丁衬衬
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项江苏省博士后科研资助计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学环境科学与工程更多>>
- 转基因小麦田土壤细菌16S rDNA V3片段的DGGE分析被引量：4
- 2011年
- 为长期监测转基因作物对土壤微生物菌群变化的影响提供可靠的试验方法。以检测转基因小麦田土壤细菌菌群变化为例,利用细菌特异性引物,扩增得到了土壤细菌16S rDNA V3可变区片段;通过变性梯度凝胶电泳(Denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE),分析PCR扩增得到的V3可变区片段;根据电泳条带的变化情况评价转基因小麦对土壤环境微生物的安全性。结果表明该方法所提取的DNA,可以不经过纯化直接进行PCR扩增等后续试验;DGGE图谱中条带清晰。该方法可作为长期监测土壤微生物种群变化的试验手段。
- 丁衬衬周艳红林凡云徐剑宏吴季荣祭芳史建荣
- 关键词：DNA提取变性梯度凝胶电泳转基因小麦
- 转基因作物对土壤微生物多样性影响研究技术的进展被引量：9
- 2010年
- 土壤微生物的多样性是保持农业生态系统稳定的基础,而作物的改变对土壤微生物的多样性结构具有显著的影响。转基因作物被引入到农田后所带来的微生物群落变化及对农业生态系统所带来的不确定因素,已成为研究热点。本文着重介绍了当前土壤微生物多样性研究中常用的3种基于16S rDNA的技术:变性梯度凝胶电泳(DGGE)、扩增性核糖体DNA限制酶切片段分析(ARDRA)和末端限制性酶切片段长度多态性(T-RFLP)技术,分析比较了各种技术的原理、优点及其应用局限性,并简短综述了这些技术近年来的应用。
- 周艳红丁衬衬史建荣
- 关键词：土壤微生物多样性DGGEARDRAT-RFLP
- 饲料中玉米赤霉烯酮的提纯与测定被引量：3
- 2011年
- 玉米赤霉烯酮污染饲料对人、畜造成巨大威胁,因此,对饲料中玉米赤霉烯酮检测水平的提高已不容忽视。为玉米赤霉烯酮监控提供灵敏、可靠的分析方法和试验数据,对其提纯与高效液相色谱测定方法进行了研究,结果表明：样品纯化条件,以二氯甲烷和NaCl溶液为提取剂,湿填硅胶柱为富集净化柱,用6 ml的甲醇溶液洗脱,采用HPLC进行测定;高效液相色谱检测条件,流动相为甲醇/水（80∶20,体积比）,流速为0.6 ml/min,紫外检测波长为236 nm,此时最低检出限为5μg/kg,在1.25~40.00μg/ml范围内,被测物浓度与测定的峰面积呈线性关系（r=0.999 1）;通过对检测方法日内、日间加标回收试验得到该检测方法回收率约为96.3%。该方法简便、快速、准确,可适用于饲料中玉米赤霉烯酮的提纯与测定。
- 王宏杰徐剑宏祭芳丁衬衬董飞史建荣
- 关键词：玉米赤霉烯酮纯化高效液相色谱
- 基于PCR-DGGE方法的转Nib8基因小麦根际土壤细菌群落多样性分析
- 根际土壤微生物是作物生态系中重要的参与者。根际土壤微生物的生态变化,会影响到植物病原微生物的消长,最终影响重大植物病害的灾变。因此,对根际土壤微生物生态的影响是转基因作物尤其是抗土传病害的转基因作物环境安全评价的重点之一...
- 丁衬衬
- 关键词：土壤细菌群落DNA提取变性梯度凝胶电泳
- 文献传递
- 抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇噬菌体单链抗体库的构建与鉴定被引量：1
- 2010年
- 从抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON毒素)杂交瘤细胞株中扩增出VH和VL基因片段,再经重叠延伸PCR拼接扩增得到单链抗体基因(ScFv),克隆到pCANTAB-5E噬菌粒载体上。然后转化感受态大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体超感染,构建成抗DON毒素噬菌体单链抗体库,库容约为1.1×105,滴度为1.3×108pfu。随机选取10个克隆进行双酶切鉴定,结果显示均有ScFv基因片段插入。抗DON毒素单链抗体库的构建,为进一步富集筛选并表达抗DON毒素单链抗体奠定了基础。
- 周艳红祭芳丁衬衬史建荣
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇单链抗体噬菌体抗体库
