刘昕
- 作品数:86 被引量:304H指数:8
- 供职机构:第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学电子电信更多>>
- PCR及Real-time PCR评价细菌DNA提取方法被引量:42
- 2008年
- 目的:比较几种不同的细菌DNA提取方法,建立一种适于PCR和Real-time PCR的细菌DNA提取方法。方法:分别用蛋白酶K法、碱裂解法、Chelex-100+NP40、Chelex-100+TritonX-100法和水煮法提取同种浓度大肠杆菌DNA,测定OD260/280;用不同方法提取不同浓度的大肠杆菌DNA,进行PCR和实时荧光定量PCR扩增,比较灵敏度。结果:5种方法提取细菌DNA,其中Chelex-100+NP40法纯度(OD260/280=1.79±0.03)最高,此方法所提取的DNA产物进行PCR及Real-time PCR扩增未见假阳性及假阴性,其灵敏度为10个/ml细菌浓度。结论:Chelex-100+NP40的细菌DNA提取方法纯度及灵敏度高,且适应于PCR及Real-time PCR。
- 胡晓红彭惠民刘昕黄正根袁科
- 关键词:DNA提取PCR实时荧光定量PCR
- 复发尖锐湿疣的基因诊断
- 1997年
- 尖锐湿疣(CA)是由人乳头瘤病毒(HPV)感染引起的最常见的病毒性性传播疾病之一,发病率高,治疗后复发率也高,国外已有前瞻性研究证明HPV(尤其是HPV16和18型)的长期存在(含反复复发)容易导致癌症,给病人带来很大痛苦和经济负担。
- 郭华阳周来新谭骏刘斌刘昕钟白玉纪贤文
- 关键词:基因诊断人乳头瘤病毒尖锐湿疣经济负担
- 两侧桡动脉手部行程和分支变异1例被引量:4
- 2005年
- 包庞刘芳刘明曦刘昕许建华闫庆凯田志远陈卫军孙建森
- 关键词:桡动脉病例报告静脉穿刺
- 促红细胞生成素在酿酒酵母中的表达
- 1997年
- 促红细胞生成素(EPO)是一种特异刺激红系祖细胞向功能成熟的红细胞增殖分化的造血生长因子。重组人EPO(rhEPO)应用于临床治疗多种红细胞减少症取得了确切疗效。 酿酒酵母是迄今研究最为深入的真核生物之一,其遗传背景清楚,由此衍生的各种载体宿主菌表达系统较大肠杆菌载体宿主表达系统有更完备的基因表达调控机制和对表达产物的加工修饰及分泌能力;
- 易绍萱吴军刘昕王燕纪贤文梁红
- 关键词:酿酒酵母生成素分子生物细胞增殖分化
- 脑苷肌肽注射液对大鼠创伤性脑损伤后脑保护作用被引量:9
- 2015年
- 目的探讨脑苷肌肽注射液对实验性创伤性颅脑损伤(TBI)大鼠模型的神经保护作用及对预后的改善作用。方法306只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、TBI组、脑苷肌肽高剂量治疗组(1.8ml/kg,高剂量组)、脑苷肌肽中剂量治疗组(0.6ml/kg,中剂量组)和脑苷肌肽低剂量治疗组(0.2ml/kg,低剂量组)。采用改良Feeney自由落体打击法建立脑外伤模型,术后连续给药28d,记录动物死亡率,神经功能评分及学习记忆能力。研究者运用7.0T小动物MRI及HE染色观察TBI后动物脑组织形态学变化,同时应用伊文思蓝检测TBI动物血脑屏障(BBB)通透性变化及脑水含量法检测脑水肿发生情况。结果高剂量组TBI后长期死亡率较TBI组显著降低(22%:28%,P〈0.05)。高剂量组和中剂量组大鼠神经功能和学习记忆的缺损改善较TBI组明显(P〈0.05)。同时,高剂量组和中剂量组大鼠挫裂伤及对侧海马体积萎缩都较TBI组明显减轻(P〈0.05),而海马区神经元坏死形态也较TBI组改善明显。与TBI组比较,高剂量组、中剂量组和低剂量组大鼠BBB破坏程度减轻[(16.43±2.1d):(11.87±1.66),P〈0.05],脑水肿程度显著改善(P〈0.05)。结论中、高剂量脑苷肌肽注射液的伤后28d连续治疗对实验性TBI大鼠具有明显的神经保护作用,并可有效改善TBI后动物的预后。
- 谭亮马康李荣伟唐俊陈前伟刘昕冯华
- 关键词:神经保护药脑损伤脑苷肌肽注射液
- 转录因子圈套策略研究进展被引量:5
- 2001年
- 转录因子圈套策略 (transcriptionfactor“decoy”strategy)是应用与顺式元件相一致的寡核苷酸双链转染细胞 ,竞争结合转录因子 ,从而抑制内源性基因表达 .
