龚婷 作品数:21 被引量:17 H指数:3 供职机构: 贵州大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 贵州省科技计划项目 贵州省科技厅重大专项 更多>> 相关领域: 农业科学 文化科学 医药卫生 更多>>
一种采用流式细胞术检测哺乳动物精液品质的方法 本发明公开了一种采用流式细胞术检测哺乳动物精液品质的方法,其特征在于:(1)用DPBS稀释精液至1mL,2000g,离心5 min后弃上清,重复1次;(2)用1ml DPBS混匀,使精子终浓度为1x10<Sup>6</S... 龚婷 蒙利洁文献传递 一种牛骨骼肌特异性表达基因FATP1启动子 本发明提供了一种牛骨骼肌特异性表达基因FATP1启动子,其核心启动子(-194至737)包含如SEQ?ID所示的DNA序列,其长度为931bp。由于采用了上述技术方案,与现有技术相比,本发明根据研究发现牛FATP1基因启... 许厚强 龚婷 陈伟 陈祥文献传递 一种牛骨骼肌特异性表达基因FATP1启动子 本发明提供了一种牛骨骼肌特异性表达基因FATP1启动子,其核心启动子(-194至737)包含如SEQID所示的DNA序列,其长度为931bp。由于采用了上述技术方案,与现有技术相比,本发明根据研究发现牛FATP1基因启动... 许厚强 龚婷 陈伟 陈祥文献传递 3β-HSD在初情期从江香猪附睾中的特异性表达模式 2023年 3β-羟基甾脱氢酶(3β-HSD)特异性表达于从江香猪的附睾组织中,并且在初情期时表达量最高。而目前对3β-HSD在初情期附睾不同区段的研究未被报道,因此本实验以香猪不同区段的附睾组织作为实验对象,通过使用免疫组织化学(IHC)与蛋白质免疫印迹(WB)分析3β-HSD在初情期香猪附睾5个区段(Ⅰ-Ⅴ区)的具体表达位置和表达量。IHC结果显示3β-HSD定位于香猪附睾的5个区段,且主要定位于附睾管上皮周围的平滑肌、管腔内附睾液及管腔微绒毛中。WB结果显示3β-HSD在Ⅳ区的表达量最高,并且显著高于Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区及Ⅴ区。此外,Ⅲ区的表达量显著高于Ⅰ区,但3β-HSD在Ⅰ区、Ⅱ区和Ⅴ区的各组之间并无统计学差异。综上,本研究发现3β-HSD在初情期香猪附睾定位于附睾管管周平滑肌、管腔内附睾液及管腔微绒毛,表达量以Ⅳ区最高,并且以区段特异性表达。 刘文娇 蒙利洁 龚婷关键词:从江香猪 附睾 3Β-HSD 从江香猪附睾发育中凋亡相关因子Caspase-3的表达模式 2023年 细胞凋亡可及时清除机体内多余和受损伤的细胞,以维持组织器官的稳定性。为探讨凋亡过程在公猪附睾发育过程中发挥的潜在作用,本实验以从江香猪为研究对象,利用实时荧光定量PCR(qRTPCR)、免疫组织化学(IHC)和WesternBlot技术分析了附睾15d(初情前期)、30d(初情期)、60d(初情后期)和180 d(性成熟期)4个时期凋亡相关因子Caspase-3、Bax和Bcl-2的差异表达模式。qRTPCR结果显示:Casp3和Bax基因mRNA在从江香猪60d表达量最高,Casp3在15d表达量最低,15d和180 d差异不显著;Bax在180 d表达量最低,且15 d、60 d和180 d差异不显著;Bcl-2在60 d表达量最低,在15 d表达量最高,4个日龄段差异显著。免疫组化结果显示:Caspase-3蛋白在30 d主要表达在附睾管腔的微绒毛,而在180 d主要表达在管腔中的精子上。Western Blot结果显示:Caspase-3蛋白表达丰度依次为60 d>30 d>15 d>180 d,且各日龄段差异显著。综上,本实验发现不同日龄从江香猪附睾凋亡相关因子Caspase-3、Bax和Bcl-2表达具有差异性,这一变化可能与附睾不同时期上皮细胞层细胞、微绒毛和精子的凋亡相关基因蛋白的差异表达有关,推测附睾内的凋亡过程参与了附睾功能的生理调节。 王涵 蒙利洁 龚婷关键词:从江香猪 附睾 凋亡 牛脂肪酸转运蛋白1基因启动子荧光素酶质粒的构建方法 本发明公开了一种牛脂肪酸转运蛋白1基因启动子荧光素酶质粒的构建方法。首先通过分子克隆方法克隆获得包含牛<I>FATP1</I>基因第一外显子的5’侧翼启动子序列,亚克隆至<I>pMD19-T-Promoter</I>载体... 