基因slr1649。构建2组相容的重组质粒pCDF-cpcB(C82I)或(C153I)-ho1-pcyA和pRSF-slr1649,cpcB(C82I)和cpcB(C153I)分别编码82和153位被突变的脱辅基藻蓝蛋白β亚基,slr1649编码可能的特异性裂合酶,在大肠杆菌体内生成PCB必需的2个基因(ho1编码血红素氧化酶,pcyA编码藻蓝胆素合成酶),将这些基因共同转化到大肠杆菌诱导表达,利用亲和层析柱对可溶性蛋白进行纯化,产物进行SDS-PAGE、色素蛋白锌电泳和光谱检测。结果表明基因slr1649能够特异性催化CpcB(153位)与PCB的连接,产生了具有光学活性的CpcB(C82I)-PCB,为进一步研究螺旋藻藻蓝蛋白的生物活性奠定了基础。
- 关翔宇秦松张伟杰唐学玺
- 关键词：C-藻蓝蛋白定点突变
