潘伊微
- 作品数：11 被引量：17H指数：2
- 供职机构：塔里木大学更多>>
- 发文基金：新疆生产建设兵团博士基金国家自然科学基金新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室开放课题更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 棉酚对新疆多浪羊淋巴细胞IL-18基因表达影响的研究方法
- 本发明涉及一种棉酚对新疆多浪羊淋巴细胞IL-18基因表达影响的研究方法，属于生物技术领域。其具体方法和步骤如下：(1)分离和培养淋巴细胞；(2)提取总RNA；(3)合成cDNA；(4)cDNA的纯化；(5)设计引物；(6...
- 李莲瑞王娟娟潘伊微贾山岭徐宏伟曾国航李玮
- 文献传递
- 多浪羊IL-1β基因的克隆及序列分析被引量：5
- 2013年
- 【目的】进行多浪羊IL-1β基因的克隆及序列分析,为多浪羊IL-1β的功能研究及多浪羊免疫应答基因的筛选奠定基础。【方法】根据GenBank中NM_001009465.2的mRNA序列设计引物,以新疆多浪羊淋巴细胞的总RNA为模板,用RT-PCR扩增多浪羊IL-1β基因序列。【结果】IL-1β基因序列包含了一个862 bp的开放阅读框,成熟蛋白编码的氨基酸序列长度为286个氨基酸。通过IL-1-β核苷酸多序列比对发现,第70、163、180、269位上四个相对保守的碱基处出现了四个突变;通过IL-1-β氨基酸多序列比对,第24、36位上两个氨基酸发生突变。通过GenBank中的Blastn序列比较分析,多浪羊的IL-1β基因与普通绵羊的同源性高达99%。【结论】在进化树体系中,多浪羊与反刍动物集成一束,它们与其它哺乳动物源于共同的祖先,但分别处于进化树上不同的分支。
- 曾国航曹玉华王娟娟潘伊微贾山玲徐宏伟李莲瑞
- 关键词：多浪羊IL-1Β基因克隆核苷酸序列分析
- 一种新疆多浪羊外周血淋巴细胞cDNA文库的构建方法
- 本发明涉及一种新疆多浪羊外周血淋巴细胞cDNA文库的构建方法，属于生物技术领域。具体构建方法及过程如下：(1)提取和纯化总RNA；(2)合成cDNA第一链；(3)合成cDNA第二链；(4)对产物进行消化、酶切、过柱分离及...
- 李莲瑞潘伊微贾山岭王娟娟曾国航徐宏伟李玮
- 文献传递
- 新疆多浪羊IL-1β基因地高辛探针的标记和敏感性检测
- 2015年
- 【目的】IL-1β是一种多效的促炎因子,在细胞因子炎性反应中为重要介质,处于介导炎性反应的重要因子,在造血和免疫活性中都发挥重要的作用。该实验结果为进一步研究绵羊分子免疫学,从多浪羊外周血淋巴细胞c DNA文库的筛选基因,寻找与IL-1β相关的新基因奠定基础。【方法】将构建好的多浪羊的p MD-18T-IL-1β质粒[1]进行PCR扩增,经过切胶回收,目的基因的浓缩后,采用罗氏地高辛标记和检测试剂盒标记IL-1β基因,获得IL-1β地高辛探针,进行敏感性检测,在Hybond N+膜上显影,计算探针浓度。【结果】计算出标记后的探针浓度为17.1 g/m L。【结论】通过southern杂交可以得知,Hybond N+膜上有IL-1β基因的双链DNA,标准杂交液中为DIG标记的IL-1β基因单链DNA,通过避光显色,在Hybond N+膜有深紫色的杂交条带,证明探针的浓度达到标准浓度。
- 曾国航徐宏伟潘伊微贾山岭曹玉华李莲瑞
- 关键词：地高辛
- 新疆卡拉库尔羊Fas基因原核表达载体的构建及表达被引量：2
- 2013年
- 根据GenBank的羊Fas细胞凋亡因子序列设计1对特异性引物,将EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点引入到引物两端,同时加上保护性碱基。利用RT-PCR技术,从新疆卡拉库尔羊外周血淋巴细胞总RNA中扩增出特异性基因片段。将分离纯化后的PCR产物与pMD-18T载体进行连接,利用双酶切反应与菌液PCR对阳性重组克隆进行鉴定筛选,然后进行序列测定。使用原核表达载体pET28a来完成Fas的定向克隆,成功构建重组融合表达质粒pET-28a-Fas,然后将质粒转化至E.coli BL21感受态,设置不同IPTG浓度和诱导温度,选择最佳的表达条件,然后初步纯化重组融合蛋白。结果表明,在pET28a表达载体中,Fas基因的插入方向和读码框均正确;同时Fas基因也完成在E.coli BL21融合表达的目的,融合蛋白分子质量为39.7ku。
