林丽萍
- 作品数：12 被引量：27H指数：3
- 供职机构：邯郸市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种汉族人高转移性肾透明细胞癌细胞系
- 本发明公开了一种从汉族人肾透明细胞癌脊柱转移灶中，建立有转移表型的汉族人高转移性肾透明细胞癌细胞系HiMet－ccRCC，CCTCC－C200909。本发明利用肾透明细胞癌患者脊柱转移灶作为建系瘤源，采用体外培养方式建立...
- 曹广文谭晓洁林丽萍贺松琴常文军
- 文献传递
- 肾透明细胞癌发生和转移相关的CD99选择性剪接异构体的初步探讨
- 目的:寻找人肾透明细胞癌(ccRCC)中发生和转移相关CD99的选择性剪接异构体，探讨CD99选择性剪接异构体表达与ccRCC转移的关系，并探讨其选择性剪接异构体表达与ccRCC间的关系。 方法:前期采用cDNA基因表达...
- 林丽萍
- 关键词：肾透明细胞癌剪接异构体CD99肿瘤转移
- 文献传递
- 肾透明细胞癌转移相关的CD99选择性剪接异构体的筛选被引量：3
- 2009年
- 目的:寻找人肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中CD99转移相关选择性剪接异构体,探讨CD99选择性剪接异构体表达与ccRCC转移的关系。方法:通过选择性剪接数据库(alternative splicing database,ASD)对CD99基因可能存在的选择性剪接异构体进行预测。运用自行设计的5对特异性引物,采用RT-PCR技术,在转移组织、发生及未发生转移的癌组织、癌旁组织的各混合样本中检测6种预测异构体的表达,再对电泳所获条带进行克隆、测序。在各个组织样本中检测CD99Ⅰ、CD99Ⅱ和新型CD99选择性剪接异构体(CD99-Ⅲ)的表达。结果:从6种预测异构体中筛选出一种新型异构体(CD99-Ⅲ)。该异构体在转移组织中表达率(8/9)高于未发生转移的原发癌组织(10/21,P<0.05)。CD99Ⅰ型在样本中均表达,CD99Ⅱ型在发生转移的原位癌组织中表达率(6/9)远高于未转移的原发癌组织(3/21,P=0.008)。结论:CD99-Ⅲ为一种新型选择性剪接异构体,且CD99Ⅱ型、CD99-Ⅲ的表达可能与ccRCC的转移进展有关。
- 林丽萍武旗常文军侯建国张宏伟谭晓洁曹广文
- 关键词：CD99肿瘤剪接异构体
- 原发性肾透明细胞癌中转移相关基因CD99、FKBP5和FLJ13576的表达被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨肿瘤转移相关分子CD99、FKBP5、FLJ13576在原发性肾透明细胞癌中的表达。方法:应用半定量RT-PCR技术研究肿瘤转移相关分子CD99、FKBP5、FLJ13576在肾透明细胞癌组织和癌旁组织中的差异性表达。结果:CD99、FKBP5、FLJ13576在原发性肾透明细胞癌组织中的表达率分别为72%、60%和48%,而对应癌旁组织中的表达率分别为28%、24%和16%,表达水平也明显不同。肾透明细胞癌组织中CD99、FKBP5和FLJ13576 3种基因的表达水平均显著高于癌周组织(P<0.05)。结论:肿瘤转移相关分子CD99、FKBP5、FLJ13576在肾透明细胞癌原发组织中的表达明显上调,可能与肾细胞癌发生、发展密切相关,有望成为检测肾细胞癌的新的生物学标志。
- 曹廷虎侯建国常文军翟羽佳林丽萍顾春英谭晓洁曹广文
- 关键词：肾肿瘤CD99透明细胞癌
- 汉族人肾透明细胞癌肺转移小鼠模型的建立及肺转移细胞亚株的筛选
- 2008年
