贾文科
- 作品数:15 被引量:25H指数:3
- 供职机构:新乡学院生命科学与技术系更多>>
- 发文基金:河南省高校科技创新团队支持计划国家自然科学基金河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学环境科学与工程生物学更多>>
- 鸡新城疫病毒ND-xx08株HN基因的克隆及分析被引量:1
- 2010年
- 为克隆并分析新城疫病毒ND-xx08株HN基因,将其分离、纯化、培养,提取其病毒的基因组RNA,RT-PCR扩增获得与HN基因预期大小一致的DNA片段,克隆到pMD18-T载体,经EcoR I和Hind Ⅲ进行双酶切鉴定和测序鉴定.ND-xx08 HN基因的序列长度为1 716 bp,共编码571个氨基酸.与已发表的24株NDV HN序列的同源性分析表明,其核苷酸序列的同源性在80.0%~98.4%,氨基酸同源性在87.2%~98.2%.研究结果表明,ND-xx08具有强毒株的特性.
- 贾文科王选年许兰菊银梅岳峰宋涛
- 关键词:鸡新城疫病毒
- 新城疫油乳剂灭活疫苗病毒含量对免疫效价的影响
- 2013年
- 本研究选用β-丙内酯对河南新乡市地方株XX08-NDV进行灭活,探索其对该株病毒的最适灭活浓度和时间,并制备不同病毒含量的油乳剂灭活疫苗,接种15日龄健康未免疫麻鸡,免疫后第14、28天分别检测其新城疫抗体效价。结果显示:经0.01%的β-丙内酯37℃灭活2 h后的XX08-NDV尿囊液原液,稀释倍数为10倍,免疫注射剂量为0.5 mL/只时,可显著提高麻鸡的新城疫抗体效价。
- 银梅唐海蓉贾文科宁红梅王选年
- 关键词:新城疫病毒疫苗免疫效价
- 鸡新城疫病毒新乡株ND-XX10的分离与鉴定被引量:1
- 2011年
- 2010年初,已免疫过新城疫疫苗的新乡市某鸡场蛋鸡出现以消化道、呼吸道出血为主要症状的疑似新城疫病例。将病料经10日龄SPF鸡胚增殖分离病毒,命名为ND-XX10。提取其病毒基因组RNA,并以此为模板,RT-PCR扩增获得F基因主要功能区(1~631bp)片段并进行测序。结果显示,ND-XX10毒株F蛋白的裂解位点为112R-R-Q-K-R-F117,是典型强毒株氨基酸序列结构,第101位和121位氨基酸残基分别是K(赖氨酸)和V(缬氨酸),通过基因进化树分析,确定此分离毒株属于基因Ⅶe型。
- 银梅赵坤陈桂香宁红梅贾文科王选年
- 关键词:新城疫病毒F基因RT-PCR
- 猪瘟病毒CSFV E2蛋白配体表位多肽及其应用
- 本发明涉及猪瘟病毒CSFV E2蛋白配体表位多肽及其应用,多肽氨基酸序列为VHASDERLGPMPCRPKEIGSSAGPVRKTSCTFNYAKTGKNKYYEPRDSYF,其分子量为5.73kDa;并以PK-15细胞...
- 王选年朱艳平岳锋贾文科宁红梅银梅张艳芳李鹏孙国鹏
- 文献传递
- 传染性支气管炎病毒M_(41)株种子批的建立被引量:3
- 2008年
- [目的]为生产鸡传染性支气管炎疫苗奠定基础。[方法]在研究制备鸡传染性支气管炎疫苗所用毒种的毒力、免疫原性、保存期等的基础上,测定4种来源的传染性支气管炎病毒M41株的50%鸡胚感染量(EID50),选取滴度较高病毒作为毒种,建立传染性支气管炎病毒M41株种子批,并测定其毒力。[结果]含毒尿囊液在冻干前后对鸡胚的毒力不变。毒力试验结果表明该毒的毒力中等,可为雏鸡提供保护。M41株种毒的EID50和免疫原性在7代内无变化。湿毒在-15℃保存半年以内,其毒价基本不变。种子批建立后未受到细菌及其他微生物的污染。[结论]该种子批可以用于生产鸡传染性支气管炎疫苗。
- 王新卫贾文科王泽霖孙好学
- 关键词:种子批
- 猪瘟病毒E0蛋白的原核表达及鉴定被引量:5
- 2014年
- 为获得猪瘟病毒(CSFV)E0重组蛋白,建立CSFV抗体快速检测方法。本研究通过扩增CSFV C株E0基因,亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-2,构建重组原核表达质粒pGEX-4T-2-E0,转化至宿主菌Rostta(DE3)后进行诱导表达。SDS-PAGE检测表明与目的蛋白大小一致,其分子质量大小为46ku。优化重组蛋白表达条件,最终获得诱导表达的最佳温度为37℃,最佳IPTG浓度为0.1mmol/L,并且目的蛋白以包涵体形式存在。Western blot表明,目的蛋白能与CSFV兔化高免血清反应,表明该融合蛋白具有良好的抗原性。本研究为CSFV抗体检测试剂盒的研究奠定了基础。
- 郭东光朱艳平孙国鹏岳峰贾文科王军李鹏王自浩王选年
- 关键词:猪瘟病毒蛋白
- 鸡新城疫病毒ND-xx08株分离鉴定及F、HN基因的克隆与分析
- 鸡新城疫(Newcastle Disease, ND)是由新城疫病毒(Newcastle Disease Virus, NDV)引起禽的一种高度接触性、急性败血性传染病。新城疫是威胁世界养禽业的主要疾病之一,被世界动物卫...
