王鑫鑫
- 作品数：4 被引量：10H指数：1
- 供职机构：天津科技大学更多>>
- 发文基金：天津市科技支撑计划重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程更多>>
- 一种L-异亮氨酸羟化酶基因及其基因工程菌与应用
- 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种能特异性地催化L-异亮氨酸生成（2S，3R，4S）-4-羟基异亮氨酸的L-异亮氨酸羟化酶基因，以及含有该基因的基因工程菌。利用该菌株生产（2S，3R，4S）-4-羟基异亮氨酸，能够克服...
- 陈宁张成林谢希贤徐庆阳刘淑云刘远王鑫鑫
- 文献传递
- 黑加仑提取物对秀丽隐杆线虫降脂作用的研究
- 肥胖不仅对全世界的健康和福祉构成了日益严重的威胁,还是心血管疾病、II型糖尿病和高血压发展的主要危险因素之一。黑加仑提取物富含多种生物活性物质,具有降血脂、抗氧化等多种药理活性,对糖尿病、高血脂等代谢疾病具有良好的预防及...
- 王鑫鑫
- 关键词：黑加仑提取物秀丽隐杆线虫肥胖降脂分子机制
- 一种L-异亮氨酸羟化酶基因及其基因工程菌与应用
- 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种能特异性地催化L-异亮氨酸生成（2S，3R，4S）-4-羟基异亮氨酸的L-异亮氨酸羟化酶基因，以及含有该基因的基因工程菌。利用该菌株生产（2S，3R，4S）-4-羟基异亮氨酸，能够克服...
- 陈宁张成林谢希贤徐庆阳刘淑云刘远王鑫鑫
- 文献传递
- 苏云金芽孢杆菌重组L-异亮氨酸羟化酶的酶学性质及其在4-羟基异亮氨酸合成中的应用被引量：10
- 2014年
- 【目的】克隆并表达来源于苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)TCCC 11826的L-异亮氨酸羟化酶(L-isoleucine-4-hydroxylase,IDO),测定重组IDO酶学特性并构建用于4-羟基异亮氨酸(4-Hydroxyisoleucine,4-HIL)微生物转化的重组菌株,以考察该酶在4-HIL合成中的潜在应用价值。【方法】以B.thuringiensis TCCC 11826基因组为模板PCR扩增ido基因并构建该基因过表达菌株BL-IDO;采用Ni-NTA亲和层析法分离纯化重组IDO后检测其酶学特性;构建重组株菌W3110-IDO进行4-HIL的微生物转化。【结果】克隆B.thuringiensis TCCC 11826的ido基因,测序结果显示该基因含723个核苷酸,编码240个氨基酸,与已报道的B.thuringiensis 2-e-2的ido基因相似度分别为97.47%和97.91%。此IDO含有His1-X-Asp/Glu-Xn-His2基序,属于Fe2+和α-酮戊二酸依赖型羟化酶家族;酶学实验表明该酶能够特异性地催化L-异亮氨酸生成(2S,3R,4S)-4-HIL,其Km和Vm ax分别为0.18 mmol/L和2.10μmol/min/mg,最适反应温度和pH分别为35℃和7.0,该酶于35℃条件下放置5 h后仍具有85.1%的活性;在Escherichia coli W3110中过表达重组IDO,在未经优化条件下4-HIL最高转化率达89.28%。【结论】获得IDO编码基因序列(Accession No.KC884243)并首次较为系统地研究了其酶学特性,该酶反应条件温和且具有较高的活性及稳定性,在酶法或微生物转化法合成4-HIL中有较广泛的应用价值。本研究可为4-HIL及其它氨基酸衍生物的生物制造技术奠定理论基础。
- 张成林刘远薛宁王鑫鑫谢希贤徐庆阳陈宁
- 关键词：酶学性质苏云金芽孢杆菌微生物转化
