周文婷
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 供职机构：东北农业大学生命科学学院生命科学与生物技术研究中心更多>>
- 发文基金：哈尔滨市科委攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 乙醇脱氢酶Ⅰ类基因全长cDNA的克隆与表达被引量：1
- 2007年
- Ⅰ类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中发挥重要作用,由ADH1,ADH2和ADH3组成。根据序列数据设计一对引物,利用RT-PCR同时克隆乙醇脱氢酶Ⅰ类基因全长cDNA。测序后的cDNA被克隆在表达载体pTYB11上并在大肠杆菌中稳定表达。纯化获得的酶通过其在340 nm处吸光值的变化进行酶活性测定。经检测重组ADH1,ADH2和ADH3的酶活力分别为2.0±0.3,0.8±0.2,1.5±0.2 U.mg-1。
- 周文婷崔羽王晓燕张永红李世荣李景鹏
- 关键词：基因克隆原核表达
- 乙醇脱氢酶Ⅰ类基因全长cDNA的克隆与表达(英文)
- 2007年
- 目的:克隆编码人Ⅰ类乙醇脱氢酶基因,并探讨Ⅰ类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中的作用。方法:从胎儿肝,肾提取的总RNA;经RT-PCR扩增得到cDNA并克隆至pGEM-T载体。cDNA序列用Kpn I和Pst I酶切鉴定,并检测其在大肠杆菌中表达活性。通过吸光法检测酶的活性。结果:成功克隆了人Ⅰ类乙醇脱氢酶并在大肠杆菌中获得稳定表达。经检测其酶活性分别为0．81～1．31U/mg、0．09～0．15U/mg和0．76～1．11U/mg。结论:cDNA克隆成功,并发现其与肝脏中分离的酶具有相似的活性。
- 周文婷李景鹏崔羽张永红李世荣
- 关键词：CDNA克隆酶活性检测
- 防御素基因原核表达载体构建及表达被引量：6
- 2004年
- 目的 :为了获得人防御素多肽 ,实验构建了防御素基因原核表达载体并使其在大肠杆菌中表达。方法 :采用从pUC18载体上回收HNP 1外源基因片段 ,使其与载体pET30b连接 ,获得pET30b HNP 1重组质粒 ,并在大肠杆菌BL 2 1(DE3)株中表达。结果 :发现人防御素融合蛋白得到表达。结论 :人防御素基因 (HNP 1)可在大肠杆菌BL 2 1(DE3)株中表达 。
- 李景鹏任桂萍郝艳秋凌华吴丹李璐于艳波韩放郝妍周文婷
- 关键词：融合蛋白
- 人神经营养素-4基因的克隆及表达
- 2006年
- 目的通过基因工程的方法扩增人神经营养素-4(hNT-4)cDNA,在大肠杆菌中表达hNT-4,为研究hNT-4的生物学作用提供材料。方法以人胎脑RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增hNT-4 cDNA,将其插入的质粒pGEM-T中。将经过序列分析确定的hNT-4 cDNA插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组表达载体pGEX-6p-1-NT-4,用SDS-PAGE法测定融合蛋白在大肠杆菌中的表达。结果经序列测定分析,克隆的hNT-4 cDNA核苷酸序列与已发表序列(GenBank,M86528)完全一致,并获得了高效表达hNT-4的重组菌株。结论体外成功扩增hNT-4 cDNA,并在原核细胞中高效表达了hNT-4。
- 崔羽常洪起路明霞李景鹏周文婷阳燕王立达
- 关键词：基因克隆原核表达
- 乙醇代谢酶基因多态性与酒精性肝病关系被引量：5
- 2007年
- 目的：研究乙醇代谢酶基因ADH3、ALDH2及CYP2E1 RsaⅠ/PstⅠ位点多态性与酒精性肝病（ALD）的关系。探讨遗传因素对其易感性的影响。方法：PCR-RFLP法检测东北地区汉族男性健康者、嗜酒者及ALD患者中ADH3、ALDH2和CYP2E1的基因型并比较其基因频率。结果：ADH3和CYP2E1的两种等位基因在各组中的分布差异无统计学意义;ALDH2的两种等位基因在三组间的频率存在统计学差异,ALDH2^＊1在嗜酒及ALD组中的频率显著高于其在对照组中的频率,二组均以ALDH2^＊1/2^＊1基因型为主,未见ALDH2^＊2/2^＊2;与嗜酒者相比,ALDH2^＊2在ALD组中的频率显著提高,且均为ALDH2^＊1/2^＊2。结论：ADH3及CYP2E1 RsaⅠ/PstⅠ位点多态性与东北地区汉族男性ALD的发生无关;ALDH2^＊1是嗜酒的诱因,ALDH2^＊2/2^＊2可防止嗜酒及ALD的发生,ALDH2^＊1/2^＊2具有最高的患病风险。
- 周文婷李景鹏崔羽王晓燕
- 关键词：乙醇代谢酶基因多态性酒精性肝疾病
- 人醇脱氢酶Ⅰ类基因全长cDNA的克隆、表达及其应用研究
- 醇脱氢酶(Alcoholdehydrogenase，ADH)已被发现存在于很多物种中。哺乳类动物的ADH在多种初级，二级和芳香族醇类的氧化中发挥作用，但是其最重要的作用是催化乙醇代谢的初始反应，因此在防止乙醇引起的肝损伤...
- 周文婷
- 关键词：醇脱氢酶蛋白纯化乙醇代谢酶肝损伤
- 文献传递