许厚强 龚婷 陈伟 陈祥 赵佳福文献传递 从江香猪睾丸支持细胞分离培养与鉴定 被引量:1 2022年 【目的】建立一种高效制备从江香猪睾丸支持细胞(Sertoli cells, SCs)体外分离培养方法,为后续香猪雄性繁殖研究提供细胞材料,为同类小型香猪支持细胞的分离培养提供参考。【方法】采用0.1%Ⅳ型胶原酶和0.25%胰酶-EDTA组合酶消化法消化睾丸组织,差速贴壁法纯化支持细胞,使用含10%胎牛血清完全培养基培养支持细胞,观察其形态特征并记录生长曲线,经苏木精—伊红(HE)染色、RT-PCR及免疫荧光染色进行支持细胞的鉴定。【结果】组合酶法消化后可获得大量生精上皮细胞混悬液,刚分离的支持细胞呈圆形或椭圆形,分离培养5~6 h后SCs贴壁,贴壁后细胞形态呈梭形或不规则形,培养3~4 d后细胞之间呈紧密连接,可清晰观察到细胞核及细胞质中的颗粒状物质或小空泡;SCs分离后1~2 d增殖速度缓慢,培养3~6 d细胞增殖速度加快,活性增强,进入对数生长期,培养7~8 d后细胞增殖速率下降,原代支持细胞生长曲线呈S形;HE染色显示SCs细胞核为深紫色,细胞质呈淡红色;RT-PCR结果显示支持细胞特异性基因WT1、SOX9均表达;免疫荧光染色结果显示特异性基因GATA-4抗体免疫阳性率达90%以上。【结论】成功建立从江香猪睾丸支持细胞的原代培养方法。 高艺 黄泳 冯贤辀 王维勇 徐永健 龚婷关键词:睾丸支持细胞 从江香猪 人类遗传与优生课程教学改革探索 被引量:1 2021年 文章首先分析了人类遗传与优生课程教学现状,然后论述了人类遗传与优生课程教学改革,包括根据不同学科学生组成比例合理安排课程教学内容、根据选课学生的背景和专业特征选择教学手段、根据学生对知识点的掌握情况优化考核方式。 龚婷 陈祥关键词:教学内容 教学手段 Bloom+PBL教学模式在家畜繁殖学课程教学中的应用研究 被引量:1 2023年 为了探索Bloom+PBL教学模式在家畜繁殖学课程教学中的应用效果,文章选取贵州大学动物科学学院2018级、2019级两届动物科学专业本科生(共148名学生)为研究对象,分为两组,其中2018级(n=68)为常规教学组,2019级(n=80)为Bloom+PBL教学组,通过过程考核(30%)、实验考核(20%)、期末测评(50%)综合评定此次教学改革效果,结果表明,Bloom+PBL教学组的课程成绩、平时成绩、实验成绩和期末考试成绩均显著高于常规教学组;Bloom+PBL教学组学生在理解类题、分析类题、应用类题和论述类题的平均得分均高于常规教学组,两组学生的记忆类题目得分差异不大。 陈祥 龚婷 敖政 赵佳福关键词:问题导向教学法 香猪睾丸间质细胞 TAS 1R3基因干扰后对自噬相关因子的影响 被引量:1 2023年 旨在探究 TAS1 R3基因通过mTOR对从江香猪自噬相关基因表达的影响。本试验选择30日龄健康雄性从江香猪3头,采集睾丸组织并培养出睾丸间质细胞。将构建成功的干扰载体和空载体转染至细胞中,利用qRT-PCR检测其对 TAS 1R3基因表达影响,运用qRT-PCR和Western blot检测 TAS1 R3基因干扰后对味觉受体第一家族一号受体(TAS1R1)、细胞外信号调节激酶1(ERK1 ) 、细胞外信号调节激酶2(ERK2)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、 BECN1 和微管相关蛋白1轻链3β(MAP1LC3B)表达的影响。结果表明,当 TAS 1R3基因被干扰后,相较于shRNA-NC对照组, TAS 1R1、 ERK 1、 ERK 2、 mTOR 基因mRNA表达量均极显著降低( P <0.01),自噬因子 BECN1 和 MAP 1LC3B表达量极显著升高( P <0.01)。Western blot结果表明当 TAS 1R3基因被干扰后,与 shRNA-NC 对照组相比,蛋白T1R3、T1R1、p-mTOR、p-S6K1、p-ERK12均极显著降低( P <0.01),而自噬蛋白 Beclin 1 表达量极显著升高( P <0.01)。本试验通过将 TAS 1R3基因干扰载体转染至睾丸间质细胞,发现当 TAS 1R3基因被干扰后可通过影响 mTOR 基因的表达,调控其下游自噬因子的表达,提示 TAS 1R3基因与睾丸间质细胞的自噬密切相关,这为进一步研究 TAS 1R3基因通过调节自噬影响香猪生殖活动提供了借鉴。 王涵 蒙利洁 刘文娇 徐永健 龚婷关键词:从江香猪 睾丸间质细胞 自噬