赵轶君
- 作品数:5 被引量:11H指数:3
- 供职机构:西北大学更多>>
- 发文基金:陕西省教育厅省级重点实验室科研与建设计划项目陕西省社会发展科技攻关项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生化学工程更多>>
- 斑点酶免疫渗滤法定量检测雌三醇的实验研究被引量:3
- 2013年
- 目的 制备高特异性的抗雌三醇(E3)单克隆抗体(mAb), 建立操作简便、敏感、快速适用于基层使用的E3检测方法。方法 采用活化酯法制备偶联物E3-HRP、E3-BSA、3-OVA。应用mAb技术制备抗E3的mAb; 以硝酸纤维素膜为固相载体, 抗E3 mAb为包被抗体, 建立竞争抑制模式的斑点酶免疫渗滤法。结果 筛选出5株可分泌特异性抗E3 mAb的杂交瘤细胞株。mAb效价为1×10^5~5×10^5, 亲和常数为5.1×10^8~5.2×10^9 L/mol。检测敏感度为2 ng/mL, 检测范围2~200 ng/mL。结论 建立了检测速度快、灵敏度高、应用方便的斑点酶免疫渗滤法。
- 薛添赵轶君董洁李红民
- 关键词:雌三醇单克隆抗体
- 生菜rbcS基因启动子序列的克隆与分析被引量:4
- 2013年
- 根据其他植物中已知的光合作用关键酶1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基编码基因(rbcS)及其启动子序列设计简并引物,以生菜叶片基因组DNA为模板,利用PCR扩增技术获得生菜rbcS上游1 046 bp的序列元件(GenBank登录号:JQ741945)。序列分析表明,该序列元件包含植物启动子所必需的核心元件CAAT-box和TATA-box,同时包含具有参与光应答、茉莉酸应答、脱落酸应答、乙烯应答、热胁迫应答及分生组织激活等相关的多种调控元件。序列比对表明,该序列与菊科、茄科、豆科3种科属多种植物的rbcS启动子序列存在较高同源性。该启动子的获得为开展以生菜作为外源蛋白表达宿主的相关研究奠定了良好基础。
- 董浩赵轶君李红民
- 关键词:生菜加氧酶启动子
- 基因工程技术制备类人弹性蛋白支架材料的初步研究
- :人弹性蛋白生物相容性好、具有良好物理化学特性,是近年来生物材料研究领域的热点之一.研究通过建立类人弹性蛋白原核表达载体及诱导表达,探讨利用基因工程手段大规模生产类人弹性蛋白、制备支架材料的可行性. 方法:全基因合...
- 赵轶君刘莹薛添郭全岭陈富林李红民
- 关键词:基因工程技术可溶性表达原核细胞
- 绿色荧光蛋白原核表达载体的构建被引量:4
- 2013年
- 为开发以绿色荧光蛋白(GFP)为基因的原核表达载体,根据NCBI基因序列设计引物,通过PCR扩增获得GFP编码基因,经限制性核酸内切酶消化后将GFP定向克隆至原核表达载体pMAL-c2X中malE基因下游的EcoRⅠ与HindⅢ位点之间,与malE基因融合为一个表达框。重组产物转化E.coli TB1感受态细胞,在添加有50 mg/mLAMP、10μmol/L IPTG的LB平板上于37℃培养12~16 h后放置于25~30℃的培养箱中继续培养4~6 h,365 nmUV照射下挑取转化克隆,经扩大培养后用IPTG诱导GFP的表达并用SDS-PAGE检测表达效率。结果表明,融合在麦芽糖结合蛋白下游的GFP编码基因可以在宿主细胞中有效表达,在365 nm UV照射下,可以直接从加有50 mg/mLAMP、10μmol/L IPTG的LB平板上挑取发绿色荧光的重组克隆,SDS-PAGE分析结果显示其扩大培养物经IPTG诱导后可高效表达GFP。该结果为进一步构建以GFP为标记基因取代抗生素筛选标记的原核表达载体提供了切实的试验依据。
- 赵轶君董浩潘红艳徐芳赵佳步怀宇李红民
- 关键词:绿色荧光蛋白原核表达载体
- 类人弹性蛋白—碱性成纤维细胞生长因子融合蛋白的原核表达、分离纯化和生物性能研究
- 生物材料在组织工程和再生医学的研究与实践中占有重要地位。开发研制既能为种子细胞提供粘附支架,又能刺激种子细胞增殖和迁移的“智能型”生物材料分子,是当今生物材料研究的重要方向。类弹性蛋白是一类根据弹性蛋白氨基酸序列中高频出...
- 赵轶君
- 关键词:生物材料碱性成纤维细胞生长因子融合蛋白
- 文献传递