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鸽β-防御素1基因的克隆及其生物学作用鉴定被引量：5: 2014年; 【目的】从鸽子组织中克隆鸽子β-防御素1(AvBD1)基因,在大肠杆菌中表达重组鸽子AvBD1蛋白,测定其生物学特性。【方法】应用RT-PCR法从鸽子骨髓组织中扩增鸽子AvBD1基因,采用Real-time PCR法检测该基因在鸽子组织器官中的表达分布。将该基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体pProEX-HTa的EcoR I和Xho I双酶切位点上,构建重组表达质粒pProEX-pigeon AvBD1,将重组质粒进行诱导表达;对该重组蛋白进行纯化,通过菌落计数法测定其体外抗菌活性与理化特性。【结果】从鸽子骨髓组织中克隆到鸽子AvBD1基因,其cDNA大小为198 bp,编码65个氨基酸,经序列相似性分析,鸽子AvBD1与鸭AvBD1氨基酸序列相似性最高(81.5%)。鸽子AvBD1主要分布于免疫系统和消化系统组织中。Tricine-SDS-PAGE电泳结果表明,重组鸽子AvBD1蛋白分子量约8.8 kD,与预期大小一致。该重组蛋白具有广谱抗菌活性,高盐浓度显著降低其抗菌活性。此外,该重组蛋白的溶血活性极低。【结论】从鸽子骨髓组织中克隆到鸽子AvBD1基因,其主要分布在机体的免疫系统和消化系统中。该重组蛋白具有广谱抗菌活性,高盐浓度显著降低其抗菌活性,且该重组蛋白的溶血活性极低。; 李妍妍徐杨张婷婷徐倩倩韩宗玺刘胜旺马得莹; 关键词：重组蛋白抗菌活性

Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因的克隆表达及纯化: 2011年; 鸭病毒性肝炎（Duck virus hepatitis,DVH）是雏鸭的一种传播迅速、高度致死、以肝脏肿大和出血为主要特征的病毒性疾病,主要侵害4周龄以内的雏鸭。目前,认为本病包括3种类型,Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型,分别由Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型鸭肝炎病毒（DHV）引起,其中Ⅰ型和Ⅲ型属于小RNA病毒科,Ⅱ型属于星状病毒科。三者在抗原上互不交叉,但引起的症状与病变很相似。; 张婷婷侯振中张云刘明; 关键词：VP1基因克隆表达鸭病毒性肝炎小RNA病毒

抗Ⅰ型鸭肝炎病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定被引量：7: 2011年; 为制备抗Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-1)的单克隆抗体(MAb),本研究采用纯化的DHV-1免疫4周龄～6周龄BALB/c雌鼠,按常规方法制备MAb,通过间接ELISA方法进行筛选获得4株能稳定传代并分泌抗DHV-1的MAb的杂交瘤细胞株,分别命名为AF8、BF5、BG6和DB6。Dot-ELISA、间接免疫荧光试验和中和试验等结果表明4株MAbs效价为1∶1 600～1∶3 200,与新型DHV无交叉反应。其中,BF5和BG6具有中和活性。抗DHV-1的MAb的制备为DHV-1的生物学特性研究及其快速诊断方法的建立奠定了基础。; 李晓军张婷婷孟凡依刘明李刚张云; 关键词：单克隆抗体

重组鹅β-防御素12蛋白的原核表达及生物学特性被引量：2: 2016年; 【目的】研究重组鹅β-防御素12蛋白的原核表达并探究其生物学特性。【方法】采用His标签蛋白原核表达系统,将鹅防御素12(Av BD12)基因亚克隆到表达载体p Pro EX-HTa上,构建重组表达质粒。将重组表达质粒转化到大肠杆菌Rosseta感受态中,用IPTG进行诱导表达,并对该重组蛋白进行纯化。进一步采用菌落计数法测定其体外抗菌活性和盐离子稳定性。【结果】经Tricine-SDS-PAGE电泳分析,诱导表达的鹅Av BD12重组蛋白分子量约为12 k D,大部分以包涵体形式存在。该重组蛋白对大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、四联球菌、枯草芽孢杆菌均具有抗菌活性,高浓度盐离子显著抑制重组蛋白的抗菌活性。此外,该重组蛋白对鸡红细胞没有溶血活性。【结论】该重组蛋白具有广谱抗菌活性,高浓度盐离子显著降低其抗菌活性,且该重组蛋白不具有溶解鸡红细胞的活性。; 王秋玲徐倩倩张婷婷赵文钧陈玉秋齐甜铭马得莹; 关键词：重组蛋白抗菌活性

