荣齐仙
- 作品数：12 被引量：93H指数：5
- 供职机构：中国中医科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金河北省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 不同采收期金银花的产量和质量研究被引量：43
- 2013年
- 目的研究不同采收期对金银花产量和质量的影响,为金银花的合理采收、批号划分和综合开发利用提供参考。方法在金银花不同的发育时期、采收时间,采集不同部位的样品,测定其生长指标、产量和绿原酸、木犀草苷量。结果金银花不同采收期和忍冬不同采收部位的各项生长指标、产量和绿原酸、木犀草苷量差异显著。结论金银花宜在"二白"至"大白"期采摘;第一茬花产量高、质量好,其次为第二茬花;忍冬枝叶绿原酸和木犀草苷的量较高,可以进行有效成分提取和综合利用。
- 张燕王文全郭兰萍荣齐仙郝庆秀李卫东兰金宝翁炜
- 关键词：金银花采收期绿原酸木犀草苷
- 白花丹参HDS基因的全长克隆与原核表达分析被引量：6
- 2014年
- 根据丹参转录组数据库提供的基因片段设计特异性引物,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从白花丹参中克隆1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-二磷酸合酶基因的全长cDNA序列,命名为SmHDS,GenBank注册号KJ746807。序列长度为2 529 bp,含有2 229 bp的开放阅读框,推测编码742个氨基酸,含有170 bp的5'UTR和130 bp的3'UTR。利用生物信息学软件对获得的序列进行同源性分析,得出SmHDS与紫花丹参HDS的亲缘关系较近。原核表达分析结果表明SmHDS在大肠杆菌中表达出与预测蛋白大小相当的目标蛋白,同时对影响蛋白表达的4个因素,即诱导温度、诱导时间、IPTG浓度和诱导时宿主菌的密度(A600)进行了优化,得出SmHDS蛋白表达的最佳条件为:温度30℃、诱导时间20 h、IPTG终浓度0.2 mmol·L-1、宿主菌的密度(A600)值为0.6。这为进一步研究1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-二磷酸合酶在丹参酮类化合物生物合成途径中的作用提供了理论依据。
- 姜丹荣齐仙袁庆军张文婧张永清黄璐琦
- 关键词：白花丹参HDS全长克隆原核表达
- 甘草粗皮中甘草酸的含量测定被引量：3
- 2006年
- 采用HPLC法测定粉甘草加工过程遗弃的粗皮中甘草酸含量。结果表明,甘草粗皮含有至少3种以上粉甘草中不含的未知成分;且含有甘草酸量高于粉甘草。建议利用遗弃的粗皮,提取甘草酸的原料,用于生产添加剂。此外,应进一步研究,粉甘草和带皮甘草的药效差异,以指导临床用药。
- 荣齐仙刘春生段天璇
- 关键词：甘草甘草酸
- 甘草鲨烯合酶基因及cDNA的克隆与序列分析被引量：14
- 2011年
- 目的:对甘草鲨烯合酶(SQS)基因的cDNA及DNA进行克隆及序列分析。方法:根据已报道的光果甘草SQS1基因的cDNA序列设计引物,采用RT-PCR的方法,提取甘草根的RNA然后反转录成cDNA,以cDNA为模板,扩增出SQS基因的cDNA序列,以甘草总DNA为模板,扩增SQS的DNA序列。结果:序列分析表明,克隆获得的甘草SQS1的cDNA编码区为1 242 bp,编码413个氨基酸残基,命名为GuSQS1,登录号为GQ266154,与卢虹玉等报道的甘草的2个SQS(SQS1和SQS2)的氨基酸序列一致性为98.55%,88.62%,对应DNA序列全长为4 484 bp,含有13个外显子,12个内含子,登录号为GQ180932。结论:甘草SQS的cDNA及DNA序列的获得为进一步研究甘草酸生物合成机制提供了基础。
- 荣齐仙刘春生黄璐琦张宁南博呙未
- 关键词：甘草鲨烯合酶RT-PCR
- 丹参转录因子SmWRKY1蛋白的表达和纯化条件优化研究被引量：3
- 2014年
- WRKY转录因子是一类含有高度保守的WRKY结构域的锌指蛋白，是植物所特有的转录因子家族。该研究将已克隆的 SmWRKY1 cDNA构建到原核表达载体pET28a上，转化大肠杆菌BL21（DE3）进行诱导表达，SDS-PAGE结果显示该蛋白的大小约36 kDa，与预测的蛋白相对分子质量一样，说明该基因在大肠杆菌中成功表达。对影响蛋白表达的4个因素：诱导时间、诱导温度、IPTG浓度及诱导前菌液的浓度进行优化，结果表明在大肠杆菌BL21（DE3）中，当A600达到约1.0~1.5时，加入0.2 mol·L-1的IPTG，在20 ℃诱导培养12 h后SmWRKY1蛋白的表达量较高。原核表达产物SmWRKY1蛋白以包涵体的形式存在，采用尿素提取包涵体蛋白，用Ni2＋亲和色谱法纯化表达蛋白，纯化后蛋白的质量浓度为2.454 g·L-1。经蛋白质印迹检测，His-Tag单克隆抗体可以特异性的识别SmWRKY1蛋白，进一步证实丹参SmWRKY1蛋白在大肠杆菌中成功表达。本研究为进一步开展 SmWRKY1 基因的表达与丹参酮类等化合物的生物合成相关研究奠定了工作基础。
- 刘玉忠申业荣齐仙吴文燕李瑞博吴志刚陈敏
- 关键词：丹参包涵体蛋白蛋白质印迹
- 甘草中甘草酸与草酸钙含量相关性的探索
- 目的从甘草药材粉末中提取甘草酸及草酸钙并测定其含量,试图通过草酸钙含量和甘草酸含量的相关性,说明钙离子是如何影响甘草酸积累的。方法超声提取甘草药材粉末中的甘草酸并用 HPLC 法测定甘草酸含量；高锰酸钾滴定法测定相应甘草...
