袁小宁
- 作品数：6 被引量：14H指数：2
- 供职机构：广西大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 甘蔗花叶病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立和应用
- 本文建立了甘蔗花叶病毒(SCMV)RT-LAMP可视化检测方法.针对甘蔗花叶病毒的cp基因保守区设计引物,建立并优化了特异性检测甘蔗花叶病毒的高灵敏度RT-LAMP反应体系.所优化的SCMVRT-LAMP方法灵敏度高,对...
- 司慧娟袁小宁白山廖永凤温荣辉陈保善
- 关键词：甘蔗花叶病毒环介导等温扩增
- 利用RT-LAMP快速检测甘蔗花叶病毒的方法
- 一种利用RT-LAMP快速检测甘蔗花叶病毒的方法，包括如下步骤：根据NCBI上提供的甘蔗花叶病毒的序列设计4条LAMP特异引物F3、B3、FIP、BIP，样品提取RNA反转录成cDNA之后进行RT-LAMP反应，通过对反...
- 温荣辉陈保善司慧娟吕榜丽周龙武徐正赢袁小宁唐瑶
- 文献传递
- 2型猪链球菌SspA基因序列及其免疫原性分析被引量：4
- 2015年
- 【目的】明确2型猪链球菌的枯草杆菌素样丝氨酸蛋白酶(Ssp A)基因序列特征及其原核表达重组蛋白的免疫原性,为2型猪链球菌病的诊断及疫苗研究奠定基础。【方法】针对Ssp A基因上、下游序列分别设计1对引物,从112株2型猪链球菌临床分离株中扩增其相应片段,并进行测序分析;同时以Ssp A基因的重组质粒p ET28a-Ssp N、p ET28a-Ssp M和p ET28a-Ssp C分别转化感受态大肠杆菌BL21(DE3)后经IPTG诱导表达,再以SDS-PAGE检测融合蛋白表达情况,Western blotting鉴定其免疫原性。【结果】Ssp A基因上游片段较保守,而下游片段变异区间较大。在IPTG诱导下,含有重组质粒p ET28a-Ssp N、p ET28a-Ssp M和p ET28a-Ssp C的菌株表达出3段融合蛋白,其中,Ssp N和Ssp C重组蛋白存在于破碎菌体的上清液中,而Ssp M重组蛋白以包涵体形式存在于沉淀中,其大小为:Ssp N重组蛋白66 k D,Ssp M重组蛋白65 k D,Ssp C重组蛋白32 k D。Western blotting鉴定结果显示,3段重组蛋白均能与2型猪链球菌感染血清发生反应,且以Ssp N重组蛋白反应最强烈,而与以全菌灭活苗制备的猪血清未发生特异性反应。【结论】2型猪链球菌Ssp A基因上游片段较保守,经大肠杆菌重组表达的Ssp N蛋白免疫原性较强,且具备鉴别2型猪链球菌感染与免疫的潜力,可作为研究猪链球菌病血清学诊断的候选抗原片段。
- 胡巧云袁小宁熊毅何奇松黄胜斌孙翔翔吴军颜健华冯淑萍李军郭建刚
- 关键词：2型猪链球菌免疫原性
- 广西不同年龄猪群中2型猪链球菌抗体水平调查分析
- 2015年
- 为调查规模化猪场不同年龄猪群中2型猪链球菌（S.suis 2）抗体水平,本研究采用以荚膜多糖为抗原的间接ELISA对来自广西地区母猪群、肥猪群、生长猪群共1 908份血清样品进行了S.suis 2抗体检测和分析。结果显示：成年猪群中抗S.suis 2的抗体水平普遍较高,种猪场母猪血清抗体阳性率可高达95%以上,不同地区屠宰场的育肥猪血清抗体阳性率在39.2%-97.5%。对不同日龄仔猪群抗体水平检测分析显示：14日龄-42日龄期间,抗体水平随仔猪日龄的增长而呈逐渐下降的趋势;而42日龄-130日龄期间,抗体水平随日龄的增长而呈逐渐上升的趋势。此外,经产母猪群抗体水平略高于后备母猪群,并且随胎次的增加,抗体的离散度缩小。以上结果表明S.suis 2抗体在仔猪生长阶段的空白期即42日龄时,仔猪群抗体水平最低。因此,在这个阶段和之前做好S.suis的预防和免疫工作对猪群链球菌病的防控至关重要。
- 胡巧云袁小宁熊毅喻正军何奇松黄胜斌颜健华李军郭建刚
- 关键词：2型猪链球菌抗体监测免疫程序
- 甘蔗花叶病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立和应用被引量：8
- 2014年
- 本文建立了甘蔗花叶病毒(SCMV)RT-LAMP可视化检测方法。针对甘蔗花叶病毒的cp基因保守区设计引物,建立并优化了特异性检测甘蔗花叶病毒的高灵敏度RT-LAMP反应体系。所优化的SCMV RT-LAMP方法灵敏度高,对于SCMV cp基因的最低检测量为20 fg,可从简单提取的甘蔗总RNA中检出病毒核酸。研究结果表明所建立的针对SCMV的RT-LAMP体系具有特异性强、灵敏度高、操作简单和快速的特点,在实际检测中展示出良好的应用前景。
- 司慧娟袁小宁白山廖永凤温荣辉陈保善
- 关键词：甘蔗花叶病毒RT-LAMP病毒检测
- 广西地区猪瘟流行毒株E2基因的序列测定与分析被引量：2
- 2014年
- 【目的】了解广西地区流行猪瘟病毒（CSFV）E2基因的变异规律与趋势,及其与疫苗毒株基因的差异性,为制定猪瘟防控措施提供科学依据。【方法】对广西地区流行CSFV毒株的E2基因进行克隆及序列测定,并与兔化弱毒（HCLV）、石门（Shimen）毒株的E2基因进行同源性比对分析,绘制遗传进化树。【结果】广西地区流行CSFV毒株与HCLV株、Shimen株的核苷酸序列同源性为81.9%～83.3%和81.1%～82.4%,推导氨基酸序列同源性为89.3%～90.6%和87.9%～89.5%;不同广西地区流行毒株间的核苷酸序列及其推导氨基酸序列同源性分别为90.8%～99.5%和94.1%～99.5%,且均属于S2基因群的S2.1亚群,其中广西玉林株GXYL1、GXYL2、GXYL3、GXYL4、GXYL5均属于S2.1b子群,而广西贺州株GXHZ1、GXHZ2与广西北海株GXBH1、GXBH2株属于S2.1c子群。与HCLV株、Shimen株的E2基因编码氨基酸序列相比,9株广西地区流行CSFV毒株共有49处氨基酸发生变异,其中与抗原特性有关的变异有5处,分别为G713E、T724Y、E727H、I732S和S734R位点。【结论】广西地区流行CSFV毒株随时间推移的变异不明显,但其遗传变异总趋势朝着偏离疫苗株的方向发展。
- 吴军袁小宁杨可妍欧莹曹佳媛孙翔翔曾咏芳覃雨阳熊毅
- 关键词：猪瘟病毒E2基因同源性
