- 铅对斑马鱼胚胎发育过程Fgf3基因表达的影响
- 2012年
- 目的研究铅暴露对斑马鱼胚胎发育过程Fgf3基因表达的影响，以探讨铅的胚胎发育毒性机制。方法野生型AB品系斑马鱼胚胎暴露醋酸铅浓度分别为0、0．1、0．5、2．5和12．5μmol／L，提取各组8、12、16、24、36、48及72hpf（受精后小时）斑马鱼胚胎总RNA，实时荧光PCR检测Fgf3基因定量表达；制备Fgf3基因RNA探针，整胚原位杂交方法检测Fgf3基因空间性表达。结果在胚胎发育全程中，各组Fgf3表达高峰均在12hpf（与其他时段比较，P〈0．01），随着铅暴露浓度的升高，Fgf3 mRNA平均表达量也逐渐增加，以对照组堙移mRNA表达量为基准，各铅暴露组（0．1、0．5、2．5和12．5μmol／L）相对表达量分别为1．02±0．24、1．05±0．26、1．22±0．46和1．25±0．38，其中2．5和12．5μmol/L铅浓度组Fgf3表达量均显著高于对照组（P〈0．05）；整胚原位杂交结果显示Fgf3主要表达部位是胚胎早期的头、尾部和胚胎中后期的中脑、鳍芽及咽弓部，在胚胎发育至12hpf时Fgf3阳性杂交信号区域及强度最为明显，但各铅暴露组与对照比较，在Fgf3表达部位及强度上未见明显差异。结论胚胎期铅暴露能引起Fgf3表达水平上调，改变了胚胎发育过程Fgf3正常表达规律，其可能与铅胚胎发育毒性有关。
- 贾聪聪林林刘妮娅张小晶张佳佳杨新军黄陈平
- 关键词：铅胚胎发育基因表达
- 一种总蛋白刚果红染色作为内参标准的免疫印迹定量检测方法
- 本发明属于免疫印迹检测技术领域，具体涉及一种总蛋白刚果红染色作为内参标准的免疫印迹定量检测方法，包括以下步骤：（1）制备变性待测蛋白质样本；（2）通过凝胶电泳对待测蛋白质样本分离；（3）将步骤（2）电泳分离的蛋白从凝胶转...
- 许朝进陈伟光王俊灵张佳佳
- 文献传递
- 胚胎期铅暴露对斑马鱼胚胎及幼鱼NMDA受体mRNA表达的影响被引量：4
- 2012年
- 目的:了解胚胎期铅暴露对斑马鱼胚胎及幼鱼N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体mRNA表达的影响。方法:野生型AB品系斑马鱼胚胎醋酸铅暴露浓度分别为0、0.1、0.5、2.5和12.5μmol/L,提取各组受精后24、48、72、96和120 h(hpf)斑马鱼胚胎或幼鱼总RNA,实时定量PCR检测NMDA受体亚基NR1.1、NR1.2和NR2B的mRNA表达量。结果:(1)对照组NR1.1和NR1.2及NR2B表达量在胚胎发育过程中逐渐升高,在孵化期(72 hpf)表达量增加明显,在幼鱼早期(96 hpf)时达到高峰(与24 hpf时比较,P<0.01),在120 hpf时仍处于较高水平。(2)随着铅暴露浓度增高,NR1.1表达量增加并有高峰前移的趋势,2.5μmol/L和12.5μmol/L铅暴露组NR1.1表达高峰期在72 hpf,并且显著高于对照组(P<0.05);铅暴露组NR1.2和NR2B动态表达也呈类似规律,但NR1.2表达高峰期呈平台化趋势,横跨72 hpf至120 hpf阶段,NR2B表达高峰期出现在72 hpf和120 hpf阶段。(3)NR1.1、NR1.2及NR2B mRNA表达量之间Pearson相关系数值分别为rNR1.1-1.2=0.681、rNR1.1-2B=0.637和rNR1.2-2B=0.514,均有统计学意义(P<0.01)。结论:在斑马鱼胚胎发育过程NR1.1、NR1.2及NR2B mRNA表达水平逐渐升高,在幼鱼早期达到高峰;胚胎和幼鱼阶段NR1.1、NR1.2及NR2B之间mRNA表达水平存在关联;铅有上调NR1.1、NR1.2和NR2B mRNA表达作用并使表达峰期前移,改变了正常的NMDA受体表达规律。
- 张小晶林林张佳佳贾聪聪何金彩黄陈平
- 关键词：斑马鱼胚胎
- 斑马鱼胚胎fgfrs与下游通路基因时序性表达及关系
- [目的]： 1.为了解正常情况斑马鱼胚胎发育过程中fgfrs基因fgfrla、fgfr1b、fgfr2、fgfr3、fgfr4)的时序性表达规律以及fgfrs基因之间的关系。 2.为了解正常情况斑马鱼胚胎发育过程中f...
- 张佳佳
- 关键词：成纤维细胞生长因子受体胚胎发育时序性
- 文献传递
- 斑马鱼胚胎发育过程成纤维细胞生长因子受体基因时序性表达被引量：1
- 2014年
- 目的探讨斑马鱼胚胎发育过程成纤维细胞生长因子(FGF)受体基因时序性表达规律。方法分别提取发育至4、6、10、12、18、24、48及72hpf斑马鱼胚胎总RNA并反转录为cDNA,用实时定量PCR方法检测FGF受体基因(fgfrs)mRNA的相对表达量。结果斑马鱼胚胎发育过程fgfrs mRNA动态表达水平有明显峰谷变化(P<0.01),胚胎fgfrs开始表达阶段依次为fgfr1a与fgfr1b(囊胚期)、fgfr4(原肠胚初期)、fgfr2(原肠胚期)及fgfr3(原肠胚后期),其表达高峰期分别在原肠胚期、原肠胚后期、体节期及胚胎发育中后期。旁系同源基因fgfr1a与fgfr1b动态表达趋势相似(r=0.830,P<0.05)。fgfr1a与fgfr3、fgfr1b与fgfr4、fgfr2与fgfr3 mRNA表达量之间相关分析也有意义(r值分别为-0.726,0.821及0.772,P<0.05)。结论斑马鱼胚胎发育过程fgfrs时序性表达有一定规律性,fgfr1、fgfr4主要参与胚胎早期发育调控,fgfr2、fgfr3主要参与胚胎中、后期发育调控。fgfr1a与fgfr1b共表达使其调控作用具有冗余能力。fgfr1和fgfr3之间在表达上可能存在相互制约关系。
- 张佳佳林林刘妮娅邬红梅何金彩黄陈平
- 关键词：胚胎发育成纤维细胞生长因子受体实时定量聚合酶链反应斑马鱼
- 一种总蛋白刚果红染色作为内参标准的免疫印迹定量检测方法
- 本发明属于免疫印迹检测技术领域，具体涉及一种总蛋白刚果红染色作为内参标准的免疫印迹定量检测方法，包括以下步骤：（1）制备变性待测蛋白质样本；（2）通过凝胶电泳对待测蛋白质样本分离；（3）将步骤（2）电泳分离的蛋白从凝胶转...
- 许朝进陈伟光王俊灵张佳佳
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