- 目的:建立可稳定传代的肾透明细胞癌小鼠肺转移模型,并在此基础上初步筛选出肾透明细胞癌特异性鼠肺转移细胞亚株,为后续研究奠定基础。方法:选用本实验室前期建立的肾透明细胞癌细胞株RCC05-TXJ,体外扩增培养制成细胞悬液后注射于NOD-SCID小鼠颈背部皮下,成瘤后取出瘤组织接种于另外NOD-SCID小鼠的肾包膜下,待有肉眼可见瘤块后,处死小鼠并取出肿瘤组织接种于新NOD-SCID小鼠的肾包膜下,反复数轮,直至出现稳定的鼠肺转移模型。此时取模型鼠肺转移组织,一部分继续接种于新鼠肾包膜下,反复数轮,尝试以转移组织诱导肺转移;另一部分进行原代培养,细胞经体外扩增纯化后制成悬液接种于新鼠肾包膜,数轮循环至产生肺转移,筛选能产生稳定鼠肺转移的细胞亚株。整个筛选过程均观察记录原位成瘤、淋巴及肺转移形成情况,并对肿瘤组织进行病理组织学观察及CA9(肾癌标志)、CD133(干细胞标志)表达检测。结果:以RCC05-TXJ细胞株接种所致NOD-SCID小鼠颈背部皮下肿瘤组织作为移植瘤材接种鼠肾包膜在第2轮即出现鼠肺转移,此后3～6轮以鼠肺转移组织移植肾包膜下,均能成功诱导转移。以鼠肺转移组织原代培养RCC细胞均获成功,第6轮原代培养细胞扩增纯化后制成的细胞悬液(RCC05-TXJ-L)接种于鼠肾包膜下,出现特异性肺转移,重复2轮实验结果稳定。RCC05-TXJ-L细胞具有生长速度快(传代时间约为2d)、原位成瘤时间短(1周左右)、接种后转移性较强、CA9及CD133表达升高等特点。结论:RCC05-TXJ在NOD-SCID小鼠体内多轮反复筛选可建立稳定的肾细胞癌鼠肺转移动物模型;在此基础上筛选出的肺转移性细胞亚株RCC05-TXJ-L可稳定诱导NOD-SCID鼠产生肺部转移。
- 翟羽佳谭晓洁林丽萍侯建国武旗常文军马立业姚明曹广文
- 关键词：肾细胞癌肺转移动物模型
- PPP4R1基因与肿瘤相关性的生物信息学预测及在胃癌组织中的初步验证被引量：1
- 2009年
- 目的:应用生物信息学分析方法预测基因PPP4R1与胃癌发生和转移的关系,并采用RT-PCR进行验证。方法:利用基因功能模块原理,通过IntNetDB找到基因PPP4R1的伙伴基因,应用CFinder工具找其社团基因,Chilibot在线工具分析社团基因与肿瘤的关系,继而推测PPP4R1与胃癌的联系。采用RT-PCR法检测18对分别来自同一患者的转移和原位肿瘤组织、12对分别来自同一患者的原位肿瘤和癌旁正常组织PPP4R1基因表达,对上述生物信息学分析的结果进行验证。结果:生物学分析结果表明,PPP4R1的社团基因有CTDSP2、PPP2R5E、CTDP1、CTDSP1、FLJ22405、MTMR4、PPP1CA、PPP1CB、PPP1CC、PPP2R2A、PPP2R5A、PPP2R5C、PPP3CC,其中与癌相关的基因有9个,与癌及转移相关的基因有2个。PCR验证结果表明:18例原位胃癌组织中有15例基因PPP4R1表达高于其对应的转移组织(P<0.01);12例正常组织有9例高于其对应的癌组织(P<0.01)。结论:基因PPP4R1可能与胃癌的发生和转移相关;生物信息学可能成为研究基因功能快速而有效的新方法。
- 徐兴兴常文军翟羽佳林丽萍刘小康马立业张宏伟曹广文
- 关键词：胃肿瘤生物信息学功能基因组学
- 前列腺癌组织中谷胱甘肽S-转移酶P1基因启动子区域甲基化序列分析被引量：11
- 2008年
- 目的:研究前列腺癌(prostate carcinoma,PCa)组织中谷胱甘肽S-转移酶P1(glutathione S-transferase P1,GSTP1)基因启动子区域CpG岛甲基化状态,探索前列腺癌早期诊断的检测方法。方法:采用巢式甲基化特异性聚合酶链反应(nest methyla-tion-specific PCR,NMSP)和基因克隆测序的方法检测31例前列腺癌组织、18例前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)组织和3例正常前列腺(normal prostate,NP)组织中GSTP1基因启动子区域CpG岛的甲基化状态。结果:NMSP结果显示在PCa、BPH以及NP组中甲基化阳性率分别为83%、0%和0%;测序结果中PCa与BPH、NP组CG位点甲基化发生率分别为96%、34%和37%(P<0.01),BPH和NP组无统计学差异(P>0.05)。联合NMSP筛查前列腺癌明显优于单纯前列腺特异性抗原(prostate-specific antigen,PSA)检测。结论:在前列腺癌组织中GSTP1基因启动子区域CpG岛呈现超甲基化的状态,应用NMSP方法对GSTP1基因进行甲基化检测具有高灵敏度和高特异性的特点,这有望成为新的前列腺癌早期筛选和诊断的检测方法。
