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李秀山

作品数：13 被引量：16H指数：2
供职机构：湖南大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”湖南省自然科学杰出青年基金更多>>
相关领域：生物学农业科学更多>>

合作作者

文献类型

  • 9篇期刊文章
  • 3篇专利
  • 1篇学位论文

领域

  • 8篇生物学
  • 3篇农业科学

主题

  • 9篇拟南芥
  • 4篇原核表达
  • 4篇基因
  • 3篇抗体
  • 2篇单抗
  • 2篇单克隆
  • 2篇单克隆抗体
  • 2篇抑制剂
  • 2篇植物病害
  • 2篇植物病害防治
  • 2篇制剂
  • 2篇肉毒
  • 2篇肉毒毒素
  • 2篇生物信息
  • 2篇生物信息学
  • 2篇生物信息学分...
  • 2篇青枯
  • 2篇青枯病
  • 2篇青枯病抗性
  • 2篇酶抑制剂

机构

  • 13篇湖南大学
  • 2篇湖南农业大学
  • 1篇军事医学科学...

作者

  • 13篇李秀山
  • 6篇刘选明
  • 4篇赵小英
  • 3篇赵李剑
  • 3篇汪龙
  • 3篇于峰
  • 2篇林建中
  • 2篇王育
  • 2篇郭新红
  • 2篇常洪平
  • 2篇唐东英
  • 1篇罗泽宇
  • 1篇谢敏敏
  • 1篇郭明
  • 1篇贺热情
  • 1篇高姗
  • 1篇常丽
  • 1篇汪启明
  • 1篇王景林
  • 1篇叶佳卓

