郝贺龙
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：东华大学更多>>
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- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 人胰岛素B27K-DTrI前体在毕赤酵母中发酵条件的优化被引量：2
- 2011年
- B27K-DTrI(B27位突变为赖氨酸的去三肽胰岛素)具有单体性质好,生物活性高等特点,是潜在的速效人胰岛素药物。在前期实验中,筛选到了一株高拷贝、高表达B27K-DTrI前体的S菌株。为提高人胰岛素B27K-DTrI前体在重组毕赤酵母S菌中的表达量,优化了S菌5 L发酵条件(温度、pH)。结果显示:pH 5.0,温度25℃,诱导108 h后,人胰岛素B27K-DTrI前体蛋白的表达量最高,可达114 mg/L。
- 郝贺龙黄志伟张兴群于铭文陈婷
- 酿酒酵母转化方法的新探索被引量：7
- 2012年
- 在现有电转化和聚乙二醇/醋酸锂(PEG/LiAc)诱导的化学转化的基础上,进一步研究和探索了酿酒酵母感受态细胞不同预处理及相应的转化条件对转化效率的影响。结果表明:处于对数生长早期(OD600=0.6)的酵母细胞的转化效果最佳;电转化中分别以120 mmol/L的DTT和300 mmol/L的LiAc预处理感受态酵母菌10 min,可以得到较高的转化效果;联合使用120 mmol/L DTT和300 mmol/L LiAc能大幅提升酵母转化效率,达到7.15×105cfu/μg,PEG/LiAc诱导的化学转化中使用300 mmol/L LiAc能大幅提升酵母转化效率,达到2.75×105cfu/μg,远高于文献报道的水平。同时证明了改进后的转化方法同样能够提高外源DNA同源重组转化效率。
- 房志家陈婷郝贺龙张兴群黄志伟
- 关键词：酿酒酵母电转化DTT
- 人胰岛素B27K-DTrI前体在毕氏酵母中表达条件的优化被引量：1
- 2011年
- 目的优化甲醇酵母表达系统,提高B27K-DTrI前体表达量。方法用不同浓度的G418 YPD平板、联合Real-time PCR筛选高拷贝菌株。优化高拷贝菌株的最佳起始诱导吸光度A、诱导时间、诱导剂浓度等表达条件。结果筛选到高拷贝菌株S3菌,最佳诱导条件为诱导起始A600约6.0,甲醇诱导浓度0.75%,诱导时间72 h,目的蛋白表达量118 mg/L。结论通过条件优化实验,为人胰岛素B27K的产业化提供了可靠的实验基础。
- 郝贺龙陈婷乔元昊黄旋江致君张兴群
- 关键词：速效胰岛素甲醇酵母
- 胰岛素类似物的生物制备
- 速效胰岛素是一类通过基因工程方式获得的单体胰岛素,具有起效快,安全性高等优点,是新型胰岛素类似物的一种。本论文通过基因工程方法制备两种单体速效胰岛素。 论文包括两个部分,第一部分是利用内含肽介导的大肠杆菌表达系统制备单...
- 郝贺龙
- 关键词：胰岛素类似物生物制备基因工程方法毕赤酵母
- 文献传递