- 杜稳斌侯建国武旗常文军翟羽佳林丽萍曹廷虎孙浚雯张宏伟曹广文
- 关键词：前列腺癌谷胱甘肽转移酶启动区甲基化
- 肾透明细胞癌组织中转录因子19基因选择性剪接异构体的类型和表达特点被引量：1
- 2010年
- 目的探讨人肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)是否存在与细胞生长调节相关的转录因子19(TCF19)选择性剪接异构体,探索其表达特点及其与ccRCC发生的关系。方法通过选择性剪接数据库(alternative Spli-cing Database,ASD)对TCF19基因可能存在的选择性剪接异构体种类进行预测。设计可能存在的5种异构体引物,采用RT-PCR技术,在32例原发肾透明细胞癌的混合样本及癌旁组织的混合样本中分别检测预测异构体的表达,并对电泳所获条带进行克隆、测序。应用RT-PCR定量检测在各个组织样本中异构体TCF19-1、TCF19-3在原发肾癌及癌旁组织的表达差异。结果 ccRCC组织中存在2种新型TCF19替换剪接异构体(TCF19-1、TCF19-3)。RT-PCR检测结果发现这2种异构体在癌和癌旁组织中均表达,但TCF19-1在原发癌组织中表达率高于癌旁组织(P<0.001);TCF19-3在癌旁组织中的表达率与原发癌组织比较,差异无统计学意义(P=0.082)。结论首次发现ccRCC组织中存在2种TCF19选择性剪接异构体TCF19-1和TCF19-3,其中TCF19-1的表达可能与ccRCC有关。
- 钱涛林丽萍常文军曹廷虎徐兴兴杨印辉张宏伟侯建国曹广文
- 关键词：肾肿瘤选择性剪接异构体
- 肾透明细胞癌中谷胱甘肽S-转移酶M3基因的表达及其启动子区CpG岛的甲基化水平被引量：2
- 2008年
- 目的:检测肾透明细胞癌(ccRCC)中谷胱甘肽S-转移酶M3(GSTM3)基因表达水平,观察其启动子区CpG岛的甲基化水平,探讨GSTM3基因甲基化与ccRCC发生和转移的关系。方法:半定量RT-PCR检测ccRCC高转移潜能细胞系(RCC05-TXJ)、低转移潜能细胞系(RCC05-ZYJ)、24例原位ccRCC及其癌旁肾组织和14例ccRCC转移组织的GSTM3基因的表达水平。用去甲基化剂5-Aza-CdR干预RCC05-ZYJ,RT-PCR检测处理前后GSTM3基因的表达变化。用巢式BSP(nested bisulfite sequencing PCR)检测10例原位ccRCC及其癌旁肾组织的GSTM3基因启动子区CpG岛甲基化位点。采用巢式MSP(nested methylation specific PCR)检测10例原位ccRCC及其癌旁肾组织、8例ccRCC转移组织甲基化情况。结果:RCC05-TXJ中GSTM3基因表达强度低于RCC05-ZYJ。5-Aza-CdR处理RCC05-ZYJ后,GSTM3基因表达强度高于处理前。24例原位ccRCC中17例GSTM3基因的表达强度低于其在癌旁肾组织中的表达强度,其余7例原位ccRCC中GSTM3基因的表达强度不低于其在癌旁肾组织中的表达。10例原位ccRCC及其癌旁和8例转移组织中,癌组织GSTM3基因启动子甲基化阳性为4例,癌旁组织2例(P=0.628),转移组织1例(P=0.314),差异无统计学意义。结论:GSTM3基因表达与ccRCC的发生、转移密切相关,其启动子区CpG岛甲基化会降低该基因的表达;初步筛选出ccRCC中GSTM3基因启动子区CpG岛甲基化位点,为后续研究奠定了基础。
- 武旗侯建国杜稳斌常文军翟羽佳林丽萍谭晓洁曹广文
- 关键词：肾脏肿瘤谷胱甘肽转移酶
- 细胞黏附分子CD99与肿瘤关系的研究进展被引量：3
- 2009年
- CD99分子是细胞黏附分子的一种,参与细胞黏附、凋亡过程及肿瘤细胞的迁移、浸润、侵袭,在肿瘤的发生发展过程中起重要的作用。与正常组织相比,某些肿瘤中CD99出现异常表达,这对于肿瘤的鉴别诊断、转移潜能判断、治疗和预后估计等方面有潜在的应用价值。
- 林丽萍武旗曹广文
- 关键词：CD99肿瘤基因