叶片数对尾缘加弯板垂直轴风力机功率影响数值模拟被引量：4: 2018年; 为了探究叶片数量对叶片尾缘加装弯板直线翼垂直轴风力机气动特性的影响,通过不同叶片数量下直线翼叶片尾缘加弯板对垂直轴风力机叶片周围流场改善情况的对比,分析其气动特性变化.选取NACA0018直线翼型作为研究对象,利用数值模拟计算7种弯板长度下,2,3,4这3种叶片数量下的直线翼垂直轴风力机动态输出特性和静态起动特性.研究结果显示:该类升力型垂直轴风力机的气动特性受到叶片数量和弯板长度的综合影响,弯弦比的增加能够提升风力机的阻力性能,但会弱化因叶片数量增加导致风力机产生的功率系数的差别;在不同叶片数量下,适当弯板长度对风力机静态起动性能具有优化作用,但其起到优化作用的方位角不同,且2叶片时优化效果最佳,平均转矩系数提升40%.该研究为垂直轴风力机叶片尾缘的设计与优化提供依据.; 李岩赵守阳赵守阳冯放张婷婷; 关键词：垂直轴风力机叶片数叶片尾缘弯板功率特性数值模拟

偏心风轮结构对垂直轴风力机气动特性影响数值模拟被引量：5: 2018年; 为了改善垂直轴风力机气动特性,提出了一种具有偏心结构的直线翼垂直轴风力机风轮形式,通过增大叶片气动力对转轴的作用半径来改善风力机的起动性能和提高输出功率特性.以采用NACA0018翼型的3叶片风力机为对象,利用数值模拟方法计算了具有6种不同偏心量风轮结构的风力机静态起动力矩系数和输出功率系数,分析了不同偏心量对风力机气动特性的影响规律.计算结果表明:适当的偏心量可消除在某些方位角处的反向力矩,使静态力矩系数波动变得平滑,从而有效改善直线翼垂直轴风力机整体起动性能.同时,适当的偏心量还可有效提高风力机的输出功率特性,最大功率系数可提高12%.; 李岩吴志诚田川公太朗田川公太朗张婷婷冯放张婷婷; 关键词：垂直轴风力机起动性气动特性数值模拟

鸭抗菌肽Dcath多克隆抗体的制备及鉴定被引量：1: 2019年; 为制备效价高、特异性强的鸭抗菌肽Dcath多克隆抗体,并对制备的多克隆抗体进行鉴定和初步应用,采用Fmoc固相化学合成法合成鸭抗菌肽Dcath的成熟肽段,与血蓝蛋白偶联后,与弗氏完全佐剂乳化,按照免疫程序免疫接种大白兔,采集免疫兔血清,亲和层析纯化多抗,ELISA检测多抗效价,以制备的多抗为一抗,用Western blot检测鸭血外周异嗜性粒细胞中Dcath的表达,用免疫组化(IHC)检测鸭回肠、肾脏组织中Dcath的表达。结果显示,合成的鸭抗菌肽Dcath纯度达98.28%,经ELISA检测,纯化的兔多抗效价达到1∶128000,经Western blot检测,鸭血外周异嗜性粒细胞大量表达Dcath,经免疫组化检测,鸭Dcath在肾脏及回肠组织细胞中广泛表达。结果表明,成功制备了鸭抗菌肽Dcath多克隆抗体,效价高、特异性强,为深入研究鸭抗菌肽Dcath的生物学特性提供了技术支持。; 朱健刘超群刘瑞奇张婷婷付杰卢连强冯兴军; 关键词：抗菌肽多克隆抗体