传媒

  • 3篇激光生物学报
  • 2篇湖南大学学报...
  • 1篇生命科学研究
  • 1篇湖南农业科学
  • 1篇动物医学进展
  • 1篇西北植物学报

年份

  • 1篇2024
  • 2篇2022
  • 1篇2016
  • 2篇2013
  • 1篇2012
  • 2篇2011
  • 2篇2010
  • 2篇2007
共 13 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
GA2ox1氧化酶基因的克隆及原核表达被引量：6
2010年
采用RT-PCR从拟南芥基因组中克隆到GA2ox1基因,通过Gateway克隆技术构建原核重组表达载体pD-EST17-GA2ox1,并转化大肠杆菌BL(21)star,对蛋白原核表达条件进行优化。结果表明,最佳表达条件为温度30℃、IPTG浓度0.2 mmol/L、诱导6 h。蛋白表达形式为包涵体,与Biotech对GA2ox1基因在大肠杆菌中的表达情况推测的结论一致。重组蛋白分子质量约为40 kD,经Ni Sepharose亲和层析柱纯化和Western blot鉴定得纯度90%以上的GA2ox1重组蛋白。研究结果为GA2ox1抗体制备及蛋白功能的进一步研究奠定了基础。
常丽赵小英郭明林建中李秀山刘选明
关键词：原核表达纯化WESTERNBLOT
拟南芥Rad23原核重组蛋白构建和活性检测被引量：1
2011年
在拟南芥中,Rad23基因通过参与泛素/26S蛋白酶体途径调节植物生长发育和激素应答.为进一步研究该基因编码蛋白的分子作用机制及其生物学功能,构建了pCold-Rad23融合蛋白重组表达载体,将该载体转化到大肠杆菌BL21中诱导表达目的蛋白.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果表明,分子质量为94ku左右的融合重组蛋白在大肠杆菌中获得高效表达.采用纯化的重组蛋白多次免疫昆明小白鼠的方法,获得了特异性强并且效价高的多克隆抗体,经蛋白印迹检测,在分子质量40ku左右处出现特异的蛋白质条带,证明所制备的抗血清可以与拟南芥Rad23蛋白特异性结合.
李秀山刘斌赵李剑唐东英赵小英刘选明
关键词：蛋白原核表达抗体
拟南芥信号肽AtRALF1的表达、纯化及活性分析
2016年
利用RT-PCR扩增获得拟南芥At RALF1基因的全长cDNA序列,将其构建入携带His标签的原核表达载体p ET28b中,获得重组表达载体p ET28b-At RALF1,并将其转入到大肠杆菌BL21(DE3)中。随后在不同的IPTG浓度、温度和诱导时间条件下,进行At RALF1蛋白的表达研究,建立了At RALF1融合蛋白的高效表达体系。结果表明,在30℃、1 mmol/L IPTG的条件下诱导4 h,At RALF1融合蛋白的表达量最大。进一步用获得的At RALF1融合蛋白处理苗龄5 d的野生型拟南芥(Col-0)植株,发现其根的生长受到了抑制,表明我们获得了具有活性的At RALF1小肽,为进一步研究该小肽奠定了基础。
李斌张小波于峰李兰李秀山杜长青肖浪涛刘选明
关键词：拟南芥信号肽原核表达蛋白质纯化活性检测
拟南芥DBB1a(double B-box 1a)蛋白的表达、纯化及Western blotting检测被引量：2
2010年
PCR扩增拟南芥(Arabidopsis thaliana)DBB1a cDNA的保守区段(GenBank登录号:AT2G21320),转化到冷诱导表达载体pCold TF上,构建pCold-DBB1a重组质粒,转化大肠杆菌DH5a。15℃下IPTG诱导表达融合蛋白,并通过SDS-PAGE检测。证实目的蛋白以可溶形式在约20 kD处高效表达,与预期蛋白大小相吻合。表达蛋白经Ni琼脂糖凝胶亲和层析纯化,SDS-PAGE及Western blotting检测证实纯化后获得高纯度融合蛋白,这为进一步研究DBBl a功能奠定了基础。
屠小菊汪启明李秀山邓克勤唐东英罗泽宇赵小英刘选明
关键词：蛋白纯化WESTERNBLOTTING
激酶抑制剂及其组合剂在提高植物青枯病抗性中的应用
本发明属于植物病害防治技术领域，具体涉及激酶抑制剂在提高植物青枯病抗性的应用。以小分子激酶抑制剂库处理拟南芥为基础，初步筛选能够提高拟南芥对青枯菌抗性的小分子激酶抑制剂，然后在青枯病危害较为严重的烟草等植物中验证相关小分...
于峰蔡俊伍斗生李秀山汪龙
A型肉毒毒素Hc基因的原核表达、纯化及单抗的制备
2007年
在大肠埃希菌中高效表达的重组A型肉毒毒素保护性抗原,是以包涵体形式存在。溶解后的包涵体溶液经过处理,用镍柱亲和层析法纯化,得到纯度约为90%的融合蛋白。利用纯化的重组抗原BoN-Ta免疫Balb/c小鼠,获得分泌抗BoNTa特异性的3株杂交瘤细胞株2A2、4F7和2A8,其单抗鉴定均为IgG1亚型,滴度达到1∶105。高纯度和活性单抗的获得为毒素检测试剂盒的研究奠定了基础。
李秀山刘选明赵李剑高姗王景林
关键词：A型肉毒毒素包涵体单克隆抗体
水稻RLK突变体在促进植物生长或稻油轮作中的应用
本发明属于农业技术领域，具体涉及Osflr3或Osflr11水稻突变体在促进植物生长或稻油轮作中的应用，本专利的发明人发现Osflr3或Osflr11基因是影响水稻根系土壤参与稻油轮作的关键因子，获得并应用促进稻油轮作的...
于峰张林安汪龙李秀山
拟南芥GHMP基因家族成员的组织表达及生物信息学分析被引量：5
2012年
利用生物信息学方法获得拟南芥全基因组中12个GHMP基因家族成员。通过实时定量PCR技术研究这12个基因在不同组织中的表达,结果显示它们具有组织表达特异性。构建了拟南芥中GHMP基因家族成员的系统进化树。启动子区调控元件分析表明,大多数GHMP成员包含有光响应、生物钟及其它逆境胁迫响应的相关元件,预测这些GHMP基因家族成员可能参与了植物的光信号、生物钟及相关的逆境胁迫信号转导途径。
袁聪颖常洪平叶佳卓王育胡帅胡怀斌李秀山郭新红
关键词：拟南芥生物信息学分析
拟南芥6个酪蛋白激酶基因的组织表达及其生物信息学分析
2011年
利用实时荧光定量PCR技术研究6个酪蛋白激酶摹惆在不同组织中的表达特性。结果表明:6个基因在各个器官中均有表达,但表达量不同。AT4G14340、AT3G23340、ATlG03930和AT3G03940基冈在花中表达量最高,在根中其次,在茎、叶和叶柄中的表达量最低;。4TIC,04440和AT4G26100基因在根中的表达最高,在化、茎、叶和叶柄中的表达量较低。对6个基因的碱基组成、核苷酸和氨基酸序列差异进行了比较。结果显示:它们的核苷酸组成情况为A>T>G>C,核苷酸同源性在60%～83%之间,氨基酸同源性在20%～79%之间。时启动子区域进行分析,发现含有多种与逆境诱导相关的调控元件,推测这6个基因与植物耐逆性有一定关系。
常洪平郭新红石军超喻达时崔溢王育李秀山赵李剑
关键词：拟南芥生物信息学分析
拟南芥AtWNK9基因的定位及表达分析被引量：1
2013年
AtWNK9为拟南芥WNK(With no lysine kinase)激酶家族成员,其功能尚不清楚.采用生物信息学和生物学实验相结合的方法,对AtWNK9蛋白结构、亚细胞定位、启动子元件、基因表达模式进行了分析.研究发现,AtWNK9定位在细胞核中;该基因在拟南芥根中高效表达,其表达受ABA,NaCl、葡萄糖、热和冷等非生物胁迫处理强烈诱导.结果表明,AtWNK9为非生物胁迫反应相关基因,并可能参与根的生长发育.
赵小英谢敏敏贺热情段桂芳王丽群李秀山林建中刘选明
关键词：基因表达拟南芥
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