- 贾文科
- 关键词:鸡新城疫病毒基因克隆分子流行病学
- 文献传递
- 鸡新城疫病毒ND-xx08株F基因的克隆及分析被引量:1
- 2010年
- 新城疫病毒(NDV)ND-xx08毒株经10 d龄SPF鸡胚增殖后,提取其基因组RNA并反转录成cDNA,用NDV F基因特异性引物,经PCR扩增后获得与F基因预期大小一致的DNA片段。将NDV F基因片段克隆到pMD18-T载体上,并进行EcoR I和Hind III双酶切鉴定和测序鉴定。结果显示,ND-xx08毒株F基因片段的长度为1 662 bp,共编码554个氨基酸,F蛋白的裂解位点为112R-R-Q-K-R-F117,是典型强毒株氨基酸序列结构。将NDV ND-xx08株F基因的47 bp到420 bp序列与新城疫病毒基因型I至基因型Ⅸ毒株的相同序列绘制病毒基因进化树,显示ND-xx08分离株属于基因Ⅶe型。将NDV ND-xx08株F全基因与国内外发表的23株NDV F基因核苷酸序列和氨基酸序列的同源性比较分析,结果表明,其核苷酸序列的同源性在82.7%~97.8%之间,氨基酸同源性在87.5%~97.7%之间。
- 王选年贾文科银梅岳峰田献礼
- 关键词:新城疫病毒F基因
- 黄曲霉毒素B_1完全抗原合成及鼠源多抗血清的制备被引量:8
- 2012年
- 为了合成黄曲霉毒素B1(AFB1)完全抗原,制备鼠源AFB1多克隆抗体血清。通过琥珀酰亚胺酯法在黄曲霉毒素B1(AFB1)分子上引入羧基,生成黄曲霉毒素B1肟(AFB1O)。用EDC法和DCC法合成AFB1-BSA和AFB1-OVA。采用薄层层析技术、紫外光谱技术(Uv)、SDS-PAGE鉴定完全抗原的合成。通过免疫BALB/c小鼠,获得鼠原多克隆血清,采用间接ELISA方法测定多抗血清的免疫效价,用竞争ELISA检测多克隆血清的敏感性和特异性。结果表明:免疫小鼠血清效价都在1:3200以上,其中6号鼠效价最高,到达1.28×10-4,敏感性好,半数抑制浓度IC50为22.268 ng/mL,交叉反应率低。本研究成功制备了AFB1完全抗原,获得了敏感的AFB1多克隆抗体血清,为以后制备AFB1单克隆抗体及免疫学快速检测方法奠定了基础。
- 魏继涛胡延春宁红梅银梅岳锋贾文科田献礼王选年
- 关键词:黄曲霉毒素B1
- 鸡传染性法氏囊病病毒IBDV VP2蛋白配体结合表位多肽及其应用
- 本发明涉及法氏囊病毒的线性配体表位及具体应用,合成了IBDVVP2蛋白上的多肽P22,并以CEF为靶细胞,通过IBDV的感染、收获,测定了IBDV的毒力、半数组织培养感染剂量和感染比,进行合成多肽与靶细胞的结合试验、病毒...
- 王选年朱艳平宁红梅银梅朱彦彩岳锋贾文科张艳芳李鹏孙国鹏
- 文献传递