- 王付龙徐祥梁华平刘昕
- 关键词:圈套策略转录因子基因治疗基因调控
- 细菌16SrDNA基因T碱基特异的PCR产物片段化被引量:1
- 2005年
- 目的 探讨细菌 16SrDNA检测芯片杂交前的样本处理优化方法。方法 设计针对细菌 16SrDNA基因全长的通用引物 ,通过PCR时掺入一定比例的dUTP替代dTTP ,扩增长度为 1 5kb的片段 ,用尿嘧啶 DNA糖基化酶 (UDG)消化处理掺入到双链上的dUTP后 ,再经浓氨水特异性断开DNA双链上原dUTP处的磷酸二酯键 ,然后用聚丙烯酰胺凝受胶电泳 (PAGE)和琼脂糖电泳确认片段化的效果。结果 本实验选用的基因当dUTP与dTTP的比例在 3∶7~ 1∶1时 ,都能够获得比较理想的片段化结果。结论 通过控制一定的dUTP掺入比例再经UDG及氨水处理能够得到稳定的片段化结果。
- 黄正根刘昕高玉梅蔡瑜娇由莉越罗勇军
- 关键词:RDNA
- 体内基因转移方法研究进展被引量:2
- 1994年
- 体内基因转移方法研究进展刘昕,谭骏,朱锡华1990年9月美国国立卫生研究院(NIH)的Blases等人对一例因腺苷脱氨酶(ADA)缺陷而患重症联合免疫缺损的病孩进行了基因治疗的尝试,结果显示治疗确实有效。他们用的基因转移的路线是所谓"ex-vivo"...
- 刘昕谭骏朱锡华
- 关键词:基因转移
- Tet-on系统诱导esp1基因表达对A_(549)细胞染色体的影响被引量:1
- 2006年
- 目的观察肺腺癌Am细胞经Tet-on系统诱导表达espl基因后其染色体数目的改变。方法利用PTet—on基因表达调控系统,先后将调控质粒Ptet-on和反应质粒PTK-Hyg与PTRE-EGFP-espl以合适的比例用FuGENE6脂质体共转染入A-细胞,经G418和潮霉素筛选成活并带有绿色荧光的细胞为转染成功细胞,挑选8个单细胞克隆并扩增培养,加入强力霉素诱导espl表达。用RT-PCR检测不同浓度强力霉素诱导以及强力霉素诱导不同时间的espl的表达量,并采用传统秋水仙素方法以及流式细胞技术检测诱导不同时间段A549/Ptet-on/TK-Hyg/PTRE-EGFP-espl细胞克隆染色体数目的改变。结果100~200ng/ml浓度范围的强力霉素诱导espl表达量最高,诱导1h即可有espl基因的表达,至48h表达量到达高峰之后逐步减少。在诱导24h后逐步出现染色体数目减少。结论上调espl基因对肿瘤细胞异常染色体有一定的抑制作用,对肿瘤治疗有潜在的应用价值。
- 刘丽莎刘昕程英
- 关键词:A549细胞强力霉素染色体
- 脑苷肌肽注射液对大鼠大脑中动脉梗塞模型的脑保护作用研究
- 谭亮李荣伟马康汪金玉唐俊陈前伟刘昕冯华