程旭梅
- 作品数：6 被引量：31H指数：4
- 供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸡抗病毒Mx蛋白修饰及其真核表达载体的构建被引量：8
- 2008年
- 利用高保真RT-PCR的方法从Poly(I).Poly(C)诱导的鸡成纤维细胞总RNA中扩增出鸡全长MxcD-NA,扩增产物克隆到pMD19-T Simple载体上,利用PCR突变技术将其第2 032位的碱基由G突变为A,经克隆测序证实突变成功后,将已突变的Mx基因插入真核表达载体,通过PCR、酶切鉴定插入片段正确,提取质粒转染COS-Ⅰ细胞进行RT-PCR鉴定。结果表明:正确克隆了鸡Mx基因,并成功对该基因进行PCR诱变修饰,构建了能够表达鸡Mx基因的重组真核表达载体,为Mx基因体内外表达及生物学活性的进一步研究奠定了基础。
- 倪黎纲何先红余飞李碧春高波谢飞程旭梅吴晓伟
- 关键词：MX蛋白真核表达载体
- 利用“转基因精子”生产大群转基因家禽被引量：1
- 2008年
- 由于家禽特殊的生理和生殖器官解剖学特点,一些适用于哺乳动物的转基因方法在家禽上并不合适,文章作者对通过制造转基因精子生产转基因家禽的新技术进行探索,为生物技术领域转基因方法的研究提供了新思路。
- 李碧春程旭梅
- 关键词：原始生殖细胞显微注射法大群精子体外转染慢病毒载体
- 猪皮肤组织块冷冻保存方法的研究被引量：7
- 2008年
- 以二甲基亚砜、甘油和乙二醇为冷冻保护剂,以3种浓度(10%、20%、30%)在2种降温条件下探讨适合猪耳皮肤组织冷冻保存的最适条件和方法以及复苏后对皮肤组织生长能力的影响。结果表明:快速冷冻条件下各处理均无组织块生长。慢速冷冻条件下复苏后组织块的存活率均为100%,各冷冻保护液3种浓度的平均生长率分别为14.29%、56.52%和8.70%,差异显著。20%甘油保护液下采用慢速冷冻方法复苏后组织块的生长率达82.35%,极显著高于其他组和对照组。新鲜和冻存后的细胞培养均采用组织块培养法,EDTA-牛血浆贴覆,97.78%的新鲜样本组织块能较好生长,且扩展能力强。
- 程旭梅倪黎纲吴晓伟孙鹏翔葛剑辉戴建明李碧春
- 关键词：冷冻保存体外培养
- 鸡Mx基因2032位点单核苷酸多态性研究被引量：5
- 2009年
- 研究采用错配PCIK-IKFLP的方法对15个品种鸡的Mx基因进行筛查，旨在探索不同鸡品种Mx cDNA第2032位点抗病基因A与易感等位基因G的多态性，为生产转基因鸡的可行性提供理论基础。结果表明：15个鸡品种Mx基因的2032位点存在A、G2个等位基因，AA、AG、GG3种基因型，其中鹿苑鸡、狼山鸡、斗鸡未发现AA型个体，茶花鸡、红色原鸡未发现GG个体；携带帆抗性基因A和易感基因G的比例分别是0．350、0．650：抗性等住基因A的检测比例为0．034～0．984。红色原鸡的抗性等位基因A基因频率（0．984）高于地方鸡种的抗性等住基因A的基因频率（0．321）；地方鸡种中的观赏型、蛋肉兼用型、肉用型、蛋用型鸡种的抗性等位基因A的基因频率分别为0．221、0．297、0．425、0．462。χ^2适合性检验表明，15个品种的鸡群均处于Hardy—Weinberg平衡状态。
- 吴晓伟范敏其倪黎纲程旭梅陈强田智泉李碧春
- 关键词：MX基因抗性基因单核苷酸多态性
- 鹌鹑早期原始生殖细胞迁移和聚集规律的研究被引量：3
- 2010年
- 本研究旨在观察鹌鹑早期原始生殖细胞的迁移和聚集规律,为分离PGCs,并将其应用于转基因技术提供依据。运用QH1单抗标记特异性的识别鹌鹑的PGCs,检测早期各个阶段PGCs的分布和数量。研究表明:鹌鹑的原始生殖细胞(PGCs)起源于胚盘暗区,而后逐渐迁移至明区、生殖新月区。孵化27h,已有少量PGCs分布于明区的血管中。到孵化36h时,有大量的PGCs聚集在明区血管网中,左右两侧都有。孵化45h时,从头部到脐肠系膜PGCs均有散在和聚团分布,并主要聚集在头部间充质的血管中。PGCs在各个时期的数量存在差异,有2个增殖高峰期,即原条期(孵化6h)和十体节期(孵化36h)。QH1单抗可鉴定早至未孵化期的鹌鹑原始生殖细胞,PGCs在早期胚盘中是随机散在分布的,而且具有2个增殖高峰期。
- 常国斌程旭梅李碧春刘向萍秦玉蓉陈蓉陈国宏
- 关键词：鹌鹑原始生殖细胞迁移
- 鸡Mx蛋白基因诱变修饰及抗病活性被引量：13
- 2008年
- 【目的】进一步研究鸡Mx蛋白第631位氨基酸的变异与鸡群抗病性的相关性。【方法】本实验利用PCR突变技术将鸡Mx蛋白基因的全长cDNA第2032位的碱基由G突变为A(既631位氨基酸的改变),并将突变的Mx基因插入真核表达载体pcDNA3.0,重组表达载体转染COS-Ⅰ细胞后,进行RT-PCR与间接免疫荧光(IFA)鉴定。【结果】对鸡Mx蛋白基因的cDNA进行PCR诱变修饰正确,构建了能够正确表达鸡Mx蛋白的重组真核表达载体;诱变修饰重组Mx蛋白对抗新城疫病毒(NDV)感染分析结果显示,重组Mx蛋白具有较强的抗新城疫病毒生物活性。【结论】为下一步研究鸡Mx蛋白的抗病机理与制备抗病转基因鸡奠定了坚实的基础。
- 倪黎纲吴晓伟程旭梅陈昊陈强宋成义徐琪李碧春
- 关键词：MX蛋白抗病毒活性新城疫病毒
