马国兴
- 作品数：7 被引量：6H指数：2
- 供职机构：浙江理工大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：浙江省研究生创新科研项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 玉米端粒酶RNA模板基因候选序列的转基因鉴定体系研究
- 2013年
- 研究采用pCAMBIA 1301穿梭质粒和LBA 4404菌株,侵染不同品种玉米成熟胚诱导的愈伤组织,以构建玉米端粒酶RNA候选序列的转基因鉴定体系。构建了两个含有玉米端粒酶RNA的pCAMBIA 1301穿梭质粒,一个携带模板区正常的玉米端粒酶RNA候选序列(野生型),另一个携带模板区定点突变处理的端粒酶RNA候选序列(突变型),然后分别侵染甜玉米成熟胚诱导的愈伤组织,也同样分别侵染糯玉米成熟胚诱导的愈伤组织。结果表明:在愈伤组织培养中,甜玉米的愈伤诱导率在40%左右,而糯玉米的愈伤诱导率高达80%;在抗性筛选培养基上已成功获得抗性愈伤组织,经PCR鉴定愈伤组织基因组中分别含有正常和突变的目的片段,这表明成功构建了玉米端粒酶RNA候选序列的转基因鉴定体系,为进一步鉴定相关候选序列提供有效的技术方法。
- 郑洁杨力媛马国兴马登旭刘小川
- 关键词：甜玉米糯玉米农杆菌介导法抗性愈伤组织
- 水稻染色体端粒长度的遗传研究
- 端粒是真核生物线性染色体末端必不可少的DNA-蛋白复合物，通过形成“帽子”结构，起到防止染色体末端降解或融合的作用，在一定程度上维持了细胞染色体末端结构的稳定，保障了细胞各染色体遗传信息的完整性。目前发现绝大部分真核生物...
- 马国兴
- 关键词：水稻染色体端粒长度
- 水稻端粒酶RNA候选序列的克隆及特征解析被引量：2
- 2013年
- 端粒酶是由端粒酶反转录酶和端粒酶RNA构成,端粒酶RNA中含有端粒合成所需的模板序列。现仅获得了拟南芥的端粒酶RNA序列。为了建立快速有效的富集植物端粒酶的方法并克隆水稻的端粒酶RNA序列,研究中使用不同浓度的PEG6000选择性的沉淀端粒酶萃取液中的杂蛋白。结果表明当PEG6000浓度为4%时,端粒酶活力最高,并可以有效降低核糖体28SrRNA和18SrRNA的干扰。从端粒酶蛋白液中提取RNA,并在其3′端连接接头,在模板区设计上游引物,PCR扩增获得一条292bp的未知片段,其中含有端粒模板序列5′-AAACCCTAA-3′。将该片段及拟南芥端粒酶RNA的转录调控区进行序列比对分析发现,两者具有类似的转录调控元件。因此,初步判定292bp的目的片段为水稻端粒酶RNA的模板下游序列。
- 马登旭杨力媛马国兴郑洁应畅刘小川
- 关键词：水稻PEG6000
- 水稻单个端粒长度定量测定及分析被引量：3
- 2013年
- 端粒是真核生物线性染色体末端的特殊结构,一定长度的端粒在维持真核生物遗传信息完整性和染色体结构稳定性中起重要作用。建立一种简单快捷定量测定水稻单个端粒绝对长度的方法对研究水稻各个染色体端粒具有积极的意义。研究将特殊接头连接到水稻染色体端粒的G-overhang末端,并利用近端粒区域的特定引物以及下游接头引物,通过PCR技术,获得所需鉴定的端粒,结合DNA凝胶电泳成像分析系统,定量检测水稻单个端粒的长度。结果显示本方法可以通过少量水稻基因组DNA有效测定单个端的粒长度。
- 马国兴马登旭杨力媛郑洁韦敬航刘小川
- 关键词：水稻PCR技术端粒长度
- 水稻端粒酶RNA模板基因序列鉴定体系的建立被引量：1
- 2013年
- 利用水稻端粒酶对端粒序列的合成作用,对模板基因序列进行定点突变,构建了pCambia1301-T突变型、pCambia1301-Y野生型载体。经农杆菌介导,选用水稻不同品种和组织,探索候选序列的鉴定体系。结果显示,不同水稻品种诱导愈伤,差异显著,其中中花11号可快速诱导愈伤,比广陆矮4诱导时间缩短一半,用成熟胚和幼胚分别诱导愈伤,无明显差异;对突变型、野生型、正常组织进行基因组DNA端粒鉴定和端粒酶活性分析,发现突变型端粒酶活性明显高于对照。这些均表明该鉴定体系完整、可靠,为端粒酶RNA模板基因序列的鉴定建立了有效的方法。
- 杨力媛郑洁马登旭马国兴刘小川
- 关键词：水稻端粒酶RNA定点突变
- 水稻端粒长度测定及其遗传特性研究
- 2016年
- 端粒在保护和维持染色体完整性方面发挥了重要作用，且与细胞衰老、癌变密切相关。由于同一细胞内，不同染色体端粒长度存在差异，研究单个端粒长度的遗传特性对于深入了解端粒的作用，阐明端粒与细胞周期间的关系具有重要意义。本研究利用水稻籼亚种和粳亚种之间平均端粒长度存在明显差异的特点，结合它们的杂种F1、F2代群体，采用改良的单个端粒长度测定技术（STELA），对T02p、T02q、T04q、T09p、T10q、T11p等6个端粒长度进行了分析。结果表明：单个端粒长度与相关染色体长度存在相关性，且具有数量性状遗传特征。更重要是F1代与亲本之间有5个端粒没有显著差异，仅有T04q一个端粒呈现出超显性遗传效应，且超过极显著的水平。因此，推测调控细胞周期的端粒长度并非是整个细胞平均端粒长度，而是某些或极少数关键端粒的长度。
- 叶聪莹黄倩马国兴林高强曹佳薇刘小川
- 关键词：水稻端粒长度
- 西兰花端粒酶分离与活性测定探究被引量：2
- 2012年
- 植物端粒酶以自身的RNA亚基为模板,维持着染色体末端端粒的长度,从而使植物细胞可持续分裂。本研究以西兰花花蕾为材料,采用不同分子量、不同浓度的PEG分别提取端粒酶,根据PEG吸附蛋白质的原理,从具有端粒酶活性的组织中分离并富集端粒酶。结果显示:用PEG 6000提取西兰花端粒酶,且用100μg的酶量进行酶促反应时测得的端粒酶活性最高。以此为参数,经改进的TRAP法成功检测到:用0.2g PEG 6000/700μL洗脱液提取出的端粒酶活性很高。这些分离、检测技术为其它植物组织中端粒酶活性的检测和评价提供了新的途径,尤其对低活性的植物端粒酶检测具有重要意义,为深入研究端粒酶RNA的序列及结构奠定了基础。
- 刘红彦马国兴杨力媛郑洁刘小川
- 关键词：西兰花端粒酶检测
