韩林强
- 作品数:10 被引量:26H指数:4
- 供职机构:中国水产科学研究院珠江水产研究所更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划引进国际先进农业科技计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 大口黑鲈GHRH基因启动子区域序列分析及其活性检测被引量:5
- 2016年
- 生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone,GHRH)是下丘脑弓状核合成和分泌的小分子多肽,其主要功能是调节垂体细胞合成和释放生长激素。为研究大口黑鲈(Micropterus salmoides)GHRH基因5’侧翼启动子区域的活性和该区域中潜在的转录因子对GHRH基因表达的调控作用,对该基因5’端启动子区域约1400 bp长度的片段进行序列分析,预测顺式作用元件,获得了Oct-1、SP1、NF-1、C/EBPalp和C/EBP等多个潜在的调控GHRH基因表达的调节因子结合位点序列。在包括外显子1和内含子1的GHRH基因5’侧翼区两侧加入两个限制性酶切位点Xho I和Bam H I,对其进行改造,并将该片段插入红色荧光蛋白报告基因载体p DsRed2-1,构建了重组表达质粒pGHRH1-RFP。同时,用不含有外显子1和内含子1的GHRH基因5’侧翼区构建重组表达质粒p GHRH-RFP。将质粒pGHRH1-RFP和p GHRH-RFP转染鲤(Cyprinus carpio)上皮细胞(epithelioma papillosum cyprinid,EPC)。经过48 h的培养,在pGHRH1-RFP转染的部分细胞中检测到红色荧光蛋白表达。又将pGHRH1-RFP或p GHRH-RFP质粒注射到斑马鱼(Danio rerio)一细胞或二细胞期的胚胎中,注射了pGHRH1-RFP的胚胎在受精后48 h约有22.5%能检测到有红色荧光蛋白表达,受精后72 h约有29%的仔鱼检测到红色荧光蛋白表达。实验结果表明,目前分离到的GHRH基因5’侧翼序列具有启动基因表达的活性,且该基因的内含子1和外显子1是启动子的活性所必需的。另外,pGHRH1-RFP质粒注射的斑马鱼胚胎只能在胚胎和仔鱼的脊椎和肌肉中检测到RFP的表达,而在脑中没有检测到表达。推测扩增到的大口黑鲈GHRH启动子序列1407 bp(-1043 bp^362 bp)只是起到了驱动RFP脊椎和骨骼肌表达的作用,而不包括驱动在脑组织中特异性表达的启动子,本研究为GHRH基因功能的深入分析奠定了基础。
- 马冬梅韩林强白俊杰
- 关键词:生长激素释放激素启动子活性大口黑鲈
- 草鱼F2代选育家系的生长性能分析
- 2020年
- 草鱼(Ctenopharyngodon idella)是我国重要的淡水养殖鱼类,属于草食性鱼类,分布广泛,北至我国的黑龙江水系,南至珠江水系,和青、鲢、鳙一起统称为“四大家鱼”,已经有1700多年的养殖历史[1]。目前我国草鱼的年产量在国内淡水养殖鱼类中产量排名第一,据渔业统计年鉴显示,2015年草鱼养殖总产量为5670000t,约占中国淡水鱼养殖总量的20%[2]。由于江河、湖泊的环境变迁,捕捞过度等原因,近些年来草鱼自然资源量锐减,个体的经济性状指标也有所下降。目前养殖的草鱼主要是通过从江河中捕捞的野生草鱼直接作为亲本用于繁殖苗种,由于缺乏人工选育改良,加之有些苗种生产单位不注重亲本留种规程,造成了养殖草鱼的种质退化,主要表现为抗逆性差、生长性能下降[3-4],制约着草鱼养殖业健康可持续发展,因此,亟待培育生产性能优良的草鱼养殖新品种,促进草鱼产业的健康可持续发展。
- 张利德付璐璐韩林强孙雪姜鹏李胜杰
- 关键词:草食性鱼类黑龙江水系淡水养殖鱼类苗种生产捕捞过度
- 大口黑鲈良种培育和产业关键技术研究与应用
- 白俊杰李胜杰吴锐全何华先马冬梅樊佳佳陈昆慈于培松汪洪永李小慧陈文怡邓国成谢骏于凌云罗建仁王广军韩林强陈永乐郑光明叶星
- 该成果针对大口黑鲈养殖产业中缺乏优良品种、病害严重、鲜活鱼长途运输成本高、成活率低等主要技术问题,在大口黑鲈种质资源评价、新品种选育、病害防治、营养饲料和活鱼运输等方面开展了系统研究,取得了多项技术突破。整体技术达到国际...
