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韩萌萌
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中国药科大学
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合作作者
刘俊
中国药科大学
李泰明
中国药科大学
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金亮
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一种新型重组蛋白及其制备和应用
本发明提供了一种能用于预防和治疗1型糖尿病的新型重组蛋白AnsB-TTP-CETPC-6×(IA2-P2)。通过基因操作,将1型糖尿病特异的一段抗原表位IA2-P2串联6段,在C端加His标签,再在N端加源于破伤风毒素的...
李泰明
张若洋
韩萌萌
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焦琳方
王全逸
刘俊
伍欣晔
文献传递
重组蛋白HSP65-6×(IA2-P2)-His的构建、表达及分离纯化
2013年
目的构建HSP65-6×(IA2-P2)-His表达载体并研究其在大肠杆菌中的表达及分离纯化。方法通过酶切酶连的方法将6×(IA2-P2)-His替换pET-28a-HSP65-6×P277中的6×P277,构建好的载体经DNA测序分析构建成功。乳糖诱导表达的蛋白经Ni+柱分离纯化。最后用SDS-PAGE及Western blot鉴定目的蛋白。结果 HSP65-6×(IA2-P2)-His最高表达量占菌体总蛋白的65%,超声破碎后蛋白以可溶性的形式存在于裂解上清中。Ni+柱纯化后蛋白纯度可达80%电泳纯以上。最后West-ern blot鉴定目的蛋白具有抗原性和His标签。结论重组载体pET-28a-HSP65-6×(IA2-P2)-His成功转入BL21中,以可溶性的形式高效表达,该工作为进一步验证融合蛋白的生物学活性奠定了一定的基础。
李泰明
韩萌萌
林旋
刘俊
吴洁
金亮
刘景晶
徐茂磊
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重组蛋白
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