刘小超 作品数:32 被引量:115 H指数:6 供职机构: 首都医科大学附属北京同仁医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 首都医学发展科研基金 北京市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
缬沙坦对豚鼠心室肌细胞动作电位的作用 2005年 目的:观察缬沙坦对豚鼠心室肌细胞动作电位的直接作用,以探讨其可能的抗心律失常作用。方法:采用Langendorff主动脉逆行灌流酶解分离法分离单个心室肌细胞。采用全细胞膜片钳记录,电流钳模式记录单个心室肌细胞的动作电位。实验分3组:对照组(n=5),普通细胞外液灌流,不含缬沙坦;缬沙坦5μM组(n=5);缬沙坦100μM组(n=5)。结果:缬沙坦5μM对豚鼠心室肌细胞静息膜电位、动作电位幅度、动作电位时程均无明显影响。缬沙坦100μM可延长心室肌细胞动作屯位时程,尤其是APD50从(334.2±14.4)ms延长至(375.2士12.0)ms(P<0.01)及APD30从(395.4士13.3)ms延长至(451.4±9.5)ms(P<0.01),对细胞静息膜电位、动作电位幅度无显著影响。结论:高浓度缬沙坦延长心室肌细胞动作电位时程APD50及APD90,而不影响动作电位的静息膜电位及动作电位幅度。适度延长动作电位时程,从而延长心室有效不应期,有助于折返引起的快速室性心律失常的防治,类似Ⅲ类抗心律失常药物的作用。提示缬沙坦可能通过此机制起抗心律失常的作用。 王吉云 胡大一 王宏宇 刘小超关键词:细胞动作电位 LANGENDORFF 动作电位时程 单个心室肌细胞 全细胞膜片钳记录 快速室性心律失常 亚硒酸钠对K562/ADR多药耐药的逆转作用及其机制 被引量:2 2007年 本研究探讨亚硒酸钠对白血病耐药细胞株K562/ADR细胞的多药耐药性的逆转作用及其逆转机制。用噻唑蓝(MTT)法检测亚硒酸钠对K562/ADR细胞的生长抑制作用及其对K562/ADR细胞耐药性的逆转作用;应用流式细胞仪检测亚硒酸钠对K562及K562/ADR细胞凋亡率的影响;用半定量RT-PCR法检测K562/ADR细胞中mdr1和bcl-2基因的表达情况。结果表明,10μmol/L亚硒酸钠可以明显增加K562/ADR细胞对阿霉素敏感性,其耐药逆转倍数为2.31;早期凋亡率在10μmol/L亚硒酸钠作用于K562细胞48小时是升高的;而中、晚期凋亡率在亚硒酸钠5、10μmol/L作用48、72小时时均明显升高;两种浓度亚硒酸钠在作用48小时可使K562/ADR细胞早期凋亡率增加,作用48、72小时可使K562/ADR的细胞中、晚期凋亡率增高,10μmol/L的亚硒酸钠所致凋亡率高于5μmol/L,作用72小时的凋亡率高于48小时;亚硒酸钠可使K562/ADR细胞mdr1 mRNA及bcl-2mRNA表达下降。结论:亚硒酸钠可部分逆转K562/ADR细胞的耐药性,其机制可能是增加K562/ADR细胞凋亡率,下调mdr1 mR-NA和bcl-2 mRNA的表达。 崔晶 丁璟 吴轶苹 刘复强 刘小超 王阳关键词:多药耐药 细胞凋亡 葡萄膜黑色素瘤患者血清血管内皮生长因子浓度及临床意义 被引量:4 2005年 目的测定葡萄膜黑色素瘤患者血清血管内皮生长因子(VEGF)的水平,并探讨其临床意义。方法应用酶联免疫吸附法(ELISA),分别检测不同组织病理分型的葡萄膜黑色素瘤(27例)、葡萄膜黑色素细胞瘤患者(6例)以及正常人(16例)外周血清中VEGF的质量浓度。结果正常成人和葡萄膜黑色素细胞瘤患者血清VEGF浓度显著低于葡萄膜黑色素瘤患者;有巩膜导水管浸润和远处转移的葡萄膜黑色素瘤患者血清VEGF质量浓度明显高于不伴巩膜导水管浸润和远处转移的患者;梭形细胞型患者血清VEGF浓度与混合型和上皮细胞型患者经统计分析无显著差异。结论血清VEGF水平在监测葡萄膜黑色素瘤的转移中有一定的意义。 傅涛 魏文斌 王阳 刘小超关键词:血管内皮生长因子 葡萄膜黑色素瘤 苦参碱对人视网膜母细胞瘤细胞生长与端粒酶活性影响的实验研究 被引量:24 2006年 目的探讨苦参碱(Ma)对体外培养的人视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞的生长抑制作用及其机制。方法培养的人HXO-Rb44细胞经不同浓度的Ma作用后。采用噻唑蓝比色法(MTT法)测定细胞的生长状况;采用苏木素-伊红染色、流式细胞技术及核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口标记法检测细胞凋亡率和形态学变化;采用端粒重复扩增法检测端粒酶活性的变化。结果一定浓度范围内Ma可抑制HXO-Rb44细胞的生长(P<0.01),24 h内呈浓度依赖性。0.4 mmol/L Ma作用12 h,可观察到HXO-Rb44细胞凋亡的形态改变,细胞凋亡率开始增加(P<0.01),端粒酶活性下降(P <0.01),两者在48 h内均呈时间依赖性。