马健男
- 作品数：10 被引量：14H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 西尼罗病毒NS1基因的原核表达与抗原性鉴定被引量：2
- 2009年
- 为进行西尼罗病毒(WNV)NY99株NS1蛋白的免疫学研究,通过PCR方法扩增WNV NY99株NS1基因,并将其克隆至原核表达载体pMAL-c2X上,构建出重组表达质粒pc2X-NS1,经IPTG诱导得到可溶性的麦芽糖结合蛋白(MBP)-NS1融合蛋白(MBP-NS1),其分子质量约为90ku,约占可溶性菌体蛋白质量的50%。利用直链淀粉树脂柱对MBP-NS1纯化后的重组蛋白的纯度达到60%,western blot和间接ELISA检测证明纯化的MBP-NS1具有良好的抗原性和特异性,为进一步开展关于WNV NS1蛋白的研究奠定了基础。
- 马健男杨涛王群张维军徐青元田野林燕宋红梅步志高吴东来
- 关键词：西尼罗病毒NS1基因原核表达
- 蓝舌病病毒群特异性单克隆抗体的制备
- 本研究以原核表达的血清型17型蓝舌病病毒(BTV-17)的VP7蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,通过常规杂交瘤技术将免疫后小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行融合,以BHK-21细胞繁殖的血清型12型蓝舌病病毒
- 耿宏伟杨涛马健男孙恩成王凌凤魏鹏秦永丽吴东来
- 西尼罗病毒NS1蛋白特异性单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2011年
- 目的:制备针对西尼罗病毒NS1蛋白的特异性单克隆抗体。方法:以原核表达的重组NS1蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠并通过常规杂交瘤技术将免疫后小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行融合。以真核表达的重组NS1蛋白为检测用抗原,建立间接ELISA检测方法筛选分泌NS1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞。并利用Western blot和IFA试验对所获得的单克隆抗体进行鉴定。结果:共获得了2株稳定分泌NS1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为WN-1C10和WN-3D10,其亚类鉴定分别属于IgG2a和IgG1。这2株单克隆抗体均能与西尼罗病毒NS1蛋白和病毒抗原发生特异性反应,而与日本脑炎病毒无交叉反应。结论:本实验成功制备出针对西尼罗病毒NS1蛋白的特异性单克隆抗体,为我国建立西尼罗病毒与日本脑炎病毒的血清学鉴别诊断方法奠定了基础。
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- 关键词：西尼罗病毒NS1蛋白单克隆抗体
- 西尼罗病毒NS1蛋白特异性单克隆抗体的制备
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- 西尼罗病毒NS1基因的原核表达与抗原性鉴定
- 通过PCR方法扩增西尼罗病毒(WNV)NY99株NS1基因,并将其克隆至原核表达载体pMAL-c2X上,构建出重组表达质粒pc2X-NS1,经IPTG诱导得到可溶性的麦芽糖结合蛋白(MBP)-NS1融合蛋白(MBP-NS...
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- 关键词：西尼罗病毒原核表达融合蛋白
- 文献传递
- 蓝舌病病毒VP7基因的原核表达被引量：10
- 2009年
- 为获得蓝舌病病毒(BTV)VP7基因的原核表达蛋白,本实验采用RT-PCR方法扩增出了血清1型BTV的VP7基因,并克隆到原核表达载体pMAL-c2X中,构建了重组质粒pMAL-VP7。将重组质粒转化TB1感受态细胞,以0.5mmol/L的IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果显示融合蛋白MBP-VP7以可溶形式存在,分子质量约为90ku。以纯化的重组蛋白作为包被抗原,初步建立了检测BTV血清抗体的间接ELISA诊断方法,为今后进一步开展BTV诊断研究奠定了基础。
- 宋红梅杨涛马健男王群张维军徐青元杨增岐吴东来
- 关键词：蓝舌病病毒VP7基因原核表达
- 西尼罗病毒NS1基因的原核表达与抗原性鉴定
- 通过PCR方法扩增西尼罗病毒(WNV)NY99株NS1基因,并将其克隆至原核表达载体pMAL-c2X上,构建出重组表达质粒pc2X-NS1,经IPTG诱导得到可溶性的麦芽糖结合蛋白(MBP)-NS1融合蛋白(MBP-NS...
- 马健男杨涛王群张维军徐青元田野林燕宋红梅步志高吴东来
- 关键词：西尼罗病毒NS1基因原核表达
- 文献传递
- 西尼罗病毒NS1蛋白特异性单克隆抗体的制备
- 为制备针对西尼罗病毒NS1蛋白的特异性单克隆抗体。本研究以原核表达的重组NS1蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠并通过常规杂交瘤技术将免疫后小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行融合。以真核表达的重组NS1蛋白为检测用抗原,建立...
- 马健男杨涛徐青元孙恩成林燕步志高吴东来
- 文献传递
- 西尼罗病毒NS1蛋白单克隆抗体的制备及B细胞表位鉴定
- 西尼罗热是一种由西尼罗病毒（West Nile virus, WNV）引起的并通过蚊子传播的急性人畜共患传染病。WNV属于黄病毒科（Flaviviridae）黄病毒属（Flavivirus）,并与日本脑炎病毒（Japan...
- 马健男
- 关键词：西尼罗病毒NS1蛋白单克隆抗体噬菌体展示B细胞表位
- 文献传递
- 蓝舌病病毒群特异性单克隆抗体的制备
- 耿宏伟杨涛马健男孙恩成王凌凤魏鹏秦永丽吴东来
