陈光达
- 作品数：6 被引量：32H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”陕西省科技攻关计划陕西省农业科技创新项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 表达IBDV VP2蛋白重组减毒沙门菌活载体疫苗株的构建及免疫原性分析被引量：5
- 2011年
- 通过PCR克隆出IBDV VP2基因,将其插入到表达载体pYA3341中,构建重组质粒pYA3341-VP2。将重组质粒电转入鼠伤寒沙门菌疫苗株X4550(缺失Asd、Cya、Crp基因),获得重组疫苗菌株X4550(pYA3341-VP2)。进行重组菌VP2蛋白表达的鉴定;测定重组菌的稳定性、生长曲线、安全性以及小鼠免疫试验。结果表明,酶切鉴定证实重组质粒构建成功;SDS-PAGE和Western blot证实重组菌表达的VP2蛋白能与鸡抗IBDV阳性血清特异性结合;重组菌株在体外营养选择压力下,可稳定地携带重组质粒传代繁殖,在体内可稳定地定居于肠系膜淋巴结和脾脏;小鼠口服试验证实重组菌无毒性作用;口服重组菌免疫小鼠,ELISA检测产生了抗IBDV抗体;中和试验表明产生的抗体具有中和活性。本试验成功构建了能稳定表达IBDV VP2蛋白的口服减毒鼠伤寒沙门菌疫苗株X4550(pYA3341-VP2),为研究IBD口服基因工程疫苗奠定了基础。
- 许信刚赵红妮陈光达张宽童德文
- 关键词：传染性法氏囊病病毒VP2蛋白减毒鼠伤寒沙门菌
- 猪六种病毒多重PCR检测方法的建立及初步应用
- 猪瘟病毒（classical swine fever virus，CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcinereproductive and respiratory syndrome virus， PRRSV）、...
- 陈光达
- 关键词：PCR病毒感染
- 文献传递
- 日本脑炎病毒引起细胞凋亡的信号转导通路研究进展被引量：2
- 2011年
- 日本脑炎病毒(JEV)是虫媒传染性病毒,感染动物后会产生严重的脑炎症状,严重威胁着公共卫生安全。病毒粒子主要通过胞吞作用进入宿主细胞,在细胞浆复制,在细胞内部膜结构上成熟。JEV侵入神经细胞引起脑炎症状,其机理可能与JEV诱导细胞凋亡有关。目前,研究人员就有关JEV诱导细胞凋亡信号转导途径方面做了大量研究工作。在被JEV感染的细胞内会发生一系列蛋白酶激活与抑制反应,继而发生线粒体外膜通透性改变、氧化应激以及内质网应激等诱导细胞发生凋亡。凋亡机制和信号转导通路的研究对JEV的致病机理以及它与宿主之间的相互作用有重要意义。论文对JEV诱导细胞发生细胞周期抑制和凋亡的现象、信号转导通路进行了综述,并对研究方向进行了展望。
- 张宽陈光达许信刚童德文
- 关键词：日本脑炎病毒细胞凋亡信号转导
- 检测CSFV、PRRSV和JEV感染的多重RT-PCR方法的建立及初步应用被引量：3
- 2012年
- 为了建立1种能够应用于临床样本可以同时检测CSFV、PRRSV、JEV 3种RNA病毒感染的多重RT-PCR方法。根据GenBank收录的CSFV、PRRSV、JEV的基因组全序列,选择3种病毒的特异性保守区序列设计了3对特异性引物,优化多重RT-PCR反应条件,建立了能够同时检测3种病毒混合感染的多重RT-PCR诊断方法。特异性分析表明,应用该方法分别从CSFV、PRRSV、JEV毒株以及3种病毒的混合物中扩增出大小分别为777、451、605bp的3条特异性条带,其他对照组检测均为阴性;敏感性分析表明,该方法最低检测量分别为14.2、10.0、8.0pg的CSFV、PRRSV、JEV的RNA;初步应用性试验表明,52份疑似病料中PRRSV、CSFV和JEV的阳性率分别为46.1%、21.1%和1.92%;CSFV和PRRSV混合感染阳性率为21.1%。CSFV、PRRSV和JEV混合感染阳性率为3.84%。本试验建立的多重RT-PCR检测方法具有敏感性高、特异性强、重复性好的特点,可以有效检测CSFV、PRRSV和JEV的混合感染。
- 许信刚陈光达童德文
- 关键词：CSFVPRRSVJEV多重RT-PCR
- PCV-2、PPV和PRV多重PCR检测方法的建立及初步应用被引量：6
- 2011年
- 【目的】建立可用于临床同时检测PCV-2、PPV和PRV 3种DNA病毒感染的多重PCR方法。【方法】根据GenBank中收录的PCV-2、PPV和PRV的基因组序列,选择3种病毒的特异性保守区设计3对引物,通过优化多重PCR的反应条件,建立了能够同时检测3种病毒混合感染的多重PCR方法,对该方法的特异性、敏感性、稳定性进行检测,并将其用于临床病料的检测。【结果】多重PCR方法中,当引物浓度均为1.0μmol/L,退火温度为57.2℃时,各目的片段均可较好地扩增。特异性试验结果表明,建立的多重PCR方法可从PCV-2、PPV、PRV病毒DNA中分别扩增出长度为353,265和198bp的目的片段,从3种病毒DNA的混合物中也可扩增出上述目的片段,而其他对照组的扩增结果均呈阴性。敏感性试验结果表明,建立的多重PCR方法对PCV-2、PPV和PRV的最低检测量分别为26.88,25.34和24.9pg/μL。在不同时间对每份样品重复检测3次,结果一致,表明该方法具有良好的可重复性。临床应用结果表明,39份疑似病料中,PCV-2、PPV和PRV的阳性率分别为53.84%,17.95%和5.13%,PCV-2与PPV混合感染的阳性率为15.38%,PCV-2、PPV和PRV混合感染的阳性率为2.57%。【结论】建立的多重PCR方法敏感性高、特异性强、重复性好,可以有效检测PCV-2、PPV和PRV的混合感染。
- 陈光达许信刚童德文
- 关键词：猪细小病毒猪伪狂犬病病毒
- 猪传染性胃肠炎病毒陕西株的分离鉴定被引量：12
- 2011年
- 从陕西省某猪场临床上表现为腹泻症状的病死仔猪肠道内容物及粪便材料中分离获得1株病毒,采用PK-15细胞培养、理化试验及中和试验鉴定后,证实该分离株为猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)。克隆分离株N基因,并将该基因核苷酸序列和推导的氨基酸序列与其他不同来源的TGEV毒株进行比较分析。结果表明,分离株N基因与其他毒株核苷酸的同源性为94.3%～98.3%,氨基酸同源性为95.6%～99.4%。系统进化树结果表明,分离株与TGEV HN2002株(河南株)亲缘关系最近。
- 丁利陈光达许信刚童德文
- 关键词：TGEVN基因
