胡理怀
- 作品数:4 被引量:7H指数:1
- 供职机构:温州医科大学更多>>
- 发文基金:浙江省重点科技创新团队项目国家杰出青年科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 温州地区汉族人群CYP2C19和CYP2C9基因多态性分析被引量:7
- 2014年
- 目的:研究温州地区汉族人群CYP2C19、CYP2C9基因多态性分布。方法:采用聚合酶链式反应和测序方法,对287例健康人群CYP2C19、CYP2C9基因多态性进行分析。结果:温州地区汉族人群的CYP2C19*1、CYP2C19*2和CYP2C19*3三种等位基因的频率分别为65.16%、29.27%和5.57%;CYP2C19*1/*1、CYP2C19*1/*2、CYP2C19*1/*3、CYP2C19*2/*3、CYP2C19*2/*2和CYP2C19*3/*3基因型的频率分别为44.95%、33.45%、6.97%、4.18%、10.45%和0.00%,弱代谢率为14.63%;CYP2C9*1和CYP2C9*3等位基因频率分别为97.74%和2.26%,CYP2C9*1/*1和CYP2C9*1/*3的基因频率为95.47%和4.53%,未发现CYP2C9*3/*3。结论:温州地区汉族人群CYP2C19和CYP2C9弱代谢率与已报道的汉族人群基本一致,与日本人群相近,显著高于欧美人群。
- 周怀彬王金丹胡理怀温超玮吕建新
- 关键词:P450CYP2C19CYP2C9多态性汉族
- 实时荧光定量PCR检测精子线粒体DNA的提取效率
- 2011年
- 目的:测定宝生物工程有限(大连)公司和上海杰美基因医药科技有限公司两种试剂盒精子线粒体DNA提取的效率,以及核基因组DNA的残留。方法:CASA法计数精子数量,试剂盒提取线粒体DNA,TaqMan法荧光实时定量PCR,利用标准曲线测定线粒体基因Cox-I片段、核基因β-actin片段的拷贝数,计算出精子线粒体DNA的提取效率和核基因组DNA的残留。结果:两种试剂盒精子线粒体DNA提取效率分别是:0.44%±0.03%和6.19%±0.17%。核基因组DNA的残留率分别为4.71%±0.76%和38.1%±1.97%。结论:后者线粒体DNA提取效率高一个数量级,但核基因组DNA的残留率也高一个数量级。
- 杨雷胡理怀杨宗郑九嘉金龙金
- 关键词:实时荧光定量PCR线粒体DNA精子TAQMAN
- PCA3基因启动子多态性快速分型的DHPLC法建立
- 2010年
- 目的建立DHPLC技术分析PCa特异性PCA3基因启动子多态性的技术平台。方法在PCA3基因启动子区域设计1对引物,以本室先前已经建立的11种(C2T6、C2T5、C3T5、C2T5/C2T6、C3T5/C3T4、C3T5/C4T5、C3T5/C2T5、C3T5/C2T6、C3T5/C1T8、C2T5/C3T4、C2T6/C2T7)已知多态性的PCA3基因启动子的克隆质粒为标准品,通过优化DHPLC检测体系,建立其多态性克隆质粒的标准图谱。采用完全随机设计,从200例病理确诊为PCa患者中选取147例,对其PCA3基因启动子的扩增产物进行DHPLC分析,比较各标本洗脱峰与标准克隆质粒的DHPLC图谱,以判断临床标本PCA3基因多态性类型,并对这些基因型再行克隆测序予以验证。结果通过克隆质粒优化DHPLC检测体系,最适检测体系为:含44.3%A洗脱液(0.1mol/L TEAA、0.025%ACN)和55.7%B洗脱液(0.1mol/L TEAA、25%ACN)的起始洗脱梯度,含35.3%A洗脱液和64.7%B洗脱液的终止洗脱梯度,柱温53℃,流速:0.9ml/min,在该条件下DHPLC用8种杂合型克隆质粒(C2T5/C2T6、C3T5/C3T4、C3T5/C4T5、C3T5/C2T5、C3T5/C2T6、C3T5/C1T8、C2T5/C3T4、C2T6/C2T7)进行重复性验证,结果显示,同一多态性色谱峰中2峰的出峰时间之差的批间CV值在0%~6.67%之间。11种克隆质粒多态性标本仅通过1~2次洗脱,就能根据峰型和各峰的出峰时间将其区分开。147例PCa患者中,144例DHPLC检测结果和克隆测序结果一致(Kappa=1,P=0.000),并出现3种新的峰型,经克隆测序验证为3种新的多态性(C3T5/C1T6、C2T5/C1T8、C3T5/C2T7)。结论成功建立的DHPLC分析PCA3基因启动子多态性的技术方法,可对PCA3基因启动子多态性进行基因型别鉴定。该方法具快速、准确、经济、高通量、重复性好、自动化等特点,为进一步研究PCa基因多态性提供了技术平台。
- 胡王强孔凡慧张晓霞周武陈兵华胡理怀陶志华
- 关键词:前列腺肿瘤