- 贾山岭潘伊微潘辉贺艳艳李莲瑞
- 关键词：FAS基因原核表达
- 新疆卡拉库尔羊TNF-α原核表达及多克隆抗体的制备
- 2013年
- 【目的】克隆卡拉库尔羊TNF-α基因,在大肠杆菌中表达、纯化,并对TNF-α蛋白的抗原性进行分析。【方法】采用PCR技术扩增TNF-α基因核酸片段,并克隆入pET-28b表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)株中表达。用电洗脱法纯化目的蛋白,并用免疫印迹法分析纯化蛋白的抗原特异性。【结果】重组质粒在BL21(DE3)菌株中经IPTG诱导表达一个相对分子质量约为49 KD的融合重组蛋白,原核表达质粒pET-28b-TNF-α表达的目的融合蛋白是以可溶的形式存在。用纯化的pET-28b-TNF-α免疫家兔,在免疫后的第45 d,Western-blotting和琼脂糖扩散试验分析表明,表达的pET-28b-TNF-α能被家兔的阳性血清所识别。【结论】表达蛋白pET-28b-TNF-α具有较好的反应原性和免疫原性。
- 潘伊微贺艳艳潘辉贾山岭李莲瑞
- 关键词：表达纯化抗原性分析
- 叶尔羌高原鳅表皮抗菌肽的提取及抑菌试验被引量：1
- 2013年
- 生物体产生的抗菌肽是对抗外源性病原体侵袭致病作用的防御性肽类活性物质。本试验主要取活体叶尔羌高原鳅的表皮放入研钵中,加入蛋白酶抑制剂和Tris--c1研成肉糊状,用乙酸乙酯浸提法提取抗菌肽;经水合茚三酮显色反应为蓝紫色,DE-52纯化产物后SDS-PAGE蛋白电泳鉴定,其分子量约为9 700Da,并对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌表现出明显的抗菌活性。
- 贾山岭刘书东潘伊微陈根元李莲瑞
- 关键词：叶尔羌高原鳅抗菌肽抑菌试验
- 家兔苦马豆素多克隆抗体的制备及其对小花棘豆中毒的治疗效果被引量：9
- 2014年
- 采用合成的苦马豆素(swainsonine,SW)人工抗原免疫接种家兔,获得高效价的SW抗血清,分离纯化得到的家兔SW多克隆抗体,复制家兔小花棘豆中毒模型,用SW多克隆抗体治疗小花棘豆中毒家兔,通过检测血清生化指标和免疫学指标,评价SW多克隆抗体治疗家兔小花棘豆中毒的效果。将18只家兔随机分为对照组(6只)、攻毒组(6只)和攻毒治疗组(6只),攻毒组和攻毒治疗组按照10g/(kg·d)的剂量饲喂小花棘豆,攻毒组试验兔出现死亡时(第70天)停止攻毒。攻毒第21天,攻毒治疗组试验兔注射SW多克隆抗体,每只兔每天1mL,连续注射4d。以攻毒试验开始为第0天进行首次采血,试验开始后每7d采血1次,进行血清免疫和生化指标测定。结果显示,攻毒第7天时攻毒家兔血清AKP活性和SW质量浓度显著高于对照家兔(P<0.05);第14天时攻毒家兔血清AST和LDH活性显著高于对照家兔(P<0.05),血清AMA活性和E-玫瑰花环率均显著低于对照家兔(P<0.05);第21天时攻毒家兔血清BUN、CRE和GLU浓度显著高于对照组家兔(P<0.05)。攻毒治疗组家兔注射SW抗血清后血清AKP、LDH、AST、ALT活性,BUN、CRE、GLU浓度和SW质量浓度较攻毒家兔显著下降,AMA活性和E-玫瑰花环率显著上升。说明,SW多克隆抗体可有效治疗家兔小花棘豆中毒。
- 陈根元贾琦珍潘伊微贾山岭王帅
- 关键词：小花棘豆苦马豆素多克隆抗体家兔
- 新疆多浪羊外周血淋巴细胞cDNA文库的构建及IL-8相关基因的筛选
- 本文以多浪羊外周血淋巴细胞为实验材料,采用SMART技术,构建了多浪羊外周血淋巴细胞的cDNA文库,用地高辛标记的IL-8探针与构建的文库进行核酸杂交筛选,并对筛选结果进行了初步分析。首先,从多浪羊外周血中分离淋巴细胞,...
- 潘伊微
- 关键词：外周血淋巴细胞CDNA文库
- 棉酚对新疆多浪羊淋巴细胞IL-18基因表达影响的研究方法
- 本发明涉及一种棉酚对新疆多浪羊淋巴细胞IL-18基因表达影响的研究方法，属于生物技术领域。其具体方法和步骤如下：(1)分离和培养淋巴细胞；(2)提取总RNA；(3)合成cDNA；(4)cDNA的纯化；(5)设计引物；(6...
- 李莲瑞王娟娟潘伊微贾山岭徐宏伟曾国航李玮
- 文献传递