并具有一定相关性(r=-0.961,P<0.01)。结论Ma可抑制HXO-Rb44细胞生长,诱导其凋亡,端粒酶活性下降可能是Ma诱发HXO-Rb44细胞凋亡机制之一,提示Ma对视网膜母细胞瘤的综合治疗具有一定的应用前景。 喻巍 李彬 任若瑾 高飞 李辽青 刘小超 王阳关键词:苦参碱 视网膜母细胞瘤 兔心肌心室间复极离散的电生理学机制研究 被引量:2 2007年 目的观察生理和缺血状态下兔心室间复极离散,探讨临床缺血心肌发生室性心律失常的电生理机制。方法酶解法急性分离兔心室肌细胞,采用细胞膜片钳技术,分别观察对照组(正常心室内膜动作电位时程)和缺血组(缺血心室内膜动作电位时程)在不同刺激频率下[即基础循环周长(basic cycle length,BCL)=2000、1000、500及250 ms]左右心室肌心内膜细胞的动作电位时程变化。结果对照组生理心肌的室间离散分别为(47.70±7.89)ms,(45.50±7.00)ms,(40.30±7.33)ms,(37.90±6.45)ms;缺血后心室间离散则分别为(91.90±7.67)ms,(91.40±7.62)ms,(88.60±7.78)ms,(89.20±6.91)ms。结论生理状态的心肌左右心室间存在复极离散,缺血状态下心室间复极离散增大。这种心室间的复极异质性可能是缺血心肌发生室性心律失常的电生理机制之一。 葛丽华 李运田 李翠兰 杨进刚 刘小超 胡大一关键词:电生理学 膜片钳术 动作电位 大鼠压力负荷性心力衰竭进展过程中三磷酸腺苷敏感性钾通道功能观察 被引量:1 2010年 目的建立压力负荷性心力衰竭(心衰)大鼠模型,在模拟缺血的条件下,研究心衰发展的不同阶段大鼠左室心肌细胞膜三磷酸腺苷敏感性钾通道(KATP通道)的功能变化。方法雄性Wistar大鼠被随机分配到4周假手术组(F4)11只、12周假手术组(F12)10只、4周手术组(T4)13只和12周手术组(T12)10只。使用腹主动脉缩窄法建立大鼠心衰模型。通过右侧颈总动脉插管记录血流动力学指标。使用改良的Langendorff法分离大鼠左室心肌细胞。应用全细胞膜片钳技术,在电压钳模式下,记录F4、T4、F12、T12各组大鼠左室心肌细胞在正常状态及模拟缺血液灌流条件下KAT,通道电流情况,比较0mV电压下各组电流密度大小。结果动脉收缩压、舒张压及平均动脉压从术后4周开始明显升高,但是到12周的时候有所降低。左心室舒张末压和左心室内压上升/下降最大速率在T4组没有明显变化,在T12组左心室舒张末压明显升高而左心室内压上升/下降最大速率明显降低。膜片钳实验结果显示,基础状态下,全细胞膜电流密度在各组之间差异均无统计学意义,但是在模拟缺血液灌流25min时,T12组大鼠KATP通道的开放幅度比F12组明显增加,电流密度明显增大[(28.11±3.91)pA/pF比(11.55±1.17)pA/pF,P〈0.01],而T4组与F4组之间差异无统计学意义[(14.09±5.74)pA/pF比(11.74±3.68)pA/pF,P〉0.05]。无论是T12组还是T4组,大鼠心肌中KATP通道的基因表达并没有增多。结论成功构建压力负荷性大鼠心衰模型,T4组心肌肥厚,T12组呈慢性心衰。心肌细胞膜KATP通道在慢性心衰期对缺血的敏感性增强,全细胞膜电流明显增大,而这种反应发生在心肌细胞KATP通道表达增多之前。 初楠 胡大一 刘小超 刘杰 马力 杨进刚 李田昌关键词:心力衰竭 充血性 钾通道 膜片钳术 地塞米松对嗅感觉神经元环核苷酸门控通道mRNA表达的影响 被引量:6 2007年 目的应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR),观察地塞米松对大鼠嗅感觉神经元(olfactory receptor neurons,ORNs)环核苷酸门控通道(cyclic nucleotide-gated channels,CNG通道)A2亚基mRNA表达的影响。方法将40只Wistar大鼠随机分为4组(每组10只):24小时激素组、2周激素组及各自对照组。激素组大鼠腹腔注射地塞米松:24小时激素组按1mg/kg体重给药1次,2周激素组按0.2mg/天给药。各对照组均给予生理盐水腹腔注射。通过实时荧光定量RT-PCR方法,检测各组ORNs的CNG通道CNGA2亚基mRNA的表达量。结果24小时激素组和对照组CNG通道CNGA2亚基mRNA表达差异无显著性意义(P>0.05);2周激素组CNGA2亚基mRNA表达显著高于对照组(P<0.01)。结论地塞米松长期应用可以使ORNs的CNG通道CNGA2亚基mRNA表达上调,CNG通道的转录增强可能是糖皮质激素治疗嗅觉障碍的机制之一。 