张鲁滨
- 作品数:8 被引量:8H指数:2
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- 2004年-2009年浙江省猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的遗传变异分析
- 引言/目的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又称"猪蓝耳病",是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以妊娠母猪严重繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征的传染病。PRRSV为单股正链RNA病毒,编码8个开放...
- 徐丽华袁秀芳李军星申世川张鲁滨曹会敏王一成
- 副猪嗜血杆菌不同菌株CDT遗传变异分析
- 目的:对浙江省内分离到的个41个临床菌株进行CDT基因的扩增,对这些菌株的CDT三个亚基的基因序列进行测定,并进行进化树分析。方法:将扩增的三个亚基PCR产物克隆至pMD 18-T载体中,进行基因序列测定。结果:cdtA...
- 李军星王一成袁秀芳徐丽华曹惠敏申世川张鲁滨
- 关键词:副猪嗜血杆菌
- 2004年-2009年浙江省猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的遗传变异分析
- 目的:本研究对2004-2009年从浙江省各地采集的PRRSV疑似病例中的ORE5基因进行克隆及序列测定,并进行遗传变异分析,为今后更好的控制该病提供了理论依据。方法:根据Ganbank公布的ORES全基因序列设计合成引...
- 徐丽华袁秀芳李军星申世川张鲁滨曹会敏王一成
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因基因序列测定
- 副猪嗜血杆菌不同菌株CDT遗传变异分析
- 引言/目的副猪嗜血杆菌是猪Glasser’s病的病原体,可在特定条件下侵入机体而引起以纤维素性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎为特征的全身性疾病,其毒力因子尚不明确。华中农业大学岳敏等对副猪嗜血杆菌血清5型高致病性菌株SH0...
- 李军星王一成袁秀芳徐丽华曹惠敏申世川张鲁滨
- 副猪嗜血杆菌不同分离株CDT基因序列测定及其遗传变异分析被引量:2
- 2011年
- CDT毒素是多种革兰氏阴性致病菌的毒力因子。为了阐明CDT毒素在副猪嗜血杆菌不同菌株中的分布及其遗传变异情况,本试验对从浙江省不同地区猪场临床发病猪中分离到的41个副猪嗜血杆菌分离株进行了CDT基因PCR扩增,并对其中21个分离株CDT 3个亚基进行了基因测序及氨基酸序列分析。结果表明:所有41个临床分离株中都可以检测到CDT 3个亚基的基因,其中cdtA蛋白的氨基酸序列在不同副猪嗜血杆菌菌株中最为保守,同源性≥97.8%;cdtB及cdtC蛋白氨基酸序列变化较大,同源性均≥92.1%。其中cdtB亚基与牛DNase I活性关键位点的氨基酸残基具有一致性,且这些位点的氨基酸残基在不同菌株中高度保守,可能对CDT诱导细胞凋亡的活性起着重要作用。为研究副猪嗜血杆菌CDT的生物学作用提供了新的信息。
- 李军星王一成袁秀芳徐丽华曹会敏申世川张鲁滨
- 关键词:副猪嗜血杆菌CDT同源性
- 副猪嗜血杆菌CDT亚基原核表达及其抗原性鉴定被引量:2
- 2012年
- 为原核表达副猪嗜血杆菌(H.parasuis)CDT毒素并检测其在体外培养时的分泌表达情况,本实验将切除信号肽的CDT毒素的3个亚基基因分别克隆于pET-28a载体中在大肠杆菌进行表达,并将重组蛋白经亲和层析纯化后,免疫兔制备抗血清,用于鉴定H.parasuis体外培养时CDT分泌表达情况。结果表明CDT毒素3个亚基均在Rosetta菌株中得到表达,其中cdtB约为28.2 ku,符合预期大小,而cdtA和cdtC亚基比预期的23.5 ku和17.4 ku略大。表达的3个重组蛋白可以被自然感染猪血清识别,表明其具有良好的反应原性,同时也表明H.parasuis在猪体内定殖或感染过程中分泌CDT。制备的抗血清可以与体外培养H.parasuis的分泌蛋白中的CDT亚基反应,表明重组蛋白具有良好的免疫原性,同时也表明H.parasuis体外培养时也分泌CDT。
- 李军星王一成袁秀芳徐丽华曹会敏申世川张鲁滨
- 关键词:副猪嗜血杆菌原核表达抗原性
- 重组猪α干扰素的酵母表达及其对伪狂犬病毒的抑制作用被引量:4
- 2012年
- 利用自动发酵罐高效分泌表达rPoIFN-α,经硫酸铵沉淀、Q Sepharose FF阴离子交换层析和Superdex200分子筛层析纯化重组猪α干扰素,用纯化的rPoIFN-α进行PRV体外抑制试验.结果表明:随着表达时间的延长,发酵表达液中rPoIFN-α含量增高,其中72h表达液中rPoIFN-α的含量可达0.52μg/μL,约占总蛋白量的57.50%,活性为1.00×106 U/μL.rPoIFN-α提纯液的浓度为7.02μg/μL,纯度为98.1%,活性高达1.00×109U/μL.纯化rPoIFN-α的PRV抑制作用和感染阻断作用的比活均为1.42×105 U/μg,对PRV增殖抑制作用的比活为1.42×103 U/μg.表明发酵表达的rPoIFN-α对伪狂犬病毒病具有良好的抑制活性,为进一步开展重组猪α干扰素临床试验提供依据.
- 张鲁滨王一成吴润李军星袁秀芳徐丽华
- 关键词:猪Α干扰素巴斯德毕赤酵母酵母表达伪狂犬病毒
- 重组猪α干扰素的酵母表达及其对病毒的抑制作用
- 【目的】本研究利用发酵技术高密度培养巴斯德毕赤酵母,尝试高效诱导其表达重组猪α干扰素(rPoIFN-α);建立纯化rPoIFN-α的方法,从表达液中获得高纯度的rPoIFN-α;测定纯化的rPoIFN-α对猪繁殖与呼吸障...
- 张鲁滨
- 关键词:猪Α干扰素巴斯德毕赤酵母酵母表达猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒伪狂犬病毒
- 文献传递