重组鹅β-防御素7蛋白的原核表达及其生物学特性分析被引量：2: 2016年; 为探讨鹅β-防御素7（Av BD7）的生物学特性,将鹅Av BD7基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体p Pro EX HTa的EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒p Pro EX-Av BD7,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）对其菌液进行诱导表达。经N-三（羟甲基）甲基甘氨酸十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（Tricine-SDS-PAGE）分析,该重组蛋白大小为10-15 ku,与预期大小结果一致。重组鹅Av BD7蛋白纯化后,通过菌落计数的方法测定其体外抗大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、四联球菌、枯草芽孢杆菌等抑菌活性,盐离子浓度对其抗菌活性的影响及其对鸡红细胞的溶血活性。结果显示,重组鹅Av BD7蛋白对所测定的5种细菌均有显著抗菌活性（P〈0.05）,且其抑菌活性随蛋白浓度的增加而增强。高浓度盐离子（150 mmol/L）显著抑制重组鹅Av BD7蛋白的抗菌活性（P〈0.05）。重组鹅Av BD7蛋白对鸡红细胞没有溶血活性（P〉0.05）。由此可见,重组鹅Av BD7蛋白具有广谱抗菌活性,高浓度盐离子显著降低其抗菌活性,且该重组蛋白不具有溶血活性。; 高梦莹徐倩倩张婷婷陈玉秋赵文钧齐甜铭马得莹; 关键词：重组蛋白抗菌活性

秸秆过滤猪场废水及滤料与猪粪好氧堆肥研究被引量：2: 2022年; 秸秆具有较大的比表面积,对猪场废水中悬浮固体及氮素等养分具有较好的截留及吸附特性,有助于猪场废水后续资源化利用,但过滤后秸秆滤料的高效再利用又成为新的研究热点。该研究利用玉米秸秆过滤猪场废水,研究过滤后的秸秆滤料与猪粪好氧堆肥效果,堆肥过程中碳、氮转化及有害气体的排放规律。结果表明:玉米秸秆过滤猪场废水最优工艺条件为:滤层容重为0.15 g/cm^(3),过滤管径为9 cm,装填高度为40 cm,此条件下猪场废水总氮(Total Nitrogen,TN)、总悬浮固体和化学需氧量的去除率分别为22.80%、51.60%和76.81%。在初始C/N、环境温度、含水率、通风速率分别为20~35、22.32~32.05℃、65%、0.2 m^(3)/h条件下,初始C/N越高,堆肥效果越好,堆体总有机碳(Total Organic Carbon,TOC)损失越大,而TN损失越小,有害气体排放主要集中在堆肥前期;初始C/N为35时,最高堆体温度达65.96℃,高温期(>50℃)可维持21 d,其中60℃高温长达12 d,种子发芽指数和TOC、TN损失率分别为81.03%、57.73%和10.08%,虽然CH_(4)、CO_(2)排放有所增加,但NH_(3)、N_(2)O排放和氮素损失显著降低(P<0.05),CH_(4)、CO_(2)、N_(2)O 3种温室气体的温室效应影响潜值为137.53 kg/t(以CO_(2)为当量)。研究为秸秆滤料和猪粪的资源化利用及其好氧堆肥过程有害气体的减排提供基础依据。; 王丽丽孙东升许雷张婷婷张婷婷姚义清; 关键词：秸秆猪粪好氧堆肥猪场废水 C/N

重组鸡β-防御素12蛋白的原核表达及其生物学特性分析: 2014年; 为探讨鸡β-防御素12(AvBD12)的生物学特性,试验采用RT-PCR方法从鸡脾脏组织中扩增到鸡AvBD12基因,其cDNA大小为198 bp,编码65个氨基酸。将该基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体pProex HTa上,进行原核表达。Tricine-SDS-PAGE电泳表明,重组鸡AvBD12融合蛋白分子质量约为14 ku。对该重组蛋白进行纯化与体外抗菌活性的测定,结果显示,纯化后的重组鸡AvBD12融合蛋白对金黄色葡萄球菌和兔波氏杆菌有较高抗菌活性,对猪霍乱沙门氏菌和乳酸菌的抗菌活性较弱。高盐浓度对其抗菌活性有显著影响。该重组蛋白对鸡红细胞无显著溶血活性。荧光定量PCR结果表明,AvBD12基因在所测定的15个鸡组织器官中均有表达。; 马得莹徐杨李妍妍徐倩倩张婷婷韩宗玺刘胜旺; 关键词：重组蛋白抗菌活性

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张婷婷

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