张聪 魏永祥 苗旭涛 刘小超 邢飞虹 赵红 韩德民关键词:糖皮质激素类 嗅觉受体神经元 离子通道 脐血和不同年龄组成人红细胞聚集、变形能力的分析 被引量:2 1999年 Objective: To explore the specialties of erythrocyte aggregation and deformation in newborns, the effect of age increase on erythrocyte rheology of health adult. Methods: The level of erythrocyte aggregation(Optical density assay) and deformation(Laser diffraction assay) were measured in 20 cases of cord blood, 115 cases of different age healthy adult. Results: The erythrocyte aggregation in cord blood group( 7.76 ± 0.80 ) were higher( P < 0.05 ) than those in middle age and youth control( 6.85 ± 0.82 , 6.77 ± 0.81 ). Erythrocyte aggregation and deformation in between other groups can be compared no significance. Conclusion: Newborns have good ability of erythrocyte aggregation and deformation; The age increase has no marked influence on erythrocyte aggregation and deformation of health adults. The study is conducive to distinguish abnormal and pathologic erythrocyte rheology in clinic. 翟艳苓 刘小超 刘复强 邓移风 赵莲 张秀荣关键词:脐血 红细胞聚集 红细胞变形 年龄 低体质量儿童外周血干细胞采集输血反应1例 被引量:2 2007年 目的:报告1例低体质量儿童行外周血干细胞采集过程中出现输血反应的情况。方法:患儿,女,6岁,体质量16kg,于2005-08/2005-09入院,诊断为神经母细胞瘤Ⅳ期。外周血干细胞采集预处理方案为环磷酰胺1g/d×2d、法玛新10mg/d×3d、长春新碱0.4mg/d×5d。采集前30min给予地塞米松2.5mg预防输血反应的发生。外周血干细胞采集应用CS-3000Plus血细胞分离机,调至儿童采集程序,配以小体积分离槽和小体积收集槽。机器正常初始化后,采用去白辐照悬浮红细胞100mL,将其用生理盐水1∶1稀释至200mL,进行全血灌注冲盈管路。当返血管路返出全血、首次溢出结束后停机,将其与患儿管路相连接,开机时全血流速设定为15mL/min。结果:①第1次开机19min后,患儿从耳阔至面部出现潮红,随即出现红色皮疹、瘙痒、燥动不安,过5min后全身出现红疹,血压90/60mmHg,心率124次/min,立即停机用盐水维持通路,静脉给予地塞米松2mg,非那根25mg,10%葡萄糖酸钙10mL,临床观察10min后患儿安静入睡,血压90/70mmHg,心率120次/min,重新开机,设定全血流速为15mL/min,20min后提高全血流速至25mL/min,共循环5000mL,用时3小时26分。②次日,开机前30min给予地塞米松5mg,开机后10min患儿出现胸闷,全身无皮疹,心率90次/min,停机,盐水维持密切观察,10min后患儿无不适,心率100次/min,重新开机,共循环5000mL全血,用时3小时38分。结论:①低体质量儿童在外周血干细胞采集过程中出现输血反应后,经及时处理顺利完成采集,并获得了足够的外周血干细胞。②设定全血流速15mL/min是CS-3000Plus血细胞分离机运转程序的最低限,输血速度较快,这可能是小儿发生输血过敏反应的一个因素。 刘小超 吴轶苹 黄东生 张伟令 王阳 李淑平关键词:低体质量 儿童 外周血干细胞 输血反应 多拷贝人C肽基因的构建及其原核表达研究 被引量:1 2007年 目的构建多拷贝的人C肽基因,选用合适的表达载体,以多拷贝基因的形式在大肠杆菌中高效表达人C肽。方法采用PCR、克隆、DNA序列分析、IPTG诱导表达和亲和层析等方法构建多拷贝的人C肽基因。结果构建成含5拷贝C肽基因的重组pET-30 a表达载体,经转化及诱导,可在大肠杆菌中高效稳定表达可溶性的带6个组氨酸标签的C肽融合蛋白。结论在大肠杆菌中获得了人C肽的高表达,为下一步C肽的功能研究创造了重要条件。 贾秀娟 杨金奎 柴三葆 于湄 刘小超 魏永祥关键词:C肽 大肠杆菌