- 关键词:
- 关键词:大口黑鲈品种选育病害防治人工配合饲料
- RNA干扰技术在鱼类中的研究进展被引量:8
- 2009年
- RNA干扰(RNA interference,RNAi)是真核生物体内利用双链RNA(double strand RNA,dsRNA)诱导同源靶基因的mRNA特异性降解,从而导致转录后基因沉默(posttranscriptional gene silencing,PTGS)的现象。RNAi主要通过核酸酶Dicer切割dsRNA生成21~23nt的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA),继而由siRNA识别并靶向降解同源靶基因mRNA,从而抑制靶基因的蛋白表达。文章综述了RNA干扰技术的原理、siR-NA的制备及在鱼类中的研究进展。
- 韩林强李胜杰于凌云白俊杰
- 关键词:RNA干扰基因沉默鱼类
- 大口黑鲈种质创新和产业关键技术开发与应用
- 白俊杰李胜杰吴锐全何华先马冬梅樊佳佳朱旺明陈昆慈钟金香汪洪永邓国成罗建仁谢骏于凌云郑光明王广军李小慧陈永乐叶星韩林强陈文怡周志金梁健辉全迎春姜鹏苗建新汪福保刘海涌
- 大口黑鲈俗称加州鲈,具有生长快、肉质好和无肌间刺等特点,是中国重要的优质淡水养殖品种,2014年全国总产量达35.0万吨。针对大口黑鲈养殖产业中存在的种质退化,良种缺乏,病害严重,配合饲料效果差,活鱼运输成本高等问题,该...
- 关键词:
- 关键词:大口黑鲈杂交饲料添加剂
- 大口黑鲈PACAP/GHRH-LP,GHRH基因功能初探
- 生长激素是一种具有多种生理功能的肽类激素,其生理作用包括促进生长,调节能量代谢,参与性腺发育过程,食欲调节及影响群体行为。促生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone, GHRH)...
- 韩林强
- 文献传递
- 草鱼GSTR基因外显子1、外显子2的SNPs筛选及其与生长性状的关联分析被引量:6
- 2011年
- 根据草鱼EST数据库中的rho型谷胱甘肽硫转移酶基因cDNA序列设计引物,扩增预计存在的SNP位点。采用PCR产物测序法和PCR-RFLP法,在珠江水系草鱼养殖群体中筛选到2个SNP位点,分别位于外显子1和外显子2上,为C-T突变,且属于同义突变,统计了多态位点在群体中的分布:C+129T位点CC型占0.69%,TC型占8.75%,TT型占80.56%;C+192T位点CC型占25.4%,TC型占48.6%,TT型占26.1%。利用一般线性模型将SNPs与草鱼6个生长性状进行关联分析,结果表明,C+129T位点TT型个体6个生长性状均值比TC型高(P>0.05);C+192T位点TT型个体体质量均值高于TC型和CC型个体(P<0.05)。双倍型关联分析表明D1型个体的体质量均值明显高于D3型和D6型(P<0.05),因而可以考虑将GSTR基因作为影响草鱼体质量等生长性状的候选基因,应用于草鱼分子辅助育种。
- 刘小献白俊杰徐磊于凌云樊佳佳韩林强
- 关键词:草鱼SNPS谷胱甘肽硫转移酶多态性
- 大口黑鲈GHRH-LP和GHRH基因序列同源性、基因结构和时序表达研究被引量:8
- 2011年
- 促生长激素释放激素(Growth hormone releasing hormone,GHRH)是生长激素释放调控的重要因子。过去人们一直将鱼类的促生长激素释放激素样多肽(Growth hormone releasing hormone like peptide,GHRH-LP)误认为是GHRH,直到最近才分离出GHRH基因。为了了解GHRH和GHRH-LP基因的结构特征及表达差异,研究克隆了大口黑鲈(Micropterus salmoides)GHRH和GHRH-LP基因,同时应用实时定量PCR技术研究了这两个基因的组织表达及发育时序表达情况。结果显示,大口黑鲈GHRH的成熟肽由27个氨基酸残基组成,GHRH-LP的成熟肽由44个氨基酸残基组成。两个基因均由5个外显子和4个内含子组成,但两者成熟肽编码区在外显子上的分布有明显不同。与其他脊椎动物比较,GHRH同源性为74%—100%,而GHRH-LP同源性为41%—96%,两者间具有一定的相似性(37%—63%)。GHRH基因仅在前脑和延脑中表达,而GHRH-LP基因在中枢神经系统及外周组织中均有表达;在胚胎发育过程中GHRH在神经胚后期检测到表达,其表达水平在仔鱼出膜1d后显著提高,而GHRH-LP在囊胚期及后续发育过程中均检测到表达。基因结构、序列同源性及表达谱研究均表明,GHRH和GHRH-LP存在显著差异,应为具有不同功能的两个基因。
- 韩林强白俊杰李胜杰
- 关键词:大口黑鲈GHRH基因结构
- 高孵化率大口黑鲈亲本的分子标记筛选方法
- 高孵化率大口黑鲈亲本的分子标记筛选方法,涉及大口黑鲈的生产育种方法。利用大口黑鲈促生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone,GHRH)基因启动子序列上一个66bp长度的隐性致死缺...
- 白俊杰韩林强李胜杰马冬梅叶星于凌云全迎春陈昆慈谢骏
- 文献传递
- 与大口黑鲈孵化率相关的分子标记及其应用
- 本发明公开了与大口黑鲈孵化率相关的分子标记及其应用。所述与大口黑鲈孵化率相关的分子标记位于大口黑鲈GHRH基因启动子序列上的第97~163bp。将GHRH启动子具这66bp序列的基因型命名为A,将缺失突变的GHRH启动子...
- 李胜杰白俊杰韩林强马冬梅叶星樊佳佳姜鹏全迎春于凌云
- 文献传递