林源
- 作品数:22 被引量:31H指数:3
- 供职机构:上海交通大学更多>>
- 发文基金:上海市科技兴农重点攻关项目奉贤区科学技术发展基金项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 用于降低仔猪呼吸道疾病的中草药饲料添加剂及其猪饲料
- 本发明涉及了一种用于降低仔猪呼吸道疾病的中草药饲料添加剂及其猪饲料。所述中草药添加剂包括如下组分及重量份数:党参30~90份、白术10~30份、茯芩30~90份、山药30~90份、黄芪30~90份、苏子10~30份、莱菔...
- 朱建国张艳玲林源李本强
- 抗鸡传染性支气管炎病毒单链抗体间接ELISA筛选方法的建立
- 2011年
- 建立一种筛选特异性单链抗体的间接ELISA优化方法。用鸡传染性支气管炎病毒IBV-M41株接种SPF鸡胚,纯化后作为抗原包被96孔板进行间接ELISA,从本实验室构建的原核表达质粒pOPE101-XP-scFv/JM109(DE3)中筛选出针对IBV-M41株的scFv,并对各反应参数进行探索,优化筛选方法。通过敏感性实验、交叉性实验、重复性实验评估优化后的筛选方法。优化的反应条件为,包被抗原1:20稀释(61.36μg/mL),4℃包被过夜;2%脱脂奶粉37℃封闭1 h;含可溶性scFv的待测样品1:100稀释(142.7μg/mL),37℃作用2 h;MYC鼠单抗1:2 000稀释,37℃作用2 h;羊抗鼠抗抗体1:4 000稀释,37℃作用1 h。敏感性实验显示样品中的scFv浓度的最低检出量为17.83μg/mL;特异性实验显示筛选出的scFv只与IBV-M41株特异性结合;重复性实验的板间、板内变异系数分别为2.78%、2.56%。建立的筛选scFv的间接ELISA方法有较好的敏感性、特异性、稳定性,为scFv的深入研究奠定基础。
- 赵蕾林源李本强朱建国
- 关键词:单链抗体传染性支气管炎间接ELISA
- 猪α、γ干扰素的原核表达、纯化及抗病毒活性初步研究被引量:5
- 2010年
- 提取猪白细胞DNA、猪脾脏RNA,特异性引物扩增猪IFN-α、IFN-γ基因,将IFN-α和IFN-γ基因分别插入原核表达载体pET-30构建重组表达质粒pET-30-IFN-α和pET-30-IFN-γ,转化大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下表达猪IFN-α及IFN-γ,SDS-PAGE分析重组表达蛋白;用细胞病变抑制法检测重组表达蛋白的抗病毒活性。结果表明成功构建重组表达质粒pET-30-IFN-α和pET-30-IFN-γ;SDS-PAGE可检测到相对分子质量为21.3Ku和19.4Ku的蛋白条带,表达产物主要以包涵体形式存在;经Ni2+-NTA亲和层析纯化,获得高纯度重组蛋白;纯化的猪IFN-α和IFN-γ抗星状病毒复制的活性分别为3.15×103U·mg-1和2.48×103U·mg-1。
- 赵伟鸽单同领朱建国林源华修国
- 关键词:原核表达纯化抗病毒活性
- 鸡源性抗新城疫病毒磷蛋白单链抗体的筛选
- 新城疫病毒的结构蛋白磷蛋白参与病毒RNA的合成,因此,磷蛋白在研究预防和治疗新城疫病毒方面起着重要的作用.本研究以纯化后的新城疫病毒磷蛋白为抗原,从已经构建的免疫单链抗体库中筛选抗磷蛋白的scFv.根据Genbank中已...
- 李本强叶家欣林源王曼贾锐朱建国
- 牛血清中分支杆菌抗体的ELISA检测方法及抗原
- 一种生物技术领域的牛血清中分支杆菌抗体的ELISA检测方法及抗原;所述ELISA检测方法包括如下步骤:步骤一,取氨基酸序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的蛋白质作为抗原;步骤二,采用常规ELISA方...
- 朱建国刘芳林源
- 文献传递
- 鸡源性抗新城疫病毒F48E9单链抗体的构建及筛选
- 本研究建立了一种筛选鸡源性抗新城疫病毒单链抗体的间接ELISA方法.从免疫鸡脾脏中提取出了总RNA,通过反转录合成了cDNA.以cDNA为模版扩增鸡VH和VL基因.通过SOE-PCR法扩增出鸡scFv基因.然后连接到pO...
- 李本强叶家欣林源王曼朱建国
- 集约化养猪场猪舍的布局方法
- 本发明涉及一种集约化养猪场猪舍的布局方法,首先按猪场生产规模及执行的周作业制,确定各生产阶段所需的猪舍独立单元数量,并分别按产房、保育舍进行设置,每个独立单元按猪的不同生产阶段特点配置,猪舍之间的空间相互独立,并保持合适...
- 朱建国原泉水林源
- 文献传递
- 开设“改善单链抗体亲合力的分子结构改造”特色实验课的体会
- 2013年
- 为本科生,开设了"改善单链抗体亲合力的分子结构改造"特色实验课,内容包括改善单链抗体亲和力的置换碱基确定及PCR引物设计实验,点突变单链抗体基因扩增及其重组表达质粒构建实验,点突变单链抗体表达及亲和力测定分析实验。通过实验,使学生掌握了抗体分子结构与其亲合力的关系的基本原理以及通过结构改造改善抗体分子功能的基本技术。对增强学生对生物技术的好奇心和兴趣,启发学生科研创新意识,培养学生的科研能力起到了积极的作用。
- 朱建国林源李本强
- 关键词:生物技术
- 具有反应原性的分泌蛋白和其编码核酸及引物对
- 一种生物技术领域的具有反应原性的分泌蛋白和其编码核酸及引物对;本发明涉及一种蛋白质,该蛋白质是由碱基序列如SEQ ID NO:1所示的核酸编码的;本发明涉及一种核酸,该核酸的碱基序列如SEQ ID NO:1所示;本发明还...
- 朱建国刘芳林源
- 文献传递
- 重组鸡IFN-α核心片段rIFN-α1的制备方法
- 一种重组鸡IFN-α核心片段rIFN-α1的制备方法是,提取鸡脾脏RNA,反转录为cDNA,以cDNA为模板,采用套式PCR的方法,首先用能扩增鸡IFN-α全长基因的外引物进行第一轮扩增,然后用自行设计的内引物扩增相应亚...
- 朱建国王建民林源李本强
- 文献传递