- 牛小宇刘春生荣齐仙沈蒙
- 关键词：甘草酸草酸钙晶体
- 文献传递
- 甘草药材中甘草酸含量变异的分子标记研究—rbcL、trnL内含子、IGS和matK
- 甘草为豆科植物甘草、胀果甘草、光果甘草的干燥根及根茎，始载于神农本草经，列为上品。有调和诸药、解毒、补虚、止咳润肺等多种功能，是一种重要的大宗药材。在世界范围内应用广泛，遍及医药、食品加工、日化等行业。多年以来，商品甘草...
- 荣齐仙
- 关键词：甘草酸甘草药材
- 文献传递
- 利用Gateway克隆技术构建丹参SmNAC1转录因子的RNAi表达载体被引量：9
- 2014年
- NAC转录因子参与植物生长发育和对生物和非生物胁迫的应答反应,利用Gateway克隆技术构建丹参NAC转录因子的RNAi植物表达载体,以便进一步研究丹参NAC转录因子的功能。根据Gateway技术要求,设计含有attB接头的引物,使用NEB的Phusion超保真聚合酶,通过PCR方法,扩增SmNAC1基因的特异性片段。通过BP重组反应,将带有attB接头的PCR产物克隆到入门载体pENTR/SD/D-TOPO上,再通过LR重组反应,利用入门载体上的SmNACi特异性基因片断克隆到植物表达载体pK7GWIWG2D上。实验结果表明Gateway载体的构建方法能够高效、快速地将目的基因克隆到表达载体上,为植物基因转化提供基础。
- 赵容荣齐仙刘玉忠申业黄璐琦
- 关键词：RNAI
- 白花丹参鲨烯合酶SQS2的克隆与原核表达分析被引量：5
- 2015年
- 该研究根据丹参的转录组数据提供的基因片段设计引物,采用逆转录聚合酶链式反应方法,从白花丹参中克隆鲨烯合酶SQS2的全长cDNA序列,命名为SmSQS2,GenBank注册号KM244731。序列长度为1 597 bp,包含1 245 bp的开放阅读框,推测编码414个氨基酸,含有115 bp的5′UTR和237 bp的3′UTR。利用生物信息学软件对获得的序列进行同源性分析,得出白花丹参SQS2的与紫花丹参SQS2的序列无明显差异。原核表达分析结果表明SmSQS2在大肠杆菌中能表达出与预测蛋白大小相当的目标蛋白,对影响蛋白表达的4个因素,即诱导温度、诱导时间、IPTG浓度和诱导时宿主菌的吸光度(A_(600))进行了优化,得出SmSQS2蛋白表达的最佳条件为:IPTG终浓度0.2 mmol·L^(-1),宿主菌的吸光度(A_(600))为0.6,温度30℃,诱导时间20 h。这为进一步研究白花丹参鲨烯合酶SQS2在丹参萜类和甾醇类生物合成途径中的作用提供了理论依据。
- 荣齐仙姜丹查良平申业张燕黄璐琦
- 关键词：白花丹参克隆原核表达
- 唇形科植物牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶编码基因及其氨基酸序列的生物信息学分析被引量：2
- 2017年
- 牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPS)是二萜类物质合成途径中的一个关键酶。该文采用生物信息学方法对9种唇形科植物的牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶的核苷酸及其编码的氨基酸序列的结构、理化性质、信号肽、导肽、跨膜结构域、疏水性/亲水性和亚细胞定位特征、二级结构、蛋白质功能域、三级结构和进化关系进行了初步预测和分析,并构建了牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶蛋白家族的系统进化树。结果表明,9种唇形科植物的GGPS氨基酸序列理化性质基本一致,主要表现为亲水性蛋白,有叶绿体转运肽,不存在信号肽,没有跨膜结构域;大多数定位于叶绿体,少数定位于线粒体。蛋白质二级结构中最主要的结构元件是α-螺旋和无规则卷曲,含有多聚异戊二烯基合成酶的活性结构域、2个天冬氨酸富集区结构域、活性位点残基盖结构域和镁离子结合位点结构域。研究结果将为GGPS的酶学特性及二萜类生物合成的分子机制研究提供理论参考。
- 陈宜均荣齐仙姜丹申业黄璐琦
- 关键词：唇形科生物信息学
